Способ внутригрупповой дифференциации вирусов коксаки в

 

Изобретение относится к вирусологии и касается способа внутригруппой дифференциации вирусов Коксаки В. Для осуществления способа исследуемой вирусной суспензией заражают культуру клеток ФЭЧ, которые инкуби-. руют, и определяют цитопатический эффект, при наличии последнего дифференцируют вирусы Коксаки В1, ВЗ, В5, В6. В случае отсутствия этого эффекта повторно заражают исследуемой суспензией клетку того же типа, инкубирование ведут в присутствии трипсина и при наличии цитопатическо- g го эффекта на этом этапе дифференцируют вирусы Коксаки В2, В4. 1 табл. V/7

СОЮЗ СО8ЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

А1 (19у (И) (5D 4 С 12 N 7/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

И АВТОРСН0МУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4159976/28-13 (22) 04.11.86 (46) 23.09.88. Бюл. У 35 (71) Молдавский научно-исследовательский институт гигиены и эпидемиологии (72) К.И.Спыну и Т.П.Грушко . (53) 576.858(088.8) (56) Жданов В.Y.., Гайдамович С.Я.

Общая вирусология. Т.1-. М., 1982, с. 463-493. (54) СПОСОБ ВНУТРИГРУППОВОЙ ДИФФЕРЕН-.

ЦИАЦИИ ВИРУСОВ КОКСАКИ В (57) Изобретение относится к вирусологии и касается способа внутригруппой дифференциации вирусов Коксаки В.

Для осуществления способа исследуемой вирусной суспенэией заражают культуру клеток ФЭЧ, которые инкубируют, и определяют цитопатический эффект, при наличии последнего дифференцируют вирусы Коксаки В1, ВЗ, В5 Вб.- В случае отсутствия этого эффекта повторно заражают исследуемой суспензией клетку того же типа, инкубирование ведут в присутствии трипсина и при наличии цитопатическо- у

C го эффекта на этом этапе диффеаенцируют вирусы Коксаки В2, В4. 1 табл, 1425204

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано для дифференциации внутри подгруппы вирусов Коксаки В и их ди5 агностики.

Пример. Исследованию подвер гают стандартные штаммы подгруппы ирусов Коксаки В (Коксаки В1 — Con)necticut, Коксаки В2 — Ohio-1, Кокса- 10 ки BÇ вЂ” Nancy, Коксаки В4 — ivB, Коксаки B5 — Faulkner, Коксаки В6—

Schmidt) а также .13 штаммов энтеровирусов подгруппы Коксаки В, выделенных от больных серозным менингитом, герпангиной, а также из водных обьектов окружающей среды. Индикацию вирусов химическим соединением проводят в культуре клеток (ФЭЧ). Клетки

ФЭЧ выращивают в растворе Хенкса, содержащем 0,5% гидролизата лактапьбумина и 10% сыворотки крупного рогатого скота. За 3 ч до внесения ви руса проводят смену на среду того же

| состава без сыворотки, но с добавле- 25 нием аморфного трипсина в конечной концентрации 50 мкг/мл. Вируссодержащий материал вносят на монослой после удаления среды из расчета 0,1 мп»

«10 ЦПД /мл на 250 тыс. клеток и после часового контакта культуру заливают средой, содержащей трипсин в такой же концентрации (50 мкг/мл) и о инкубируют при 37 С. Аналогичным образом инфицируют культуру ФЭЧ в питательной среде, в которую не добавлен трипсин. Инфицированные пробирки инкубируют при 37 С в течение 48-72 ч.

Результат оценивают по ЦПД вируса, Штамм пределение типов кишечных вирусов

Размножение в ФЭЧ в при сутствии трипсина (50 мкг/мл) Типирование иммунными сыворотками

Размножение в ФЭЧ

Коксаки В1

Коксаки В2

++++

Коксаки ВЗ

Коксаки В4 (Nancy) (ivB) Коксаки ВЗ

Коксаки В4

++++

++++

Коксаки В5

Коксаки Вб

+++++

++++

Коксаки ВЬ (Schmidt) Коксаки В1 (Connecticut)

Коксаки В2 (Ohio-1) Коксаки B5 (Faulkner) в случае его развития в ФЭЧ без до-. бавления к питательной среде трипсина, исследуемые штаммы относят к Коксаки В1, ВЗ, В5, В6, а в случае развития в ФЭЧ на трипсинсодержащей среде (при отсутствии такого эффекта в ФЭЧ без трипсина) его относят к

Коксаки В2 и В4.

Принадлежность вирусов к Коксаки

В1, ВЗ, В5„ В6 и Коксаки В2, В4 контролируют H подтверждают типированием вирусных агентов иммунными сыворотками в реакции нейтрализации.

Сравнительные данные по дифференциации стандартных штаммов вирусов

Коксаки Б внутри своей подгруппы в культуре клеток (ФЭЧ) приведены в таблице.

Использование способа позволяет проводить дифференциацию вирусов Коксаки В внутри группы, что повысит точность диагностики.

Формула изобретения

Способ внутригрупповой дифференциации вирусов Коксаки В, заключающийся в том, что исходной вирусной суспензией заражают культуру клеток ФЭЧ, инкубируют и при наличии цитопатического эффекта дифференцируют вирусы

Коксаки В1, BÇ, В5 В6, а при отсутствии его дополнительно заражают исследуемой суспензией культуру клеток ..

ФЭЧ, инкубируют в присутствии 50,0+

+6,6 мкг/мл трипсина и при появлении цитопатического эР,фекта дифференцируют вирусы Коксаки В?, В4,