Способ определения неспецифической резистентности организма к условиям высокогорья

 

Изобретение относится к медици не, предназначено дня выявления индивидуального значения показателя неспецифической резистентности орга низма к условиям высокогорья у пащ1- «нтрв, :Цель изобретения - повышение точности способа. Для этого изводят забор крови, разведение ее цитратно-физиологическим раствором, инкубацию в те1 юстате при комнат-, ной температ фе взвеси эритроцитов, центрифугирование и определение экстинкции супернатанта. Инкубируют одновременно две пробы - одну в мостате при температуре 42-44 С, другую в холодильнике при в течение 30-90 мин и затем обе пробы иикубируют при комнатной температуре 18-22 С в течение 30-60 мин. Цельную кровь разводят цитратно-буферно - физиологическим раствором до концентрации 5-10% и затем после центрифугирования определяют экстинкцию иадосадочной жидкости, по которой судят о степени гемолиза и соответственно резистентности эритроцитов. (П

СОКИ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5g 4 0 О1 0 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ASTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3892071/28-14 (22) 24.04,85 (46). 29.02.88. Бюл. М 8 (7l) Институт физиологии им. А. А. Богомольца (72) А. Н. Красюк (53) 612.015(088.8) (56) Березовский В. А. Гипоксия и индивидуальные особенности реактив- . .ности. Киев: Наукова Думка, 1978, .с. 214. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА К

УСЛОВИЯИ ВЫСОКОГОРЬЯ (57) Изобретение относится к медици не, предназначено для выявления индивидуального значения показателя неспецифической реэистентности орга . низма к условиям высокогорья у наци ентов. Цель изобретения - новызе„.50„„137? 732 A 1 ние точности способа. Для этого про изводят забор крови, разведение ее цитратно-физиологическим раствором, ннкубацию в термостате при комнатной температуре взвеси эритроцитов, центрифугированне н определение экстинкции супернатанта. Инкубируют одновременно две пробы - одну в.тер-. о мостате при температуре 42-44 С, другую в холодильнике при 4-10 С в течение 30-90 мин и затем обе пробы инкубируют при комнатной температу .ре 18-22 С в течение 30-60 мин. Цельную кровь разводят цитратно-буферно физиологическим раствором до концен . трации 5-10Х и затем после центрнфугирования определяют экстинкцию надосадочной зидкости, по которой судят о степенй гемолнза и соответс4 венно резистентности эритроцитов.

1377732

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для выявления индивидуальных значений этого показателя у пациентов.

Целью изобретения является повышение точности способа.

В предлагаемом способе, включающем забор крови, разведение ее цитратно-физиологическим раствором, инкубацию в термостате при комнатной температуре взвеси эритроцитов, центрифугирование и определение экстинкции супернатанта, инкубируют одновременно две пробы, одну в термостате при температуре (+41) — (+43) С, другую в холодильнике при (+4) (+10) С в течение 30-60 мин при этом цельную кровь разводят цитратно-физиологическим раствором до концентрации 5-15%, и после центрифугирования определяют экстинкцию надосадочной жидкости (супернатанта), по которой судят о степени гемолиза и соответственно резистентности организма.

Пример 1. У исследуемой

N.Ë.È., 25 лет, рост 163 см, вес

57 кг, средней степени тренированности произведен забор крови из пальца.

Пробы крови разводят цитратно-буферно-физиологической смесью до концентрации 5-10%, центрифугируют при

1800 об/мин в течение 1О мин.. При помощи пастеровской пипетки супернатант переносят в кювету емкостью

i мл и на "Спеколе" определяют экс- .. тинкцию при длине волны 536 ммк. Е, пробы 1 0,05; Е пробы 2 0,05. Супернатант из кюветы осторожно сливают обратно в пробирку с осадком эритроцитов, после чего путем встряхивания и пипетирования восстанавливают однородность суспензии, Обе пробы инкубируют одновременно, одну в термостате при (+42) — (+41) С, другую о в холодильнике при +4 С в течение

30 мин, затем при комнатной температуре +18 С в течение 30-60 мин. Пробы центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 мин после чего определяют экстинкцию супернатанта в пробах при той же длине волны Е пробы 1 - ТГ =

= 0,065; Е4 пробы 2 — ХГ = 0,095.

В каждую пробирку доливают дистиллированную воду до 5 мл, после чего осадок эритроцитов пипетируют и ге-. молизируют в течение 15 мин. После центрифугирования при 3000 об/мин в

J х 100

СМГ—!

5 (Е+Е) х 100 10

1ОЕ +1ОЕ +Е, +Е 3,4

Е х 100 0,065 х 100

10Е + Е lpx0,17+0,065

6 5

0,1765

- з,д;.

Е х 100 0,065xl00

10Е д + E4 lpx0,16+0,095

0,5 — = 5,6%.

Параллельно производят определение перекисной резистентности эритро цитов: Е = 0,08; Е = 0,07; Е

35 = 0 34! Е4 = 0,04.

Производят рассчет показателей перекисной резистентности эритроцитов: (Е +Š— Е ) х !ОО

2 4

ПРЭ =

Е -Е4

45 (0,075-0,04)x!00 0,035xl00

0,34-0,04 0,3

11,6%..

После курса тРенировки при помощи кратковременной острой гипоксиии. вызываемой гипоксической 10,3%.."ной смесью кислорода с азотом, в течение 5 сут при дыхании по 1 разу в

l сут в течение 20 мин произведено повторное обследование и определение всех перечисленных выпе показателей.

При определении экстинкции на

"Спеколе" при той же длине волны, течение 10 мин гемолизат дополнительно разводят в 2 раза и определяют экстинкцию на спектрофотометре, например Спеколе IlpH длине волны

536 ммк: Е пробы 1 = 0,17 х 10: Е пробы 2 = О,!6х10. Производят рассчет спонтанно-механического, теплового и холодового гемолиза эритроlp цитов.

1377732

Е х 100 15

Тà — 1ОЕ + Е 86 8,0 ;

Е4 х 100 14

10Е6 + Ео 1 84 х 100 8 5

Е + Ез 1,785

= 4,7%.

ТГ =

Наряду с этим определяют поКаза1О тели перекисной резистентности зрит роцитов: Е, = О;09; Е = 0,07, Е

= 0,35, Е = 0,05.Г Е х 100 1,6 ,0E + Е 86 8,5

Производят рассчет показа.телей пе9 х 100 9 . 15 рекисной резистентности эритроцитов:

3,49 3,49

0,08-0,05 х 100 3

ПРЭ

0,35 - 0,05 О, 30

Определены также показатели перекисной резистентности эрнтроцитов в 20 соответствии с указанной вьппе методикой; Е» = 0 09; Е = О,! 2, Е

= 0371 E = 005. — 10 .

После тренировки при помощи кратковременной острой гипоксиии (условия

25 аналогичные примеру 1) произведено повторное определение произведенных выше показателей спонтанно-механического, теплового и холодового гемоли-. за эритроцитов: Е» = 0,06; Е =

30 = 0,08; Е (Tr) = 0,20; Е (Х1 )

= 0,12; Е . = 0,16; Е = 0,18 10 ° (10..0 05) х 100

0,37 - 0,05

0,05 х 100

0,32

Исследуемая М,Л.И. подъем на вьгсоту 3200 м в условиях Тян-Шаня перенесла хуже, чем остальные испытуемые. Предъявляла жалобы на головную

35 боль, слабость, головокружение.

П р и м е. р 2. У исследуемой

Д.Г.И., 28 лет, !67 см ростом, весом 64 кг, средней степени тренированности произведен забор крови из 40 локтевой вены в количестве 9 мл, к ней добавлен 1 мл,8%-ного раствора цитрата натрия. В пробирки разлит буферно-физиологический раствор по

1,1 мл и добавлена кровь по 0,1 мл. 45

СМà — 0,07х! 00 = 1 9 .

5,34

Е » х 100 20

1ОЕ + Е 1,8

Е х 100 12

1ОЕ + Е 1,92

Последующие операции выполнялись в той же последовательности, что и в примере l.

На "Спеколе" определена степень 50 спонтанно-механического, теплового и ,холодового гемолиза эритроцитов: Е, =

= 0,07; Е = 0,09; Е (ТГ) = 0,15;

Е4 (ХГ) .= 0,15; Е = 0,17 10; Е

= 6,17 1О.

Э (0,08-0,04) х 100

0 37 0 04

0,04 х 100

55 0,33

2 2Ж

Зю4 + Оэ16 356 что и в предыдущий раз, получены следующие данные: Е< = 0 04; Е

= 0,05; E> = 0,085; Е = 0,160 ; E

= 0,17 х 10; Е = 0,17 х 10.

Наряду с этим определяют показатели перекисной резистентности эри» троцитов: Е, = 0 08; Е = 0,08; Е

= 0,08; Е, = 0,04.

Производят рассчет показателей перекисной резистентности эритроци тов:

Испытуемая Д.Г.И,.подъем на высо ту 3200 м перенесла удовлетворитель

5 1377732 6 но. Жалоб на плохое самочувствие не Пример 3. Использована предъявляла. Объективно: отмечены кровь исследуемой Д.Г.И, температу обычные сдвиги со стороны дыхания и ра и время выдержано такое же, как в кровообращения .характерные для этой примере 2. Изменяли только концент5 высоты» рацию эритроцнтов:

Концентрация эритроцитов, Х СМГ

ТГ: ХГ

Оэ02 Оэ10 0е09

0,04 0,13 0,11

0,05 0,16 0,12

0,15 0,14

0,06

20

0,15 0,18

0,08

Формула изобретения

Способ определения неспецифической резистентности,организма к условиям высокогорья, включающий йнкуба

Составитель А, Андреев

Редактор Э. Слиган Техред JI.Îëèéíûê. Корректор М. Шароши

Заказ 865/40 Тираж 847 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Таким образом, оптимальной является концентрация 10Х граничным5 и 15%.

Как .видно из приведенных примеров, при концентрации эрнтроцитов

0,2Х падает величина экстинкции, при 20Х ингибируется холодовой гемо лиз эритроцитов, т.е. при этих условиях указанная выше закономерность не выявляется., 20 ции пробы цитратной крови, центрифугирование и определение экстинкции с последующим расчетом, о т л ич а ю щ.и и с я тем, что, с целью повышения точности способа, инкубируют две пробы крови, одну при (+41)(1.43) С, другую при (+4) - (+10) С в- течение 30-90 мин, затем обе пробы дополнительно инкубируют при (+18) (+22) С, при этом перед первой инкубацией пробы разводят до концентрации 5-15Х, далее рассчитывают коэффициенты тепловой и холодовой реэис тентности.эритроцитов, а о резистентности организма судят по соотноше» нию рассчитаяных величин.