Патенты автора Сенников Сергей Витальевич (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к молекулярной иммунологии и аллергологии, и может быть использовано для диагностики аллергической бронхиальной астмы. В пробы крови добавляют моноклональные антитела к TNFRI, TNFR2, CD19, CD5, CD4, CD8, CD45RA. Производят анализ мононуклеарных клеток периферической крови методом проточной цитометрии. Выделяют гейтированием CD19+CD5+ В-лимфоциты, наивные цитотоксические клетки CD8+CD45RA+, Т-хелперные клетки CD4+. Определяют показатели экспрессии рецепторов TNFR1 и TNFR2 путем подсчета количества рецепторов на клетках изучаемых субпопуляций. Определяют процент клеток, несущих рецепторы TNFRI и TNFR2 в каждой выделенной субпопуляции. Рассчитывают на основе параметрической логистической регрессионной модели вероятность наличия аллергической бронхиальной астмы по формуле: гдее=2,7182818 - математическая константа - основание натурального логарифма, α0 = 12,455816360508 - коэффициент, α1 = -0,427698308974449 - коэффициент, α2 = -0,006454484262661- коэффициент, α3 = -0,005092094923 - коэффициент, х1 = процент клеток, несущих одновременно рецепторы TNFR1 и TNFR2 среди CD19+CD5+ В-лимфоцитов, х2 = среднее количество рецепторов 1-го типа на TNFR1-позитивных CD8+CD45RA+ цитотоксических наивных Т-лимфоцитах, х3 = среднее количество рецепторов 1-го типа на TNFR1-позитивных CD4+ Т-хелперных клетках. Если Р более или равно 0,5, то диагностируют наличие аллергической бронхиальной астмы. Способ обеспечивает возможность диагностики аллергической бронхиальной астмы за счет оценки среднего количества рецепторов и процента клеток, экспрессирующих рецепторы 1-го и 2-го типа к TNF-α на субпопуляциях мононуклеарных клеток у пациентов с подозрением на бронхиальную астму. 3 ил., 4 пр.

Настоящее изобретение относится к иммунологии и биотехнологии и представляет собой способ увеличения миграции плазмоцитоидных дендритных клеток к тимоцитам мышей in vitro. Для осуществления способа получают B220+CD11c+ плазмоцитоидные дендритные клетки из клеток костного мозга культивированием их с Flt3-L. Далее осуществляют трансфекцию плазмоцитоидных дендритных клеток ДНК-конструкцией, кодирующей мышиный белок CCR9. Настоящее изобретение позволяет повысить эффективность миграции плазмоцитоидных дендритных клеток к тимоцитам мышей. 4 з.п. ф-лы, 7 ил., 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для определения качественных параметров иммуносупрессивных клеток пациентов с раком молочной железы. Осуществляют забор периферической крови пациента. Делят образец периферической крови на две части: для определения фенотипических характеристик и количества рецепторов на поверхности клеток и для тестирования цитотоксической активности. Осуществляют мечение лейкоцитов периферической крови моноклональными антителами к поверхностным рецепторам CD4, CD8, TIM-3, PD-1. В случае увеличенного высвобождения внутриклеточного фермента лактатдегидрогеназы определяют противоопухолевую активность лейкоцитов. Сниженную цитотоксическую активность определяют по увеличению относительного количества PD-1 и TIM-3-позитивных CD4+ и CD8+ Т-клеток, абсолютного количества TIM-3 позитивных CD4+ и CD8+ Т-клеток, увеличению PD-1- позитивных и CD8+ Т-клеток и по увеличению количества молекул на клетку для TIM-3-позитивных CD8+ Т-клеток и PD-1-позитивных CD4+ Т-клеток по сравнению с клетками без окрашивания моноклональными антителами. Изобретение обеспечивает повышение достоверности определения степени иммуносупрессии у онкологических пациентов. 1 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к ревматологии, и может быть использовано для ранней диагностики ревматоидного артрита. Способ заключается в том, что в пробы крови добавляют моноклональные антитела к TNFRI, TNFR2, CD4, CD45R0, CD45RA, CD3, производят анализ мононуклеарных клеток периферической крови методом проточной цитометрии. Выделяют гейтированием CD3+--Т-лимфоциты, наивные Т-хелперные клетки (CD4+CD45RA+), Т-хелперные клетки памяти (CD4+CD45R0+). Далее определяют показатели экспрессии рецепторов TNFR1 и TNFR2 путем подсчета количества рецепторов на клетках изучаемых субпопуляций, определяют процент клеток, несущих рецепторы TNFRI и TNFR2 в каждой выделенной субпопуляции, после чего рассчитывают на основе параметрической логистической регрессионной модели вероятность наличия РА по формуле где е=2,7182818 - математическая константа - основание натурального логарифма, α0=2.386696717005736 - коэффициент, α1=-0.00276285111326 - коэффициент, α2=0,00189985337763 - коэффициент, α3=-0.28206543500757 - коэффициент, x1 - количество рецепторов TNFR2 на CD3+ Т-лимфоцитах, х2 - количество TNFR1 на Т-хелперных клетках памяти CD4+CD45R0+, x3 - процент TNFR1 положительных клеток среди наивных Т-хелперных клеток CD4+CD45RA+. При значении Р≥0,5 имеется вероятность наличия ревматоидного артрита. Использование данного способа оценки субпопуляций мононуклеарных: клеток TNFR1+TNFR2 - клеток среди наивных Т-хелперных клеток и количества рецепторов 1 типа на Т-хелперных клетках памяти, а также рецепторов 2 типа на CD3+ Т-клетках позволяет различать показатели здоровых доноров и больных РА на ранней стадии. 2 з.п. ф-лы, 2 табл., 5 пр., 1 ил.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложен способ индукции иммунологической толерантности на трансплантационные антигены у млекопитающих. Данное изобретение может найти дальнейшее применение в снижении трансплантационных реакций, включая отторжение трансплантата и реакцию трансплантата против хозяина. 6 ил., 2 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Предложены иммуногенные полиэпитопные вакцинные конструкции, содержащие эпитопы опухоль-ассоциированных антигенов - ЦТЛ-эпитопы и Т-хелперные эпитопы - и оптимизированные спейсерные последовательности. Изобретение может быть использовано для профилактики и терапии раковых заболеваний. 10 н. и 3 з.п. ф-лы, 9 ил., 1 пр.

Изобретение относится к медицине и касается способа выделения подклассов иммуноглобулина G (IgG) аутоантител к иммунорегуляторному цитокину фактору некроза опухоли (TNF), заключающегося в получении общей фракции IgG аффинной хроматографией с использованием сорбента Protein G Sepharose с последующей нейтрализацией, объединением и диализом IgG, очистке полученной фракции IgG от примеси TNF. При этом выделение подклассов IgG производят из фармацевтического препарата иммуноглобулина для внутривенного введения, после получения фракции IgG осуществляют ее очистку от примеси TNF ультрафильтрацией с использованием центрифужных фильтров, затем проводят этап выделения антител IgG3 и получения смеси IgG1, IgG2, IgG4 аффинной хроматографией; затем выделяют антитела IgG1 многократной негативной аффинной хроматографией с последующим объединением и диализом, затем выделяют антитела IgG2 многократной негативной аффинной хроматографией с последующим объединением и диализом, затем проводят очистку антител IgG1 и IgG2 от примеси IgG4 негативной аффинной хроматографией, после чего проводят выделение специфических аутоантител к TNF подклассов IgG1, IgG2, IgG3 аффинной хроматографией с последующей нейтрализацией, объединением и диализом. Изобретение обеспечивает получение чистых фракций аутоантител к TNF подклассов IgG1, IgG2 и IgG3. 1 пр., 1 табл.

Изобретение относится к области иммунологии и биотехнологии. Изобретение представляет собой способ иммунотерапии рака молочной железы с помощью антиген-активированных дендритных клеток, включающий выделение мононуклеарных клеток из периферической крови пациента, разделение клеток на прилипающую и неприлипающую фракции, добавление к прилипающей фракции МНК ростовых факторов, нагрузка незрелых дендритных клеток антигенами лизата аутологичных опухолевых клеток рака молочной железы in vitro, стимуляцию созревания дендритных клеток, совместное культивирование дендритных клеток с лимфоцитами неприлипающей фракции в соотношении 1:10 с добавлением IL-12 и IL-18, причем добавление к прилипающей фракции мононуклеарных клеток ростовых факторов осуществляют в течение 72 часов, нагрузку дендритных клеток антигенами опухолевого лизата проводят в течение 24 часов, стимуляцию созревания дендритных клеток осуществляют в течение 48 часов, затем производят оценку экспрессии маркеров на поверхности зрелых дендритных клеток, а препарат, полученный при совместном культивировании в течение 96 часов зрелых дендритных клеток и лимфоцитов неприлипающей фракции мононуклеарных клеток, замораживают с последующей разморозкой и фракционированием, причем фракционирование размороженных клеток и их культивирование осуществляют в течение 2-4 часов непосредственно перед инъекцией, в результате чего клетки разделяются на прилипающую и неприлипающую фракции, а затем обогащенную дендритными клетками прилипающую фракцию вводят пациенту подкожно, а активированные лимфоциты неприлипающей фракции с повышенным содержанием цитотоксических клеток и Т-хелперов первого типа вводят пациенту внутривенно на фоне премедикации дексаметазоном, по меньшей мере 3-4 курсами в течение 3-4 месяцев, причем общее количество введенных клеток не менее 100 миллионов. Изобретение позволяет обеспечить защиту от формирования отдаленных метастазов и стимулирует специфический цитотоксический ответ против существующих. 7 ил.

Изобретение относится к области иммунологии и биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения антиген-специфических цитотоксических клеток, обладающих противоопухолевой цитотоксической активностью против клеток немелкоклеточного рака легкого, включающий получение дендритных клеток из моноцитов периферической крови больного немелкоклеточным раком легкого, культивирование дендритных клеток в присутствии рекомбинантного человеческого гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (рчГМ-КСФ) и интерлейкина-4 (рчИЛ-4), с последующей нагрузкой антигенами опухоли и созреванием с помощью фактора некроза опухоли (ФНО-α) и интерлейкина-1β (ИЛ-1β) в течение 24 часов, после чего зрелые дендритные клетки культивируют совместно с неприлипающей фракцией аутологичных мононуклеарных клеток, где совместное культивирование зрелых дендритных клеток и неприлипающей фракции аутологичных мононуклеарных клеток проводят в присутствии ингибитора ИДО 1-метил-L-триптофана (1 МТ). Изобретение позволяет генерировать in vitro клоны Т-клеток с активностью цитотоксических Т-лимфоцитов и Т-хелперов 1 типа, необходимых для формирования эффективного противоопухолевого ответа против клеток немелкоклеточного рака легкого. 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способу получения зрелых антиген-активированных дендритных клеток (ДК) трансфекцией РНК опухолевых клеток рака молочной железы, и может быть использовано в медицине. Получают зрелые антиген-активированные ДК за счет сочетания магнитной трансфекции РНК опухолевых клеток рака молочной железы в соотношении 0,3 мкг РНК к 0,3 мкл взвеси магнитных частиц со стимулятором созревания в дозе 25 нг/мл в течение 24 часов. Изобретение позволяет эффективно стимулировать противоопухолевый цитотоксический иммунный ответ против клеток рака молочной железы. 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к иммунологии, и может быть использовано для получения противоопухолевых ЦТЛ. Способ предусматривает антигенную активацию полученных зрелых ДК с использованием ДНК-конструкции, кодирующей эпитопы KIFGSLAFL и RLLQETELV опухоль-ассоциированного белка HER2, совместное культивирование с аутологичными зрелыми антиген-активированными ДК из прилипающей фракции всех клеток неприлипающей фракции МНК, с последующим выделением из совместной культуры ДК и МНК специфичных к указанным эпитопам ЦТЛ методом магнитной сепарации с использованием антигенспецифических реагентов, обеспечивающих обратимое окрашивание выделяемых клеток. После выделения HER2-специфических ЦТЛ стимулируют их пролиферацию путем культивирования в присутствии внесенных одновременно цитокинов рчИЛ-2, рчИЛ-7 и рчИЛ-15 c конечной концентрацией каждого из них 50 нг/мл в течение 14-20 суток. Изобретение обеспечивает индукцию эффективного антигенспецифического противоопухолевого цитотоксического иммунного ответа против опухолевых клеток с гиперэкспрессией антигена HER2, характеризующегося увеличением процента гибели HER2-экспрессирующих опухолевых клеток. 1 з.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению иммуногенных полипептидов против рака молочной железы, и может быть использовано в медицине. Методами генной инженерии получают полипептиды с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:105 и 106. Изобретение позволяет стимулировать противоопухолевый иммунный ответ у больных раком молочной железы. 2 н.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к биотехнологии, белковой инженерии и медицине. Описан способ получения антиген-специфических цитотоксических клеток, обладающих противоопухолевой активностью против клеток рака молочной железы. Настоящее изобретение обеспечивает генерацию in vitro антиген-специфических клонов T-клеток с активностью CD8+ T-клеток и T-хелперов 1 типа, необходимую для формирования эффективного противоопухолевого ответа против клеток рака молочной железы. Изобретение может быть использовано в медицине. 1 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для индукции противоопухолевого иммунного ответа in vitro. Способ включает получение прилипающей и неприлипающей фракций мононуклеарных клеток (МНК), выделенных из периферической крови больного, совместное культивирование выделенных из периферической крови больного аутологичных МНК неприлипающей фракции со зрелыми дендритными клетками (ДК), полученными из прилипающей фракции МНК, трансфицированными РНК опухолевых клеток. После чего ДК подвергают стимулированному созреванию. Совместное культивирование неприлипающей фракции МНК и трансфицированных РНК аутологичных опухолевых клеток ДК проводят в течение пяти суток. При этом для получения зрелых ДК после трех суток культивирования прилипающей фракции МНК трансфицируют незрелые ДК опухолевой РНК, а через сутки после трансфицирования незрелые ДК подвергают еще в течение суток стимулированному созреванию путем добавления в культуру незрелых ДК фактора некроза опухоли-α (ФНО-α) и интерлейкина-1β (ИЛ-1β) при следующем соотношении компонентов: ФНО-α : ИЛ-1β=2,5:1. Изобретение позволяет эффективно индуцировать противоопухолевый цитотоксический иммунный ответ против клеток немелкоклеточного рака легкого in vitro с помощью дендритных клеток, трансфицированных РНК опухолевых клеток. 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к иммунологии, и может быть использовано для генерации цитотоксических клеток с активностью против клеток немелкоклеточного рака легкого. Способ заключается в совместном культивировании в присутствии рекомбинантного человеческого интерлейкина-12 и рекомбинантного человеческого интерлейкина-18, неприлипающей фракции мононуклеарных клеток (МНК), выделенных из периферической крови больного немелкоклеточным раком легкого с дендритными клетками, полученными из моноцитов прилипающей фракции МНК. Для получения зрелых ДК после трех суток культивирования прилипающей фракции МНК полученные незрелые ДК сначала сутки сокультивируют с опухолевым лизатом клеток немелкоклеточного рака легкого с последующим добавлением ФНО-α. Причем в течение суток после нагружения лизатом одновременно с добавлением провоспалительного цитокина ФНО-α вносят цитокин ИЛ-1β и проводят созревание нагруженных лизатом ДК в присутствии обоих цитокинов. Изобретение позволяет повысить эффективность генерации цитотоксических клеток с активностью против клеток немелкоклеточного рака легкого. 1 табл.

Изобретение относится к области генетической инженерии, молекулярной биологии и вакцинологии. Предложена полиэпитопная противотуберкулезная вакцинная конструкция для формирования иммунного ответа, обеспечивающая индукцию иммунного ответа CD8+ Т-лимфоцитов, состоящая из универсального полиэпитопного иммуногена, содержащего ЦТЛ-эпитопы, выбранные из иммунодоминантных антигенов М. tuberculosis, слитого с N-конца с убиквитином, и имеющая аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1. Вакцинная конструкция обеспечивает достижение эффективного терапевтического Т-клеточного иммунного ответа не только за счет антигенспецифических цитотоксических СD8+ Т-лимфоцитов, но и интенсивный ответ CD4+ Т-лимфоцитов. 1 табл., 11 ил.

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Способ определения уровня экспрессии гена МСР1 (CCL2) предусматривает оценку количества его мРНК методом полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) с детекцией сигнала в реальном времени в образцах клеток, тканей и биологических жидкостей человека. Разработан набор для количественного определения мРНК МСР1, включающий комбинации олигонуклеотидных праймеров и флюоресцентных зондов для ОТ-ПЦР в реальном времени, для определения количества кДНК гена МСР1 и нормировочных генов RPL32, АСТВ, PII. Использование группы изобретений позволяет уменьшить ошибки вычисления, вносимые при использовании одного нормировочного гена без увеличения числа амплификаций, а также уменьшить ошибки вычислений, возникающие при упрощенном предположении о равенстве эффективности реакций амплификации кДНК MCP1 и нормировачного гена, имеющего место в методе ∆∆Ct. 2 н.п. ф-лы, 2 ил., 3 табл., 1 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способам генерации антиген-специфических клеток с цитотоксической активностью против клеток рака молочной железы, и может быть использовано в медицине. Способ включает выделение мононуклеарных клеток (МНК) из периферической крови пациента, разделение клеток на прилипающую и неприлипающую фракции, добавление к прилипающей фракции МНК ростовых факторов, нагрузку дендритных клеток антигенами опухолевого лизата in vitro, стимуляцию созревания дендритных клеток в течение последующих суток. При этом к полученным незрелым ДК добавляют лизат аутологичных опухолевых клеток в дозе 100 мкг/мл, а еще через 48 часов в течение последующих 24 часов вносят рчФНО-альфа в дозе 25 нг/мл. Затем проводят совместное культивирование зрелых активированных лизатом дендритных клеток и неприлипающей фракции МНК в соотношении 1:10 в присутствии рекомбинантного человеческого интерлейкина-12 в дозе 10 нг/мл и рекомбинантного человеческого интерлейкина-18 в дозе 100 нг/мл. Изобретение позволяет повысить уровень цитотоксической и интерферон-продуцирующей активности антиген-активированных дендритных клеток при сокращении сроков их культивирования. 4 табл.

Изобретение относится к иммунологии, медицине и биотехнологии. Предложен способ стимуляции специфического противоопухолевого иммунного ответа против клеток рака молочной железы с помощью дендритных клеток, трансфецированных полиэпитопной ДНК-конструкцией. Полученные из периферической крови условно-здоровых доноров, трансфецированные полиэпитопной конструкцией, культивируются с неприлипшей фракцией мононуклеарных клеток. Способ позволяет повысить эффективность и экономичность получения цитотоксических лимфоцитов. 1 ил.
Изобретение относится к иммунологии и биотехнологии. Предложен способ in vitro генерации антиген-специфических цитотоксических клеток с активностью против клеток рака яичника. Совместно культивируют неприлипающую фракцию мононуклеарных клеток (МНК) и зрелые дендритные клетки (ДК) в присутствии рекомбинантного человеческого интерлейкина-12 и рекомбинантного человеческого интерлейкина-18. МНК выделяют из периферической крови больных раком яичника. Зрелые ДК получают из моноцитов прилипающей фракции МНК после двух суток культивирования и сначала активируют лизатом аутологичных клеток рака яичника, а затем проводят созревание нагруженных лизатом ДК в течение суток в присутствии рекомбинантного человеческого ФНО-α. Использование изобретения обеспечивает сокращение стадии получения зрелых ДК, in vitro увеличивает цитотоксичность антиген-специфических цитотоксических клеток с противоопухолевой активностью и обеспечивает иммунный ответ по Т-хелпер 1 типу в отношении рака яичника, что может найти применение в терапии рака яичника. 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к созданию рекомбинантных плазмид, обеспечивающих экспрессию полиэпитопных опухоль-ассоциированных антигенов в дендритных клетках, способных стимулировать специфические цитотоксические клетки, и может быть использовано в медицине. Рекомбинантная плазмидная ДНК pCI-UB-POLYEPI содержит 11 эпитопов опухоль-ассоциированных антигенов колоректального рака, имеет размер 6 355 п.н. и экспрессирует следующую аминокислотную последовательность: DYKDDDDK-LLGVGTFVV-ADRIW-GLKAGVIAV-AAYARY-VLAFGLLLA-ADRIW-YQLDPKFITSI-AAYARY-IMIGVLVGV-ADRIW-YLSGADLNL-AAYARY-CGIQNSVSA-AAYARY-LLLLTVLTV-ADRIW-QYIKANSKFIGITEL-ANIY-SIINFEKL-ARY-SASFDGWATVSVIAL-ARY-SERVRTYWIIIELKHKARE-ARY-IQNDTGFYTLHVIKSDLVNEE. Сконструированной плазмидной ДНК pCI-UB-POLYEPI трансфицируют зрелые дендритные клетки, полученные добавлением к незрелым дендритным клеткам провоспалительного цитокина ФНО-α, таким образом активируя их. Затем активированные дендритные клетки культивируют совместно с мононуклеарными клетками периферической крови больных колоректальным раком для генерации антиген-специфических противоопухолевых цитотоксических клеток. Изобретение позволяет эффективно генерировать антигенспецифические цитотоксические клетки с противоопухолевой активностью in vitro, необходимые для иммунного ответа по T-хелпер 1 типу на антигены колоректального рака. 2 н.п .ф-лы, 1 ил., 4 пр.
Изобретение относится к области иммуногенетики и медицины

Изобретение относится к иммунологии и биотехнологии
Изобретение относится к иммунологии и биотехнологии, а именно к способам генерации антиген-специфических клеток с цитостатической активностью против клеток колоректального рака
Изобретение относится к иммунологии и биотехнологии, а именно к способам генерации антиген-специфических противотуберкулезных цитотоксических клеток

Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой способ получения трансгенных растений моркови, продуцирующих интерлейкин-10 человека
Изобретение относится к иммунологии и биотехнологии

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии высших растений

 


© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности
Наверх