Способ получения (2 @ -5 @ )- и (3 @ -5 @ )- диаденозинмонофосфатов

 

Изобретение касается замещенных гетероциклических веществ, в частности получения (2-5 ) и (3-5 )-диаденозинмонофосфатов (АФ), используемых в иьадунологии. Цель - повышение выхода АФ. Его получают из других исходных - М, N, 2, З -тетрабензо-,- иладенозина и салицилхлорфосфита с последующей обработкой реакционной смеси иодом и снятием бензоильной защитной группы. Эти условия обеспечивают высокую селективность процесса при улучшенном в 3-4 раза выходе целевого АФ. « (Л

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (5р 4 С 07 Н 19/167

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4171773/23-04 (22) 30.12.86 (46) 23.05.88. Бюл. ¹ 19 (71) Институт биоорганической химии

AH БССР (72) F...И. Квасюк, О,В. Ткаченко, Т.И. Кулак, Г.В. Зайцева и И.А.Михай- ° лопуло (53) 547.857.7.07(088.8) (56) Michelson А.M. Polynucleotides.

11. Homopolymers of cytidylic and

pseudouridylic acid.copolymers with

repeating subunits and stepwise synthesis of polynucleotides.-JCS,1959, ¹ 12, р.3655-3669.

Shimidzu Т., Jamana К., Kanda N., 1

Maikuma S. А, sample and convenient

synthesis of. 3 -5 -or 2 -5 -linked

oligoribonucleotideby polymerisation

of. unprotected ribonucleoside using

phosphorus tris -azo1e. — Nucl.Acids, Res 1984, № 12, v.7, р.3257-3270.

ÄÄSUÄÄ 1397455 А 1 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ (2 -5 )-И (3

5 )-ДИАДЕНОЗИНМОНОФОСФАТОВ (57) Изобретение касается замещенных гетероциклических веществ, в частнос(t I ти получения (2 -5 ) и (3 -5 )-диаденозинмонофосфатов (АФ), используемых в иммунологии. Цель — повышение выхода АФ. Его получают из других исходных — N N, 2, 3 -тетрабензо-б 6 иладенозина и салицилхлорфосфита с последующей обработкой реакционной смеси иодом и снятием бензоильной защитной группы. Эти условия обеспечивают высокую селективность процесса при улучшенном в 3-4 раза выходе целевого АФ.

1397455

Изобретение относится к усовер- щью триэфирного Метода, подтверждают

I шенствонанному способу получения (2 — структуру полученных соединении.

5 )- и (3 -5 )- диаденозинмонофосфа- (2 -5 )-Диаденозинмонофосфат. УФтон и может быть использовано в им- 5 спектр,9, „ „ -259 нм (24> ). мун ол огии . ПМР-спектр (Д О, внутренний станЭ

Цель изобретения — повьппение выхо- дарт — трет-BuOH), м.д.:,, 6, 76

6 85 6 76

6,60 6,39 синглеты по 1 протону да целевых продуктов.

Цель достигается использованием (Н-2, Н-8), 4,83 д (1H, —,,у

Г

Г новых реагентов: N „ N, 2, 3 -Фетра-1p = 5,1 Гц), 4,50 д (1H,Í-1, J, бензоиладенозина, салицилхлорфосфита -2,4 Гц), 3, м ( и N -бензоил-5 -монометокситритил1

=5, 1 Гц .1 р — -" ц) )ь дд

0 Г ) 3 38

Н Н-3 J ° =Д =4 8 Гц), аденозина.

Г т4аденозинмонофосфаты (2 -5 АРА и 15 (1 Н Н-4 ) ? 7 1 м (1 Н Н 5) (2Н, Н-5,5 ); 2,52 дд (1Н, Н-5", Раствору 50 М< (0,24 ммоль) са- .1 =13,2 Гц, 3 4 =3,6 Гц). лйцилхлор ос ита в фосфита в О 7 мл хлористого (3 -5 )-Диаденозинмонофосфат. УФон=)- о м тиленя при перемешинании и охляжде- спектр, % „,= 259(80 ).

259(25800) нйи до О С добавляют раствор 118 Mr 20 ?IMP-спектр (Д О, внутренний стан(0,17 ммоль) N,N, 2,3 -тетрабен- дарт -трет-Bu0H), м.д.: 6,95, 6,88, зоиладенозина в смеси 2 мл хлорис- 6,75; 6,60 синглеты по 1 протону того метилена и О, 2 мл пиридиня. Че- (Н-2, Н-8), 4,68 д (Н-1,,1, д ез 2 ч к раствору добавляют 0,06 мл =4,5 Гц), 4,56 д (1Н, Н-1, J< рез.чкр (О 7? ммоль) N-метилимидя зола и 25 =4, О Гц), 3, 39 м (2Н, - —, ), — (1-1-2 3 )

Р =О мг (0,24 ммоль) N — бензоил-5-. 3,32 дд (1Н, 3> < =4,5 Гц, J з монометокситритиладенозина и переме- =,5 Гц), 3, дд (=4 5 Г ) 3 24 (1Н Н-3 J шивают 2 ч при 0 С,. Зятем в реакцион- = 3 4 =5,2 Гц);, ( — 2 ) 3 09 м (ЗН 2Н-4 пую смесь добавляют раствор 61 мг Н-5 ), 2,91 м (1Н, Н-5 ); 2,58 м (0,24 ммоль) иода в 5 мл смеси тетра- 30 (2Н Н-5< 5 ).

i èäðoôóðàí:âîäà:ïèðèäèí 6:3: 1, растВор разбавляют >

30 мл хлороформа

У Таким образом, использование дос1кстрягируют 10 мл 1 --ного раствора тупных селективно бензоилированных (исульфатя калия. Органический слой производных аденозина и реакционнофтделяют, сушат

Ушат безвоцным сульфатом 35 способного салицилхлорфосфита позво.«ятрия и упаривают. ляет проводить реакцию образования

Остаток растворяют в 25 мл 80 -нои динуклеозидмонофосфатов быстро и сеуксусной

-ксусной кислоты, выдерживают раст- лективно, вьделяя одновременно два

Нор 2 ч при 70 0 и упаривают. Оста- целевых .продукта, при этом выход поток растноряют в 30 мл смеси 25 -но- <О вьппается в 3-4 раза по сравнению с го раствор астнора аммиака и диоксана 9:1, известным способом. ныдерх<ивают 2 ч при 70 С и упаривают.

Остаток после упаривания растирают ф о р м у л а и з о б е т е н и я

Р с 30 мл эфира, эфир декантируют, noi (2-5 )- и (3 -5 )рошок растворяют в воде и хроматогра- 5 Способ получения (— ) фируют на колонке 100 см ДЕАЕ целлю- диаденозинмонофосфатов взаимодейстлозы в бикярбонатной форме. КолонкУ вием бензоилированных производных элюируют раствором триэтиламмонийби- аденозина с производным трехваленткарбоната в градиенте концентраций, ного фосфора с последующей обработ0-0,05 М. Фракции, содержащие продук- кой реакционной смеси иодом и снятием ты, собирают, упаривают н вакууме защитных групп, о т л и ч а ю щ и йНолучают после лиофилизации с я тем, что, с ц с елью повышения ны1360 опт.ед. (0,052 ммоль), 31,8 ) хода целевого продукта, в качестве

2 - 5 АРА и 800 опт.ед. (0,031 ммоль бензоилированных производных аденози6

18 2 ) 3 -5 АРА в виде гигроскопи- на используют N, N, 2, 3 -тетрабен1, .) — р в в .

6 чного порошка. зоиладенозин и N -бензоил-5 -мономеСпектральные характеристики и токситритиладенозин, я в качестве сравнение с заведомыми образцами, по . производного трехвалентного фосфоралученными встречным синтезом с помо- салицилхлорфос<ьит.