Способ определения аллергии немедленного типа

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЛЛЕРГИИ НЕМЕДЛЕННОГО ТИПА, включающий обработку клеточной культуры аллергеном и исследуемой сьгасроткой крови больных с последующей инкубацией реакционной смеси и учетом результатов реакции, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, в качестве клеточной культуры используют тимоциты, а учет результатов реакции осуществляют с помощью флуоресцентного зонда при длинах волн 515-530 им после добавления и инкубационной смеси 4-(п-диметиламиностирил)-1-метилпиридиния и при увеличении интенсивности флуоресценции определяют аллергию немедленного типа. (Л с:

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИ4ЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

4(51) А 61 К 39/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

10 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3549887/28-13 (22) 08..02. 83 (46) 07. 07. 85. Бюл. 9 25 (72) Г.E.. Добрецов, B.Â. Косников, В.А. Фрадкин, Н.К. Алпатова и Ю.А. Владимиров (71) 2-й Московский ордена Ленина государственный медицинский институт им. Н.И. Пирогова (53) 615.373(088.8) (56) Шляхов Э. Н. Иммунология, иммунодиа ностика, иммунопрофилактика инфекционных болезней. Кишинев, 1977,,с.220. (54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЛЛЕРГИИ

НЕМЕДЛЕННОГО ТИПА, включающий обра„„SU„„1165407 A ботку клеточной культуры аллергеном и исследуемой сывороткой крови больных с последующей инкубацией реакционной смеси и учетом результатов реакции, отличающийся тем, что, с целью повьппения точности способа, в качестве клеточной культуры используют тимоциты, а учет результатов реакции осуществляют с помощью флуоресцентного зонда при длинах волн 515-530 нм после добавления и инкубационной смеси 4 (п-диметиламиностирил)-1-метилпиридиния и при увеличении интенсивности флуоресценции определяют аллергию немедленного типа.

1165407 разом.

Составитель В. Дроздов

Техред З.Палий

Редактор Н. ГУнько

Корректор С. Шекмар

Заказ 4259/9

Тираж 722

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное филиал ППП нПатентн, г. Ужгород, ул. Проектная, Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим об- 5

Берут 5 проб по 1 мл суспензии

7 тимоцитов (6 0 клеток/мл), добавляют к ним по 0,3 мл сыворотки крови больного и по 0,3 мл раствора каждогс из йсследуемььх аллергенов. В ка— честве контрольных проб берут суспензии тимоцитов без добавок с добавлением только аллергена и сыворотки. 15

Опытные и контрольные пробы инкуо бируют в течение 15 мин при 37 С, затем клетки дважды отмывают в растворе Хэнкса центрифугированием при о

200 д в течение 10 мин при 4 С. До- 20 водят концентрацию клеток до Z — 3 .10 к;н ток/мл, добавляют водный раствор ф.Ióîðåñöåíòíoãс зонда iICH до конечной концентрации зонда 15 мкм. После

18 мин инкубации измеряют интенсивность Л уоресценции ДСМ в 30 тимоцитах на микрофлуориметре Люмам И-2 при длине волны возбуждающего света

405 нм и длине волны флуоресценции

515 нм. За единицу флуоресценции принимают среднее значение интенсивности флуоресценции интактньгх тимоцитов. Для каждой пробы вычисляют среднюю интенсивность флуоресценции .й (F) и значение дискриминатной функции (D) по трем параметрам (Х,, Х ), при этом, если D (< <, Х, . ) >О, то аллерген неспецифический, если с О аллерген специфический. (Х = F/F,, :г и

Х = C Х =- Е/Г где Р и 6 — среднее

2 значение интенсивности флуоресценции и ее дисперсия) .