Способ определения иммуноглобулин-антител в биологических объектах

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИН-АНТИТЕЛ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТАХ, включающий совместную инкубацию исследуемого объекта с антителом, отличащийся тем, что, с целью повышения точности и упрощения способа, одновременно осуществляют инкубацию отдельно исследуемого материала п антигена, далее высчитывают для каждого класса иммуноглобулинов их содержание и определяют количество иммуноглобулинантител по разнице между суммарным количеством иммуноглобулинов, содержащихся в каждой пробирке с исследуемым материалом и антигеном, и количеством иммуноглобулинов, содержащихся при совместном инкубировании исследуемого материала и антигена.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (so 4 А 61 К 39 00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Ф С

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3473046/28-14 (22) 21.07.82 (46) 07.12.85. Бюл. № 45 (71) Киевский ордена Трудового Красного

Знамени медицинский институт им. акад. А. А. Богомольца. (72) А. И. Грицюк, В. Н. Федорович, А. В. Гаевская и И. Д. Бульда (53) 615.373 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР № 587998, кл. А 61 К 39/00. 1976. (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

ИММУНОГЛОБУЛИН-АНТИТЕЛ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТАХ, включающий

„„SU„„1196005 A совместную инкубацию исследуемого объекта с антителом, отличащийся тем, что, с целью повышения точности и упрощеиия способа, одновременно осуществляют инкубацию отдельно исследуемого материала и анти гена, далее высчитывают для каждого класса иммуноглобулинов их содержание и определяют количество иммуноглобулинантител по разнице между суммарным количеством иммуноглобулинов, содержащихся в каждой пробирке с исследуемым материалом и антигеном, и количеством иммуноглобулинов, содержащихся при совместном инкубировании исследуемого материала и антигена.

1196005

Ко HTð O. l b

Значения

= — (К1+ К2) ,Для JgN—

30 — — 30 мг%= 3 gCi

=260 м г% =

"JgA

=50мг% =

Составитель М. Позняк

Техред И. Верес Корректор М. Максимишинец

Тираж 721 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Редактор О. Бугир

Заказ 7444/4

Изобретение относится к биологии и медицине, в частности иммунологии.

Целью изобретения является повышение точ1юсти и упрощение способа.

Способ oc> ff>åñòâëяют следуюшим образом.

Создак>т три пробы. Первая проба содержит три части биологического объекта и одну часть антигена (опыт). Вторая проба содержит три части биологического обьекта и одну часть изотонического раствора хлорида натрия (контроль 1). Третья проба содержит одну часть антигена и три части пзотонического раствора хлорида натрия (контроль 2).

Пробы инкубируют при 37 С в течение одного часа. Затем центрифугируют при

2000 об>/мин 20 мин. В надосадках определяк> иммх ноглоб>хлины Л, (>, M и др.

C вязывание иммуноглоб>улинов-антител с антигсном оиределяк>т по разнице между

oуммарным количеством иммуноглобулинов

3 биологическом объекте и антигене, инкуоированных раздельно, и количеством иммуш>г,1обулинов оиологпческого ооъекта и антигеli;i, инкубированных вместе, причем указанное определение проводят для каждого класса и мммноглобхли1юв.

///>и.ие/>. B две пробирки (опытную и контроль 1), наливают по О,!5 мл биологического об ьекга, например сыворотки крови здоровых людей или больных, например, инфарктом миокарда, ревматизмом и др., а в третьи> пробирку (контроль 2), такое же количество изотонического раствора х loрида натрия. Лнтиген в обьеме 0,05 мл добавляют в опытную пробирку и контроль 2, а в контроль 1 — такое же количество изотонического раствора хлорида натрия. Разведения антигена подбирают таким образом, чтобы в нем проявились лишь начальные антикомплементарные свойства, если они имеются.

Содержимое пробирок смешивают, инкубируют в течение одного часа при 37 С, центрифугируют при 2000 об/мин 20 мин.

10 После осаждения центрифугированием обра зова вш и хся комплексов анти ген — а нтитело определяют связавшиеся с антигеном иммуноглобулин-антитела по разнице между суммарным количеством иммуноглобулинов в биологическом об.ьекте (сыворотке) и антигене, инкубированных раздельно, и количеством и ммуноглобул ннов биологического объекта (сыворотки) и антигена, инкубированных вместе, причем указанное определение проводят для каждого класса

20 иммуноглобулинов.

Пример расчета в мг.%. 3фМ 3gG 1дЛ

Опыт (ОП) !00 1000 170

Контроль 1 (К! ) 120 1200 200

2 (К2 10 60 20

) иммуноглобулин-антител — ОП. антитела = (120+10) — 100

5! 0 мкмоль/л. антитела= — (1200+ 60) — 1000=

4420 мкмоль/л. айтитела= (200+20) — 170=

850 мкмоль/л.