Способ идентификации стафилококков
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (19) (11) 2 А1 (50 4 C 12 1/00, А 61 К 39/085
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЭОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ
/.s
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3753593/28-14 (22) 14,06.84 (46) 23.09.86. Бюл. N 35 (71) Горьковский научно-исследовательский институт эпидемиологии и ,микробиологии (72) Т. В. Носова и Г, К. Дегтева (53) 576.8.093.1(088.8) (56) ВасЬ.eriol 1980, abt. А., 248, 9 3. 206-303. (54)(57) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ СТАФИ,ЛОКОККОВ путем определения видоспецифического антигена с помощью встречного иммуноэлектрофореза со специфической антистафилококковой сывороткой, отличающийся тем, что, с целью сокращения времени идентификации золотистых стафилококков, определение видоспецифического антигена осуществляют в 4-часовой культуральной жидкости,- а в качестве специфической антистафилококковой сыворотки используют сыворотку, приготовленную к штамму Б. ангеля, имеющему протеолитическую активность
80-90 ед/мин/мг.
Составитель П. Бонарцев
Редактор Н. Егорова ТехредИ.Ходанич Корректор Л. Пилипенко
Заказ 5087/25
Тираж 490 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
1 13035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4
1 12588
Изобретение относится к области .медицинской микробиологии, в частности к выделению и идентификации микроорганизмов, и может быть использовано для быстрой идентификации золо.тистых стафилококков из числа микроорганизмов, выделенных от больных и с объектов внешней среды, при решении клинических и эпидемиологических задач. 1О
Целью изобретения является сокра щение времени идентификации золотистых стафилококков в ходе микробиологического анализа.
Пример.. Материал от больных 15 и с объектов внешней среды, взятый для бактериологического анализа, засевают на среду первичного посева.
На следующий день отбирают колонии, типичные для стафилококков, изучают морфологию клеток в мазке. Колонии, образованные стафилококками, пересевают на мясо-пептонный бульон с 1Х глюкозы и выращивают в течение 4 ч после чего идентифицируют в ВИЭФ с диагностической сывороткой.
Для получения диагностической сыворотки иэ числа золотистых стафилококков отбирают штамм, обладающий 33 протеолитической-активностью не ниже
80-90 ед/мин/мг. Уровень протеолитической активности определяют по методу Kunitz в модификации Drapean.
Отобранный для иммунизации штамм, 35 выращенный на твердой питательной
28 2 среде, смывают физиологическим раст= вором, устанавливают содержание микробных тел 5 млрд. в 1 мл. Взвесь разливают в стерильные флаконы и выдерживают двое суток в парах 40Х-ного формалина. Полученную вакцину проверяют на стерильность и хранят в холодильнике до использования (1,5-2 мес.)
Стерильную вакцину вводят кроликам в краевую вену уха нарастающими дозами (0,8; 1,0; 1,2; 1,5; 2,0 мп) в три еженедельных цикла по три инъекции в каждом. Через 7 дней после последней инъекции забирают кровь и приготавливают сыворотку известным способом. Сыворотку хранят в холодильнике (2,5 г). Перед использованием устанавливают рабочий титр при исследовании в ВИЭФ с бульонной культурой штамма, взятого при иммунизации, содержащей 1 млрд. микробных клеток в 1 мл..
Постановку ВИЭФ осуществляют общепринятым методом с использованием IXного агарового геля, веронал-мединалового буфера (pH 8,6, ионная сила
0,05) в приборе для ИЭФ. Длительность реакции 30 мин, сила тока
1,25 мА/см.
Предлагаемый способ позволит сократить время идентификации стафилококков с 4-5 до 1 5-2 сут. Сокращение времени анализа позволяет своевременно начать лечение и способствует своевременному проведению противоэпидемических мероприятий,
