Способ определения фунгицида каптана

 

СПОСОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНГИЦИДА КАПТАНА в биообъектах, включающий воздействие образцов материала, содержащего каптан, на тест-организмы , с последующим анализом, отличающийся тем, что, с целью упрощения определения, исследуемый материал помещают на поверхность твердой питательной среды, засеяннбй двухсуточной культурой Saccharomyces .cerevisiae, инкубируют в термостате при 25-27С в течение 20-28 ч, а . анализ проводят по зонам угнетения ростя дрожжей вокруг образцов.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

09) (11) 15Р 4 С 12 И 1/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ll0 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ (21) 3447951/30-15 (22) 22.02.82 (46) 30.12.85. Бюл. У 48 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии (72) Ю.В.Круглов и В.П.Кириенко (53) 632.937 (088.8) (56) 1. Оспенсон Д.Н. и др. Каптан. — В кн. "Методы анализа пестицидов", M. Химия, 1967, с. 508-520.

2. Mason С.Р., Gleason F.Ê., Determination of blue-green algae

toxins, I. Phycol., 1979, v. 15, р. 20 (прототип.). (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНГИЦИДА КАПТАНА в биообьектах, включаю щий воздействие образцов материала, содержащего каптан, на тест-организмы, с последующим анализом, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью упрощения определения, исследуемый материал помещают на поверхность твердой питательной среды, засеянной. двухсуточной культурой Saccharomyces

cerevisiae, инкубируют в термостате при 25-27 С в течение 20-28 ч, а анализ проводят по зонам угнетения роста дрожжей вокруг образцов.

1075784

Изобретение относится к области сельскохозяйственной микробиологии и защиты растений, н частности к способам определения пестицидов.

Фупгицид каптан (N-(трихлорл!етилтио) — циклогексен-rt-дикарбоксимнд) является одним из препаратов, часто

1!спольэуемых для борьбы с фитоплтогеннь!ми микроорганизмами путем обра— ,ботки 1гм семян и Опрыскивания вегеI т»рующих растений.

Определение остаточных количеств капTà»Q. I« paçëè÷íûõ объекчах Окружаю— щей среды и в частях pacTelt,"гй имеет бо)!ь!)!Ое значенпе,п;1я выяане1 Ья ряда вопросoIJ его применения, Сущсстгуюг разл1!чные с»особы определения каптапл, злко!!о 1!»ощ3!еся в подготовке образцов: предварительной экстракции клптанл Оргаш1чески — 20 ми растворителям: и последу!ощем определен»и капгalta методам:I колор»метр»и (1 j, Способ вк:»очлет, клк уже было ука2г злно, !)редзлрите.!!ьную экстракци!о

2 > каптлна органическим растворителем, чтo обусловливает нысокую стоимость анл:»1зл. Кроке того, для рлботы требуется,дорогостоящая апплрлтурл, «вeczeH тлк;3 crtocoCJ определсlief» б!!алогически акт»нных веществ с помощью тест-организмов (21. J>Jtst этого устанл!«лина!от зависимость yrIteTe1lifя разгития одноклето !»ых организмов от концентрации токс»ческого вещества. Недоста гком этого способа Ical-.;feòcÿ не!3озможность ис IOJII>çoваги!я его для определен»я фуliI гн!ида каптапа.

LIeJI»1o ifaîápeòeï»a является yiipoщения ОпредеJIeliii)f содержа!Шя фун1»Ц1!Да °

3 !о достгп летcJI тем, что»сследуемый материал помещают ffa no-Jepx ность твердой п»тлтели!ой срецы, засея)гной двухсуточной культурой

SaccEIar0myces cerevi s ьае > Ifttf Yftfp)> ют в термостате при 25-27 С в течеьн!е 20-28 ч, а лнал»э проводif 1 ffn зонам угнетен»1я роста дрожжей вокруг образцов.

Подготовка культуры Бассплг-о!вусен

cerevisiae. Saccharomyces cerevisiae выращивают в пробирках на скошенном сусло--arape в термостате при 25г>

27 С в течение 2 суток и далее хранят при комнатной температуре. IIepeз каждые 20-30 дней производят

50 пересевы культуры. В предлагаемом способе используют 2-х суточную куль гуру

Подготовка 1«итательпой среды.

В работе»спользуюг ьинеральную среду Р»33ерл след-",ощего состава, 7: сахароза 2,0, (EEEE,) SO), О, 3 >

IE8S0), 7ЕЕ О 0,07, NaCL, 0,05, Сл(ЕО )

0",О )",КН,РО„ 0,1; К,1!РО„ О,0;, „. -.„ -женой:экстракт 0,01; лглр — лглр 0,8.

Среду стер»лиэуют в автокплве 20 мин прн. давлении 1 лти.

Подготовка матер»ллл к анализу.

Семена растений, протрлвлсннь!е фунг!!ц»7),o>f> отбиэлют f3 средней пробы и без с терилиз а ц!гп переносят в

>1 л!1!к1! IIe- Гр1! н!! нове!) хн Ость ср одь)

Ридерл, засеянной культурой Васс1«а1.0;пусен elevis3.ле, Из листьев выреза)от д1!ски дпл«!стром 10 — 20 1з1, котop;fe немедленно накллдывл1о нл

IIo l! -" рх »Ос l I> среды Ридеf) л > cJIe I кл

>lр1!ж11!1л>! »х к агарv °

IIo c òð0 å»»е с тлндлр 1!01! кр)п«ой, Зерна л!!!ецн!>!я прсггрл1«л)!ил!от

1>. Л П Т Оl Н О 13 C)) O P f ЬЕ I I O P 0 1))К !! С Г Л К 1! М расчетotf, чтобы на каждое эе.,но

»р»ход!!лось 0,5; 1Ä0,2,0; 4,0 8Ä0;

1!3>0 мкг «a!Iтлнл, н расклады «лют

13 чашки Петри Iia поверхность лглр»ээ))линой среды Рндерл, элсея!гной культурой БлcñE«al. о!яуссs сеl. е Jis1ae

О

Чашки вь)дсрж»влнот III » 27 С 13 течен»с 2 ч. Затetf строят г1)л!1)ик > . где нл ос)! орд»нлт Откллдывл)от ко)lичсст130 канта!!л > »я oclf яос— ! г»СС вЂ” !«Сг»1 »!НУ C TOP!13!>>1!011 a Oiisl 13 ММ. !

Лlla»ortf÷lto стРОЯт стлlcJJaP TI!У1о кр»вук) дчя о»реде !сн1!я клптлнл 13 листьях и друг»х вегетат»в)озх частях рлстеl»ill. В этом случле тежс 130э рлстafJtftite кон)!снтрации клптлна;!л)!оси т ft>! l1»с к» о)»3)ь Т1)01«л)>ьfc01f бу)!Сг диаметром 10 t !it.

ХОД Л»Л. !».3;1, Двухсуточ)!ую культуру Васс1«агошус e s cerevi в«.ле в пробирка . »л скошенном суc lo лглре смыва)от стер»льной водой ll ра.31)одвт I3 100 ttJI 1 мл суспенз! .н дро)!01!ей> вносят в 250 мл

13ЯС»31;1влеlli:01! Ii Ох)lлжден ной дО 40

50 С лглризof«aft!toff среды Рндера.

Среду тщатсли о перемешивают и разл»в;нот по 10 мл в чашки Петри. После застывания на поверхность среды раскладывают исследуем)1й материал . о

Пашки»нкубнруют при 25-27 С в течение 20-28 ч. После этого измеря оТ

734 мкг/см> пистолей поаерхиости

Время после каптаяа кианий ярус молодые листья, отросвие после обработки растеиий каптаиом

1 ч

1,3+О,!

2>4+0,2

1 сут.

7 сут

14 сут.

21 сут. 28 сут.

35 сут.

42 сут.

49 сут.

56 сут.

63 сут.

70 сут..

1,3+0,2 2,4+0,2

1>0>0>1 2,020>1

0,7+О, 1

1,5+0,1

07+0 1 1,5+0 l

0,6>0,1 1 ° 3+0,3

0,6 (еле ды) 0,6

1,4+0>2

1 > 4+ О, 2

° >

0,5

1,3+О, 1

1,3+О 1 ! 2+0,i

1,220,! я

0,5

I °

О>5 и

0,5

ВНИИПИ Заказ 8138/4 Тираж 524 Подписное

Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная,. 4 з 1075 диаметр стерильных .зон вокруг иссле- :

I дуемого материала. Затем определяют количество каптана с помощью стандартной кривой.

Пример 1. Семена пшеницы непосредственно после обработки каптан!7м, а также спустя различные сроки после обработки раскладывают на поверхность агаризованной среды Ридера, засеянной Saccharomyces cerevi- !О

siae. Через 24 ч инкубации в каждой чашке определяют величину стерильной эоны вокруг семян и определяют количество каптана по стандартной кривой. Результаты показывают, что, как об этом свидетельствуют и другие методы, каптан сохраняется на семенах более 17 месяцев, однако количество его уменьшается приблизительно в 6 раз, что также хорошо 2ц согласуется с даннымп других исследователей, полученными с использова нием известных способов °

Пример 2. Диски, вырезанные из листьев картофеля, обработанного 25 каптаном, непосредственно после обработки, а также спустя различные сроки после обработки, раскладывают так же, как и в примере 1. Через о

24 ч инкубацин при 27 С определяюТ величину стерильной -зоны вокруг дисков и определяют количество каптана с помощью стапдартной кривой.

Результаты показывают, что каптан удерживается на листьях практически в течение всего вегетационного периода, причем на листьях нижних ярусов его стабильность вдвое выше, чем на верхних, что согласуется с данны ми других исследователей, полученными с использованием известных способов. В молодых, вновь отрастающих листьях каптан не обнаруживается

Чувствительность метода составляет 1-2 мкг в пробе. Стандартная ошибка измерений не выше 10Х.

Пример 3. Определение каптана на листьях картофеля.

В вегетационных опытах растения картофеля опрыскивают водной суспензией препарата каптана из расчета 1,5 кг/га. Спустя определенное время после обработки из листовой пластинки картофеля верхнего и нижнего ярусов пробочником вырезают диски диаметром 10 мм. Диски раскладывают на поверхность агариэованной питательной среды, засеянной S.cerevisiae. Через 20-24 ч измеряют величину стерильной зоны вокруг дисков. 1(онцентраци!О каптана рассчитывают по стандартной кривой.

Результаты измерений и расчеты содержан!1я каптана на листьях представлены в таблице.

Из данных таблицы видно, что способ позволяет определять ничтожно малые количества каптата в образцах.