Штамм аденовируса серотипа 3 архангельск /1511/79, используемый для приготовления диагностических препаратов

 

Изобретение относится к вирусологии и может быть использовано при производстве диагностических препа- ,ратов. Цель изобретения - получение антигенно и эпидемически актуального высокорепродукционного штамма аденовируса , пригодного для приготовления диагностических препаратов о Штамм вируса депонирован в коллекции виругсов Института вирусологии под номером 1879. Скорость репродукдаи в клетках: до 30 вирусных едо в сутки; комплементсвязывающая активность штамма 1:8 - 1:16, Вирус относится к аденовирусам подгруппы,ВS 3-му серотипу. № 1879 использ тот для приготово Ленин диагностикума для РСК.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ социАлистических

РЕСПУБЛИК

С 12 Я 7/OO

ГОСУДАРСТ8ЕККЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРи гкнт сссР (21) 4133725/28-13

{22) 14.10.86

{46) 30.10.86. Бюл. И 40 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт гриппа и Институт вирусологии им. Д.И.Ивановского (72) Т.И.И1рлова, Н.Л.Корчанова, Т,N.Гудкова, Н М.Козлова, Н.Б.Румель, M.À.ßõíî и Э.Е.Золотарская (53) 576.8.097(088„8) (56) Руководство по лабораторной диагностике вирусных и риккетсиозных болезней (ред. П.Ф,Здродовский, ; М,И.Соколов ). М., 1965, с. 282. (54) ШТАММ АДЕНОВИРУСА СЕРОТИПА 3

АРХАНГЕЛЬСК /1511/79, ИСПОЛЬЗУЕМЫИ

ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ

ПРЕПАРАТОВ

Изобретение относится к медицине ! и может быть использовано в вакцинно-сывороточном деле для приготовления аденовирусных диагностикумов.

Цель изобретения — получение ан" тигенно и эпидемически актуального высокорепродукционного штамма аденовируса, пригодного для приготовления диагностических препаратов.

Штамм выделен в ноябре 1979 г. из секционного материала от ребенка

ll месяцев. Вирус прошел 5 пассажей в в клеточной культуре Нер-2. Депонирован в коллекции вирусов Института вирусологии под номером 1879.

Характеристика вируса.

Морфология, Вирионы однотипны и имеют форму икосаэдра-20-гранника; размеры в пределах 65-70 нм в диаметре. (57) Изобретение относится к вирусологии и может быть использовано при производстве диагностических препа, ратов. Цель изобретелия — получение антигенно и эпидемически. актуального высокорепродукционного штамма аденовируса, пригодного для приготовления диагностических препаратов. Штамм вируса депонирован в коллекции виру:сов Института вирусологии под номером 1879, Скорость репродукции в клетках: до 30 вирусных ед. в сутки; комп" лементсвязывающая активность штамма

1:8 — l 16. Вирус относится к аденовирусам подгруппы„В, 3-му серотипу.

Штамм И - 1879 используют для приготов- ления диагностикума для РСК. е

Репродукционные свойства. При заражении культуры клеток Нер-2 инфекционный титр штамма íà 5-е сутки составляет 4,5-6,0 Ig ИД/50 мл. Штамм обладает большей скоростью репродукции в клетках, индицирует в среднем на каждый день инкубации до:30, а известный — только,до 10 вирусных частиц. Комплементосвязуюп,ая активность штамма 1:8-1:16, а известного — 1:4—

1:8, Антигенная характеристика, Вирус относится к аденовируам подгруппы В, к 3 серотипу. По данным реакции пере- Зь крестной нейтрализации с набором современных изоляторов аденовируса

3 серотипа и антисывороток к ним штамм

Архангельск /15)1/79.близок по,антигенной структуре к современным адено1412300 нии вируса состоит иэ среды Игла с добавлением антибиотиков в укаэанной выше концентрации, Полученный материал проверяют на присутствие инфекционного вируса путем определения

его концентрации в первичной культуре клеток почечной ткани плода человека при 36 С. В пробах из трех матрасов инфекционный титр вируса равняется ,следующим показателям: 4,5; 5,0;

5 ° 0 1g ИД /50 мл.

Формула и э о б р е т е н и я

Корректор С.ЧеРни

Редактор С,Ленина Техред.М.Моргентал

Заказ 8029 Тираж 501 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 .I

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãîðàä, ул. Гагарина,101 вирусам, выделенным в СССР и за рубежом, Использование штамма для приготовления диагностикума для PCK иллюстрируется следующим примером.

5 .Пример. Маточный материал аденовируса серотипа 3, прошедший конт.роль на специфичность, стерильность, биологическу аквностьв устойчи†10 вость к неспецифическим р-ингибиторам сывороток человека и животных, разводят в 50 раз на поддерживающей среде

Игла (рН вЂ” 7,5),, содержащей антибиотики (пенициллин 200 ед/мл,.стрел- 15 томицин 100 мкг/мл). Объем разведенного вируса составляет 100 мл. Для заражения используют 3 матраса с клеточной культурой Нер-2. Доза зараже.ния составляет 10 1g ИД /мл . з,s

После двухчасового контакта вируса с клетками культуру несколько раэ промывают буферным раствором (рН-g,2). Зараженные клетки инкубируют при t 36 С в течение 5 суток до íà- 25 ступления характерных деструкционных изменений клеток. Вируссодержащий материал подвергают трехкратному зама" раживанию в смеси сухого льда со спиртом (-70 С) ° с последующим быстрым оттаиванием при 37 С. Собранную жидкость центрифугируют 20 мин при

1500 g для удаления клеточного детрита. Поддерживающая среда при выращиваДля инактивации инфекционной активности вируссодеряащие жидкости прогревают при t 56 С и затем определяют комплементсвязующую активность в каждой пробе, Она равна 1:8, 1:16 и 1:16 соответственно.

После проверки на стерильность полученный материал разливают по ам" пулам и лиофилиэируют. Сухие аденовирусные диагностикумы перед употреблением разводят и повторно определяют титр в РСК, он равен 1:8.

Штамм аденовируса серотипа 3 Архангельск /1511/79 Ф 1879 (коллекция вирусов Института вирусологии, им. Д.И.Ивановского ANH CCCP), используемый для приготовления диагностических препаратов,