Способ выявления антигена

 

.1. СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИГЕНА путем смешивания исследуемой пробы и эритроцитарногр диагноститсума с последующим учетом реакции агглютинации, отличающийс я тем, что, с целью повышения чувствительности способа, в исследуемую пробу одновременно Ш1И последовательно вносят 0,4-0,6% взвеси антительного эритроцитарного диагностикума и 0,01-0,05% взвеси специфического антигенного эритроцитарного диагностикума, далее через 5-15 мин добавляют иммунную сыворотку той же специфичности, содержащей 4-10 минимальных агглютинирующих доз. 2. Способ поп.1,отличающ и и с я тем, что исследуемую пробу, взвесь антительного эритрос S цитарного диагностикума, взвесь специфического диагностикума, илмун (Л ную сыворотку смешивают в объемном соотношении 2:1:1:1.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)4 А 61 К 39/О

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

H ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3757873/28-14 (22) 26.04 ° 84 (46) 15.09.85. Бюл. Р 34 (72) Ю.А.Кузьмин и Б.В,Каральник (71) Научно-исследовательский институт эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней (53) 615.373 (088.8) (56) Капо К., Kaweski S. "Inixed

agglutination for the detection

of cell-surface antigens", Transpland Proc, 1980, ч, 12, р. 54-58. (54)(57) .1. СПОСОБ ВЬИВЛЕНИЯ АНТИГЕНА путем смешивания исследуемой пробы и эритроцитарного диагностикума с последующим учетом реакции агглютинации, о т л и ч а ю щ и й" с я тем, что, с целью повышения

„„SU„„1178452 А чувствительности способа, в исследуемую пробу одновременно или последовательно вносят 0,4-0,6% взвеси антительного эритроцитарного диагностикума и 0,01-0,05% взвеси специфического антигенного эритроцитарного диагностикума, далее через 5-15 мин добавляют иммунную сыворотку той же специфичности, содержащей 4-10 минимальных агглютинирующих доз.

2. Способ по п.1, отличаюшийся тем, что исследуемую пробу, взвесь антительного эритроцитарного диагностикума, взвесь специфического диагностикума, иммунную сыворотку смешивают в объемном соотношении 2:1:1:1. 1178452

Минимальная выявляемая доза! ! Минимальная выявляемая доза

Реакция! Ыигелл Зонне,,. Шигелл Флекс- ЛПС+ Зонне, ! тыс/мл нер, тыс/мл ;мкг/мл

ЛПС Флекснер, мкг/мл

) 3000000,0 О, 3+0,02 . >1000,0

62,5+1, 1

РПГА

Реакция смешанной ar1500,011,7 )3000000,0 глютинации

23,4 1,0

0 07+0 001

)1000,0

) 3000000, О

Предлагаемая

+ липополисахарид, слабая агглютинация, Составитель П.Бонарцев

Техред Т.Фанта Корректор А.Зимокосов

Редактор N.Митейко

Заказ 5582/6 Тираж 722 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к медицине, преимущественно к иммунологии, и может быть использовано при выявлениц различных антигенов.

Целью изобретения является повышение чувствительности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Пример 1. Исследуемую на шигеллы Зонне пробу титруют в объеме

0,5 мл в 0,85 -ном растворе

ИаС1, содержащем нормальную кроличью сыворотку в разведении 1:200.

Во все разведения пробы добавляют по 0,025 мл 0,5/-ной взвеси анти" тельного эритроцитарного диагностикума Зонне (приготовленного с помощью амидола) и 0,025 мл 0,05 -ной взвеси антигенного эритроцитарного диагностикума Зонне в таком же растворителе. Через 10 мин во все лунки вносят по 0,025 мл иммунной сыворотки Зонне в разведении 1:200, что соответствует содержанию 5 минимальных агглютинирующих доэ.

Пример 2. Исследуемую пробу на липополисахарид Зонне титруют в объеме 0,5 мл 0,85 -ном растворе

NaCl„ содержащем нормальную кроличью сыворотку в разведении 1:200. Во все разведения пробы добавляют по

0,025 мл 0,5 -ной взвеси антительного

5 эритроцитарного диагностикума Зонне (приготовленного с помощью хлорида хрома) и 0,025 мл 0,025 -ной взвеси антигенного эритроцитарного диагности. кума Зонне в таком же растворителе:

Через 10 мин во все лунки вносят по

0,025 мл иммунной сыворотки Зонне в разведении 1:200, что соответствует содержанию 5 минимальных агглютинирую щих доз.

15 Характеристика чувствительности реакций, полученная при 10 повторностях, представлена в таблице.

Как видно из таблицы предлагаемый способ является специфичным, в тест20 системах Зонне антиген Флекснер не выявляется и обеспечивает достоверно более высокую, в сравнении с прототипом, чувствительность индикации антигена как в клеточном„ так

25 и в молекулярном виде. Особенно значительно увеличение чувствительности индикации частиц антигена небольшого размера.