Способ получения сорбента
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СОРБЕНТА, вктоочанмций обработку кремнезема В,1-гистидином, о т л и ю ц и йр я тем, что, с .целью упрощения рпособа и повышения сорбционной ёмкости, обработку D,L-гистидином провидят в присутствии формальдегида при рН 2-5. СЛ С
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУВЛИН
3(5П С 01 В 33/12 ф »
onHGAHHE ИЗОБРЕтеНия
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОЬРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3395305/23-26 (22) 10.02.82 (46) 23.07.83. Бюл. 9 27 (72) A.Â. Брыкалов, В.И. Ковальков, В.П-, Тельбух, С.И. Кольцов, И.Д. Ба- ранник и И.Ф. Голубев (71) Ставропольский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток (53) 661 ° 183(088.8) (56) 1. Васильев Л.E. и Шишканова Л.С. Лигандообменная хроматография гемина и его производных. "Органическая химия", 1978, т. 14, 9. 4, с. 848-857.
2. Авторское свидетельство СССР
Р 857169, кл. С 08 К 9/04, 1981.
0% <31)
SU А (54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СОРБЕНТА, вклнтчающий обработку кремнезема
О, L-гистидином, о т л и ч а ю щ и йр я тем, что, с целью упрощения способа и повышения сорбционной емкости, обработку О,L-гистидином проводят в присутствии формальдегида прй рН 2-5.
1030312
45 Приме р 4. В колбу на
300 мл помещают 10 r высокодисперсного кремнезема-аэросила и приливают 150 мл ацетатного буфера с рН 5,0. Смесь при постоянном пере5Q мешиванин выдерживают при комнатной температуре в течение 15 мии.
Затем к ней добавляют 1,0 мл
40%-ного формальдегида и 30 мл ацетатного буфера, содержащего
55 0,1 г D,L-гистидина. Далее получен-. ную смесь перемешивают 1 ч до образования однородной массы, которую выливают в кюветы для застудневания в упругий гель н высушнвання.
В таблице представлены сравнительные данные по применению сорбентов для очистки плацентарной амаФреФМа хэви от гемопигментов.
Изобретение относится к получению сорбентов для очистки биологических жидкостей от гемопигментов и может быть использовано в медицинской и микробиологической промышленности для приготовления биопрепаратов.
Известен способ получения сорбента, включающий обработку декстранового геля бромцианом с последующей обработкой полученного продукта О,L-гистидином 1).
Однако. сорбент, получаемый согласно этому способу, имеет низкую механическую прочность. Кроме того, сорбент подвержен микробиологической атаке, мало устойчив к воздействию органических растворителей, что ограничивает его применеиие как в лабораторных, так и в промышленныи условиях.
Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ получения аорбента, включающий обработку кремнезема глютаровым альдегидом и ароматическим диамином прн рН 1-2 с последующим диаэотированием и аэосочетаиием с О,L-гистидином (2 ).
Недостатками известного способа являются сложность, многостадийность, а также малая сорбционная емкость получаемого сорбента. .Цель изобретения — упрощение способа и повьиаение сорбционной емкости.
Поставленная цель достигается предлагаемым способом, включающим обработку кремнезема О, -гистидинсм. в присутствии формальдегида при рН 2-5.
9 соответствии с предлагаемым способом сорбент получают в одну стадию обработкой кремнезема О,Lгистидином в присутствии формальдегида. При этом идет реакция поликонденсации между формальдегидом и
О,L-гистидином и на поверхности кремнезема .возникает полимерное покрытие, состоящее из остатков формальдегида и аминокислоты—
О,L-гистидина, являющегося селективным лигандом по отношению к гемопиг ментам. Процесс поликонденсации лимитирован кислой средой, где формальдегид присутствует в виде протонироваиной формы.
Получаемый сорбент имеет на единицу поверхности большее число молекул О,L-гистидина по сравнению с сорбентом, получаемым по известному способу, что обеспечивает новьэаение сорбционной емкости по гемопигментам и снижение неспецифической сорбции очищаемых белков.
П р н м е р 1. В колбу на
300 мл помещают 10 r высокоднсперсного кремнезема-аэросила и приливают 150 мл ацетатного буфера с рН 4,0. Смесь прн постоянном перемешиванни выдерживают при комнатной температуре в течение 15 мин.
Затем к ней добавляют 0,5 мл
40%-ного Фольмальдегнда и 30 мл .ацетатного буфера, содержащего
10 0,2 r D,L-гистиднна. Затем полученную смесь перемешивают 1 ч, надосадочную жидкость сливают, .а модифицированный носитель дважды по 300 мл промывают дистиллированной вОдой.
Количество связанного D,L-гистидина с аэросилом 17 мг на 1 г носителя.
Пример 2. В колбу на
300 мл помещают 10 r пористого кремнезема-аэросилогеля и приливают 150 мл ацетатного буфера с рН 3,0. Смесь выдерживают, перемешивая в течение 15 мин. Далее к ней добавляют 0,5 мл 40%-ного формальдегида и 30 мл ацетатного буфера, содержащего 0,5 r D,L-гистидина. Далее получение носителя осуществляют так же, как в примере
1. Количество связанного Ю,L-гистидина с аэроснлогелем 20 мг на
1 r носителя.
Пример 3. В колбу на
300 мл помещают 10 r пористого кремнезема-силикагеля и приливают
35 150 мл ацета1ного буФера с рН 2,0.
Смесь выцерживают, перемешивая
s течение 15 мин. Далее к ней до.бавляют 0,5 мл 40%-ного формальдегида и 30 мл ацетатного буфера, содержащего 0,50 r О,L-гистидина.
40 далее получение носителя осуществля ют так же, как s примере 1. Количество связанного О,L-гнстидина с силикагелем 16 мг на 1 r носителя.
1030312
Способы получения
Выход очищенного белка, Ъ
Сорбцнонная емкость по гемо-, пигментам, мг/г сорбента
Величина неспецифической сорбции, В
70 за
Известный
Предлагаемый
100
38
10
33
Из таблицы видно, что предлагаемый способ обеспечивает получение сорбента, именкцего более высокую сорбцнонную емкость по сравнению с сорбентом, получаемым согласно изСоставитель В. Иазаров
Редактор Г. Безвершенко Техред.Л.Пекарь:
Корректор Н. Бобкова
Заказ 5096/24 Тираж 471
ВНИИПИ ГосударствениоГо комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Рауыская иаб., д. 4/5
Подписное
Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 по примерам
1 и 4 по примеру 2 по примеру 3 г вестному способу. Кроме того, сор-. бент, получаеиий согласно предлагаемому способу, обладает меньшей неспецифической сорбцией,что позволя25 ет увеличить выход очищаемого белка.
