Способ дифференциальной диагностики туберкулеза

 

СПОСОБ Д1«4«РЕНЦИАЛЬНОЙ даь АГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА и неспецифических заболеван|Ш лёгких путем постановки реакции восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-теста), о т личающийся тем, что, с целью повьшения точности способа, дополнительно ставят реакцию НСТтеста в присутствии БЦЖ и по повышению количества НСТ-положительнык нейтрофилов в 2 раза и более диагностируют туберкулез.

C0JO3 СОВЕТСНИХ И ЛЮ Н

РЕСПУБЛИН (19) О 1) ..;(я)4 А 61 К 39 ОО

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

110 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTHA

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABT0PCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3309185/28-13 (22) 23. 06. 81 (46) 23.07.85. Бюл. Ф 27 (72) Г.И. Рыковская и М.Г. Шубич (71) Кубанский государственньй медицинский институт им. Красной

Армии (53) 615.375(088.8) (56) Медицинский реферативный журнал, 19781 В 12, с. 27. (54) (57) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИ

АГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА и неспецифических заболеваний легких путем постановки реакции восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-теста), о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повьапения: точности способа,. дополнительно ставят реакцию НСТтеста в присутствии БЦ}к и по повыпению количества НСТ-положительнык нейтрофнлов в 2 раза и более диагностируют туберкулез.

1168257

Составитель B. Дроздов

Редактор О. Юрковецкая Техред Т.Фанта

Корректор B. Синицкая, Заказ 4536/8 Тираж 722

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Иос.ква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Филиал ППП "Пзтент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4

Изобретение относится к медицине, в частност1.: иммунологической диагностике туберкулеза.

Целью изобретения является повышение точности способа. 5

Способ осуществляют следующим образом, В две силиконированные пробирки, содержащие по 0,1 мл гепарина (20 ед/мл), добавляют 0,1 мл крови.

В контрольную пробирку (спонтанная реакция) вносят 0,1 мл физиологического раствора, в опытную (стимулированная реакция) 0,1 мл предварительно разведенной физиологическим раст- 15 вором (1000 мкг/мл) вакцины БЦЖ.

Обе пробирки выдерживают 3 мин при комнатной температуре, затем в каждую из них добавляют О, 1 мл 0,075Хного раствора нитросинего тетразо- 20 лия, В течение 10 мин обе пробирки инкубируют на водяной бане при

37 С. По истечении времени инкубации постфиксируют инкубированную смесь в течение 3 мин, добавляя в 25 нее 0,2 мл 50Х-ного раствора формалина, разведенного в 0,9Х-ном растворе хлористого натрия, После этого добавляют 3,0 мл дистиллированной воды на 20 с, чтобы лизировать эри- 3п троциты. Для восстановления изотония в обе пробирки вносят по 1 0 мл

3,4Х-ного раствора хлористого натрия.

После отстаивания при комнатной температуре в течение 10 мин центрифугируют 5 мин при 750 об/мин. После удаления недостаточной жидкости пастеровской пипеткой из осадка готовят мазки и высушивают их. Затем мазки фиксируют 30 с в спирт-формалине (9:1). Ядра докрашивают в 0,1X»íîì растворе нейтрального красного, приготовленного на 0,5Х-ном растворе хлористого натрия. Результаты оценивают путем изучения мазков под иммерсионной системой микроскопа.

Подсчитывают 150-200 нейтрофилов и вычисляют процент НСТ-положитель-. ных клеток. К НСТ-положительным относят нейтрофилы с ясно определяемым отложением формаэана в виде гранул и глыбок темно-синего цвета.

Реакцию считают положительной при повышении процента реагирующих клеток в опытной группе в 1,5-2 раза и более по сравнению с контрольной. У больных туберкулезом в условиях стимуляции вакциной БЦЖ показатели НСТ-теста повышаются и достоверно отличаются от показателей спонтанного теста. У здоровых и у больных с заболеваниями легких нетуберкулеэ ной этиологии ответная реакция нейтрофилов на стимуляцию вакциной БЦЖ отсутствует, и показатели стимулированного НСТ-теста не отличаются от показателей спонтанного.