Патенты автора Лопатникова Юлия Анатольевна (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к молекулярной иммунологии и аллергологии, и может быть использовано для диагностики аллергической бронхиальной астмы. В пробы крови добавляют моноклональные антитела к TNFRI, TNFR2, CD19, CD5, CD4, CD8, CD45RA. Производят анализ мононуклеарных клеток периферической крови методом проточной цитометрии. Выделяют гейтированием CD19+CD5+ В-лимфоциты, наивные цитотоксические клетки CD8+CD45RA+, Т-хелперные клетки CD4+. Определяют показатели экспрессии рецепторов TNFR1 и TNFR2 путем подсчета количества рецепторов на клетках изучаемых субпопуляций. Определяют процент клеток, несущих рецепторы TNFRI и TNFR2 в каждой выделенной субпопуляции. Рассчитывают на основе параметрической логистической регрессионной модели вероятность наличия аллергической бронхиальной астмы по формуле: гдее=2,7182818 - математическая константа - основание натурального логарифма, α0 = 12,455816360508 - коэффициент, α1 = -0,427698308974449 - коэффициент, α2 = -0,006454484262661- коэффициент, α3 = -0,005092094923 - коэффициент, х1 = процент клеток, несущих одновременно рецепторы TNFR1 и TNFR2 среди CD19+CD5+ В-лимфоцитов, х2 = среднее количество рецепторов 1-го типа на TNFR1-позитивных CD8+CD45RA+ цитотоксических наивных Т-лимфоцитах, х3 = среднее количество рецепторов 1-го типа на TNFR1-позитивных CD4+ Т-хелперных клетках. Если Р более или равно 0,5, то диагностируют наличие аллергической бронхиальной астмы. Способ обеспечивает возможность диагностики аллергической бронхиальной астмы за счет оценки среднего количества рецепторов и процента клеток, экспрессирующих рецепторы 1-го и 2-го типа к TNF-α на субпопуляциях мононуклеарных клеток у пациентов с подозрением на бронхиальную астму. 3 ил., 4 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к ревматологии, и может быть использовано для ранней диагностики ревматоидного артрита. Способ заключается в том, что в пробы крови добавляют моноклональные антитела к TNFRI, TNFR2, CD4, CD45R0, CD45RA, CD3, производят анализ мононуклеарных клеток периферической крови методом проточной цитометрии. Выделяют гейтированием CD3+--Т-лимфоциты, наивные Т-хелперные клетки (CD4+CD45RA+), Т-хелперные клетки памяти (CD4+CD45R0+). Далее определяют показатели экспрессии рецепторов TNFR1 и TNFR2 путем подсчета количества рецепторов на клетках изучаемых субпопуляций, определяют процент клеток, несущих рецепторы TNFRI и TNFR2 в каждой выделенной субпопуляции, после чего рассчитывают на основе параметрической логистической регрессионной модели вероятность наличия РА по формуле где е=2,7182818 - математическая константа - основание натурального логарифма, α0=2.386696717005736 - коэффициент, α1=-0.00276285111326 - коэффициент, α2=0,00189985337763 - коэффициент, α3=-0.28206543500757 - коэффициент, x1 - количество рецепторов TNFR2 на CD3+ Т-лимфоцитах, х2 - количество TNFR1 на Т-хелперных клетках памяти CD4+CD45R0+, x3 - процент TNFR1 положительных клеток среди наивных Т-хелперных клеток CD4+CD45RA+. При значении Р≥0,5 имеется вероятность наличия ревматоидного артрита. Использование данного способа оценки субпопуляций мононуклеарных: клеток TNFR1+TNFR2 - клеток среди наивных Т-хелперных клеток и количества рецепторов 1 типа на Т-хелперных клетках памяти, а также рецепторов 2 типа на CD3+ Т-клетках позволяет различать показатели здоровых доноров и больных РА на ранней стадии. 2 з.п. ф-лы, 2 табл., 5 пр., 1 ил.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложен способ индукции иммунологической толерантности на трансплантационные антигены у млекопитающих. Данное изобретение может найти дальнейшее применение в снижении трансплантационных реакций, включая отторжение трансплантата и реакцию трансплантата против хозяина. 6 ил., 2 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Предложены иммуногенные полиэпитопные вакцинные конструкции, содержащие эпитопы опухоль-ассоциированных антигенов - ЦТЛ-эпитопы и Т-хелперные эпитопы - и оптимизированные спейсерные последовательности. Изобретение может быть использовано для профилактики и терапии раковых заболеваний. 10 н. и 3 з.п. ф-лы, 9 ил., 1 пр.

Изобретение относится к медицине и касается способа выделения подклассов иммуноглобулина G (IgG) аутоантител к иммунорегуляторному цитокину фактору некроза опухоли (TNF), заключающегося в получении общей фракции IgG аффинной хроматографией с использованием сорбента Protein G Sepharose с последующей нейтрализацией, объединением и диализом IgG, очистке полученной фракции IgG от примеси TNF. При этом выделение подклассов IgG производят из фармацевтического препарата иммуноглобулина для внутривенного введения, после получения фракции IgG осуществляют ее очистку от примеси TNF ультрафильтрацией с использованием центрифужных фильтров, затем проводят этап выделения антител IgG3 и получения смеси IgG1, IgG2, IgG4 аффинной хроматографией; затем выделяют антитела IgG1 многократной негативной аффинной хроматографией с последующим объединением и диализом, затем выделяют антитела IgG2 многократной негативной аффинной хроматографией с последующим объединением и диализом, затем проводят очистку антител IgG1 и IgG2 от примеси IgG4 негативной аффинной хроматографией, после чего проводят выделение специфических аутоантител к TNF подклассов IgG1, IgG2, IgG3 аффинной хроматографией с последующей нейтрализацией, объединением и диализом. Изобретение обеспечивает получение чистых фракций аутоантител к TNF подклассов IgG1, IgG2 и IgG3. 1 пр., 1 табл.

Изобретение относится к области иммунологии и биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения антиген-специфических цитотоксических клеток, обладающих противоопухолевой цитотоксической активностью против клеток немелкоклеточного рака легкого, включающий получение дендритных клеток из моноцитов периферической крови больного немелкоклеточным раком легкого, культивирование дендритных клеток в присутствии рекомбинантного человеческого гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (рчГМ-КСФ) и интерлейкина-4 (рчИЛ-4), с последующей нагрузкой антигенами опухоли и созреванием с помощью фактора некроза опухоли (ФНО-α) и интерлейкина-1β (ИЛ-1β) в течение 24 часов, после чего зрелые дендритные клетки культивируют совместно с неприлипающей фракцией аутологичных мононуклеарных клеток, где совместное культивирование зрелых дендритных клеток и неприлипающей фракции аутологичных мононуклеарных клеток проводят в присутствии ингибитора ИДО 1-метил-L-триптофана (1 МТ). Изобретение позволяет генерировать in vitro клоны Т-клеток с активностью цитотоксических Т-лимфоцитов и Т-хелперов 1 типа, необходимых для формирования эффективного противоопухолевого ответа против клеток немелкоклеточного рака легкого. 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к иммунологии, и может быть использовано для получения противоопухолевых ЦТЛ. Способ предусматривает антигенную активацию полученных зрелых ДК с использованием ДНК-конструкции, кодирующей эпитопы KIFGSLAFL и RLLQETELV опухоль-ассоциированного белка HER2, совместное культивирование с аутологичными зрелыми антиген-активированными ДК из прилипающей фракции всех клеток неприлипающей фракции МНК, с последующим выделением из совместной культуры ДК и МНК специфичных к указанным эпитопам ЦТЛ методом магнитной сепарации с использованием антигенспецифических реагентов, обеспечивающих обратимое окрашивание выделяемых клеток. После выделения HER2-специфических ЦТЛ стимулируют их пролиферацию путем культивирования в присутствии внесенных одновременно цитокинов рчИЛ-2, рчИЛ-7 и рчИЛ-15 c конечной концентрацией каждого из них 50 нг/мл в течение 14-20 суток. Изобретение обеспечивает индукцию эффективного антигенспецифического противоопухолевого цитотоксического иммунного ответа против опухолевых клеток с гиперэкспрессией антигена HER2, характеризующегося увеличением процента гибели HER2-экспрессирующих опухолевых клеток. 1 з.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению иммуногенных полипептидов против рака молочной железы, и может быть использовано в медицине. Методами генной инженерии получают полипептиды с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:105 и 106. Изобретение позволяет стимулировать противоопухолевый иммунный ответ у больных раком молочной железы. 2 н.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к биотехнологии, белковой инженерии и медицине. Описан способ получения антиген-специфических цитотоксических клеток, обладающих противоопухолевой активностью против клеток рака молочной железы. Настоящее изобретение обеспечивает генерацию in vitro антиген-специфических клонов T-клеток с активностью CD8+ T-клеток и T-хелперов 1 типа, необходимую для формирования эффективного противоопухолевого ответа против клеток рака молочной железы. Изобретение может быть использовано в медицине. 1 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для индукции противоопухолевого иммунного ответа in vitro. Способ включает получение прилипающей и неприлипающей фракций мононуклеарных клеток (МНК), выделенных из периферической крови больного, совместное культивирование выделенных из периферической крови больного аутологичных МНК неприлипающей фракции со зрелыми дендритными клетками (ДК), полученными из прилипающей фракции МНК, трансфицированными РНК опухолевых клеток. После чего ДК подвергают стимулированному созреванию. Совместное культивирование неприлипающей фракции МНК и трансфицированных РНК аутологичных опухолевых клеток ДК проводят в течение пяти суток. При этом для получения зрелых ДК после трех суток культивирования прилипающей фракции МНК трансфицируют незрелые ДК опухолевой РНК, а через сутки после трансфицирования незрелые ДК подвергают еще в течение суток стимулированному созреванию путем добавления в культуру незрелых ДК фактора некроза опухоли-α (ФНО-α) и интерлейкина-1β (ИЛ-1β) при следующем соотношении компонентов: ФНО-α : ИЛ-1β=2,5:1. Изобретение позволяет эффективно индуцировать противоопухолевый цитотоксический иммунный ответ против клеток немелкоклеточного рака легкого in vitro с помощью дендритных клеток, трансфицированных РНК опухолевых клеток. 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к иммунологии, и может быть использовано для генерации цитотоксических клеток с активностью против клеток немелкоклеточного рака легкого. Способ заключается в совместном культивировании в присутствии рекомбинантного человеческого интерлейкина-12 и рекомбинантного человеческого интерлейкина-18, неприлипающей фракции мононуклеарных клеток (МНК), выделенных из периферической крови больного немелкоклеточным раком легкого с дендритными клетками, полученными из моноцитов прилипающей фракции МНК. Для получения зрелых ДК после трех суток культивирования прилипающей фракции МНК полученные незрелые ДК сначала сутки сокультивируют с опухолевым лизатом клеток немелкоклеточного рака легкого с последующим добавлением ФНО-α. Причем в течение суток после нагружения лизатом одновременно с добавлением провоспалительного цитокина ФНО-α вносят цитокин ИЛ-1β и проводят созревание нагруженных лизатом ДК в присутствии обоих цитокинов. Изобретение позволяет повысить эффективность генерации цитотоксических клеток с активностью против клеток немелкоклеточного рака легкого. 1 табл.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способам генерации антиген-специфических клеток с цитотоксической активностью против клеток рака молочной железы, и может быть использовано в медицине. Способ включает выделение мононуклеарных клеток (МНК) из периферической крови пациента, разделение клеток на прилипающую и неприлипающую фракции, добавление к прилипающей фракции МНК ростовых факторов, нагрузку дендритных клеток антигенами опухолевого лизата in vitro, стимуляцию созревания дендритных клеток в течение последующих суток. При этом к полученным незрелым ДК добавляют лизат аутологичных опухолевых клеток в дозе 100 мкг/мл, а еще через 48 часов в течение последующих 24 часов вносят рчФНО-альфа в дозе 25 нг/мл. Затем проводят совместное культивирование зрелых активированных лизатом дендритных клеток и неприлипающей фракции МНК в соотношении 1:10 в присутствии рекомбинантного человеческого интерлейкина-12 в дозе 10 нг/мл и рекомбинантного человеческого интерлейкина-18 в дозе 100 нг/мл. Изобретение позволяет повысить уровень цитотоксической и интерферон-продуцирующей активности антиген-активированных дендритных клеток при сокращении сроков их культивирования. 4 табл.

Изобретение относится к иммунологии, медицине и биотехнологии. Предложен способ стимуляции специфического противоопухолевого иммунного ответа против клеток рака молочной железы с помощью дендритных клеток, трансфецированных полиэпитопной ДНК-конструкцией. Полученные из периферической крови условно-здоровых доноров, трансфецированные полиэпитопной конструкцией, культивируются с неприлипшей фракцией мононуклеарных клеток. Способ позволяет повысить эффективность и экономичность получения цитотоксических лимфоцитов. 1 ил.
Изобретение относится к медицине и касается способа выделения фракций аутоантител класса IgG к иммунорегуляторному цитокину TNF из сыворотки крови человека с использованием комплекса процедур аффинной хроматографии и процедуры магнитной сепарации, проводимой с использованием магнитных частиц, покрытых стрептавидином, и поликлональных антител к TNF, меченых биотином. Изобретение обеспечивает получение чистых фракций аутоантител к TNF класса IgG. 1 табл.
Изобретение относится к иммунологии и биотехнологии, а именно к способам генерации антиген-специфических клеток с цитостатической активностью против клеток колоректального рака

 


Наверх