Способ получения стафилококкового энтеротоксина типа а

 

Изобретение относится к микробиологии. Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта. 25 мл маточной культуры вносят в 2-литровую колбу с 0,5 л стерильной питательной среды, содержащей кофеин. Культивирование проводят в течение 48 ч в условиях шюттелирования.

Изобретение относится к микробиологии и касается получения токсина, используемого в качестве антигена для получения иммунных препаратов. Цель изобретения повышение выхода целевого продукта за счет использования нового стимулятора токсинообразования. П р и м е р 1. В качестве продуцента используют штамм Sr.aureus FRI-722H. Культуру хранят в сухом состоянии в запаянных под азотом ампулах. Маточную культуру готовят путем разведения содержимого 1 ампулы в 2 мл питательной среды, содержащей следующие компоненты панкреатического гидролизата казеина (аминный азот 200-250 мг%), г/л: l-Цистин 0,02-0,03 l-Триптофан 0,07-0,08 Тиамин HCl 0,00004-0,00005 Никотиновая кислота 0,001-0,0015 Кальция панто- тенат 0,0005-0,0006 Натрия ацетат 6,5-7,5 K₂HPO₄ ˙3H₂O 0,8-1,2
KH₂PO₄ 0,8-1,2
MgSO₄ ˙7H₂O 0,18-0,2
Дрожжевой
экстракт 10-12
рН среды перед
автоклавированием 6,7
25 мл маточной культуры вносят в 2-литровую колбу с 0,5 л стерильной питательной среды указанного состава, содержащей кафеин бензоат натрия в количестве 0,005 г/л среды (0,25 мл 1%-ного стерильного раствора кофеина на 0,5 л среды). Культивирование проводят в течение 48 ч при 37^оС в условиях шюттелирования. В культуральной жидкости, освобожденной от микробных клеток, содержится 25±2,5 мкг/мл СЭА (энтеротоксин типа А). П р и м е р 2. 25 мл маточной культуры вносят в 2-литровую колбу с 0,5 л стерильной питательной среды, содержащей кофеин бензоат натрия в количестве 0,01 г/л среды (0,5 мл 1%-ного стерильного раствора кофеина на 0,5 л среды). Культивирование проводят в условиях, аналогичных условиям, приведенным в примере 1. В освобожденной от микробной массы культуральной жидкости содержится 55±2,5 мкг/мл энтеротоксина. П р и м ер 3. 25 мл маточной культуры вносят в 2-литровую колбу с 0,5 л стерильной питательной среды, содержащей кофеин бензоат натрия в количестве 0,05 г/л среды (2,5 мл 1%-ного стерильного раствора кофеина на 0,5 л среды). Культивирование проводят в условиях, аналогичных условиям, приведенным в примере 1. В культуральной жидкости, освобожденной от микробных клеток, содержится 27±2,5 мкг/мл СЭА. Выход СЭА при использовании в качестве стимулятора токсинообразования Т_вин=60 составляет 9 мкг/мл.

Формула изобретения

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТАФИЛОКОККОВОГО ЭНТЕРОТОКСИНА ТИПА А путем выращивания штамма-продуцента Streptococcus aureus FRI 722H в питательной среде в присутствии стимулятора токсинообразования с последующим выделением целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, в качестве стимулятора токсинообразования используют кофеин-бензонат натрия в концентрации 5 50 мкг/мл питательной среды.

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Номер и год публикации бюллетеня: 36-2000

Извещение опубликовано: 27.12.2000        

---