Способ определения катехоламинов в крови

 

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТ ИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (19) (И) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТБУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3600082/28-14 (22} 03.06.83 (46) 07.04.86. Бюл. Ф 13 (72) А.И.Мардарь и Д.П.Кладиенко (53) 616-0.88.8 (088.8) (56) Talck В., Owman Ch., Adetailed

methodological description of the

fluorescence method. Acta uniy, Lund, 1965, 2, 21-23.

Euler U.S., Estimation of

Catecholamines Vn urine. Acta physiol, Scound, 1959, 27, 122. (51) 4 G 01 N 1/30, А 61 В 10/00 (54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАТЕХОЛАМИНОВ В КРОВИ путем приготовления г мазков, их фиксации с последующим окрашиванием и определением содержания катехоламинов по интенсивности окрашивания, о т л и ч а ю щ и й— с я тем, что, с целью повышения точности способа п определении катехоламинов преимущественно в эритроцитах, фиксацию проводят в 2Х-ном растворе бихромата калия при 36-38 С в темноте, а в качестве красителя используют 10-20Х-ный раствор азотнокислого серебра, при этом окрашивание проводят в течение 5-10 мин.

1 1223078

Изобретение относится к медицине,а точнее гистологии, и может быть использовано как в научных, так и в диагностических целях в кардиологии, эндокринологии. 5

Целью изобретения является повышение точности способа при определении катехоламинов преимущественно в эритроцитах за счет использования фиксатора бихромата калия и красите- 1О ля азотнокислого серебра.

Способ осуществляют следующим образом.

Утром, натощак производят забор капли крови из пальца, готовят мазок на чистом предметном стекле и сразу же фиксируют в 2Х-ном раство0 ре бихромата калия при 36-38 С, в темноте, в течение 2 ч. Затем препараты промывают водой, 5-10 мин ок- 2п рашивают 10-20Х-ным раствором азотнокислого серебра, промывают, подкрашивают 1 мин. 1Х-ным раствором эозина, промывают, обезвоживают спиртом, просветляют ксилолом, заключают, ис- 25 следуют под микроскопом в эритроцитах темные глыбки, которые представляют включения катехоламинов.

Интенсивность реакции на катехоламины оценивают путем подсчета количества эритроцитов с включениями катехоламинов и по содержанию этих включений.

Пример 1, У здорового человека 42 лет M., утром, натощак обыч ным способом получают каплю крови из пальца, производят мазок на чистом пердметном стекле и тут же фиксируют 2Х-ным раствором бихромата калия при 37 С. После 2 "часовой фиксации в термостате, в темноте, мазок промывают, окрашивают 10Х-ным азотнокислым серебром в течение

5 мин, снова промывают, подкрашивают 1 -ным водным раствором эозина, промывают, просушивают спиртом, заключают в канадский бальзам. Изучают препарат под микроскопом (Об.80, ок. 15), наблюдают: темные глыбки в

97Х эритроцитов, глыбки выглядят в виде мелкой и средней зернистости, единичных крупных палочек расположенных по всей цитоплазме эритроцитов.

Пример 2. Больной 3,, 36лет, жалуется на приступообразные головные боли, дрожание тела, повышение артериального давления, которое плохо снижается гипотензивными препаратами. Похудел, болеет 4 года.

У больного производят забор крови из пальца, готовят мазок, фиксируют в

2 .-ном растворе бихромата калия при

36 С 2 ч, фиксируют в темноте, промывают и окрашивают 20 -ным азотнокислым серебром 10 мин. Далее как в примере 1. При изучении мазка крови устанавливают наличие включений в эритроцитах в виде мелкой зернистости, палочек и стопок. Включения ,содержатся во всех эритроцитах.

На основании субъективных и объективных данных, анализа крови на катехоламины цитохимическим и флюорометрическим методами у больного диагностируют феохромоцитому — опухоль левого надпочечника, которую удаляют хирургическим путем.

Пример 3. Больная Э., 56 лет, жалуется на боли в области сердца, слабость, одышку, головные боли. Болеет 8 лет. У больной бурут кровь из пальца, готовят мазок и

ЗО обрабатывают как описано в примере 2, но при 38 С и концентрации азотнокислого серебра 15 . При микроскопии мазка крови больной установлено отсутствие включений катехоламинов в

15Х эритроцитов, в остальных 85Х эритроцитов включения выявлялись в виде мелкой и крупной зернистости, 10Х клеток от 85Х имеющих включения, заполнены мелкими глыбками и

40 выглядят темными клетками. Часть эритроцитов содержит венчик миелиноподобных, нитчатых структур. С помощью электрокардиограммы у больной диагностируют ишемическую болезнь

45 сердца, ишемию задней стенки левого желудочка ° Больной назначают терапию, включающую в-адреноблокатор-анаприлин. После 7-дневного лечения производят повторный анализ крови на катехоламины и устанавливают вос50 становление содержания катехоламинов во всех эритроцитах в большом количестве. тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Заказ 1703/44

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4