Патент ссср 157831
ВЮСОЮЗПг1 У1
Подписная групгга М 178
Д. И. Чкаников, Л. T. Макеева-Гурьянова, Н. Н, Павлова, П. С. Хохлов, Д. Ф. Герцуский и А. М. Макеев
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГАЛОИДЗАМЕЩЕННЫХ
ФЕНОКСИУКСУСНЬ1Х КИСЛОТ В РАСТИТЕЛЪНЪ1Х ТКАНЯХ
Известен способ определения микроколичеств галоидзамещенных феноксиуксуcnblx кислот, полученных экстракцией растительного материала путем дезалкилирования, отгонки с водяным паром образующихся фенолов и их определения с помощью 4-аминоантипирина. Эти соединения являются стимулятором роста растений и используются как средства борьбы с сорняками.
Предложен способ определения микроколичеств галоидзамещенных феноксиуксусных кислот в растениях оез их предварительного выделения, Растительный материал обрабатывают солянокислым пиридином (процесс дезалкилирования), отгоняют с паром и определяют количество образующихся фенолов с помощью специфических реагентов, например смеси 4-аминоантипирина и железосинеродистого калия.
Пример 1. Навеску сухого растительного материала (1,5 г) вместе с десятикратным количеством сухого солянокислого пиридина помещают в круглодонную колбу емкостью
50 †1 лл. Колбу немедленно переносят в ванну, наполненную сплавом Буда, нагретым до температуры 207 — 210 С.
Феноксисоединения дезалкилируются в течение часа. После охлаждения до комнатной температуры продукты реакции переносят в литровую отгонную колбу с несколькими порциями дистиллированной воды, так чтобы общий объем жидкости не превышал 300—
500 лл. Добавляют 10 л.г концентрированной
НС! для превращения фенолятов в фенолы.
Фенолы отгоняют с водяным паром в приемник, на дно которого наливают 25 лл 1 н.
iIH 500 лл. Дистиллят переносят в литровую делительную воронку и подкисляют 5 лл концентрированной НС1 для превращения фенолятов в фенолы, которые экстрагируют последовательно тремя порциями по 50 лл очищенного от непредельных соединений и отогнанного петрслейного эфира (т. кип. — 35 — 60 С). Эфирный экстракт промывают тремя порциями по 25 лг.г дистиллированной воды в делительной воронке емкостью 250 лл. Затем фенолы экстрагируют тремя порциями 0,05 н. раствора КН,ОН (первая 10 лл, а вторая н третья по 5 л,г). Аммиачный экстракт переносят в мерную колбу емкостью 100 1г.г, затем добавляют 20 лл фосфатчого буфера (рН 9,1), 1 л.г свежеприготовленного 1 1/0-ного раствора 1-феннл-2,3-диметнл-4-амннопиразолона-5- (4-ампноантипирина) и 1 лл свежеприготовленного 2%-ного расгвора железосннеродистого калия. Колбу доливают водой до метки, ннтен№ 157831 Результаты опытов приведены в таблице. Таблица Найдено 2,4-Д за вычетом1 количества в контрольном растении в л г Найдено 2,4-Д в "., от ожидаемого количестьа Найдено 2,4-Д в мг Смыто с листа 2,4-Д в лсг Должно быть найдено 2,4-Д в лсг Растения в обра- в остальботан- ных ном частях листе растений в обработанном листе в остальных частях растений в целом растении в целом растении Необработанные Нанесено 100 .иг 2,4-Д 4,07 8,09" 4,02 25,35 103,5 83,33 16,67 17,36 7,99 13,29 3,97 17,26 Данные получены прп анализе растений, содержащих вещества, дающие окрашивание с 4-ампноантппирином. Составитель И. В. Виха Редактор Л. Г. Герасимова Техред А. А. Кудрявицкая Корректор И. А. Шпынева Поди к печ. 30/Х вЂ” 63 г. Формат бум. 60 у, 90 /в . Объем 0,23 изд. л. Заказ 2778/14 Тираж 850 Цена 4 коп. ЦНИИПИ Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССР Москва, Центр, пр. Серова, д, 4 Типография, пр. Сапунова, 2 сивность окраски определяют на ппиборе СФ-5 при длине волны 515 иик, используя 100- ил кюветы. ! (алибровочную кривую строят на основе описанного примера по результатам взаимодейст1вия T()÷íî взятых количеств феноксисоединений с солянокислым пиридином. Отсчеты на СФ-5 снимают и сравнивают с данными растворов, полученных в результате реакции со всеми реактивами без феноксисоединений. Поскольку данный метод приводит к выделению некоторых метаболитов, дающих окраску с 4 аминоантипирином и железосинеродистым к"..ëèå.ì,,для сравнения необходимо подвергать описанной обработке образец, не содержащий феноксисоединений. Величину отсчета, полученного для контрольного образца, вычитают из величины отсчета опытного образца. Метод позволяет определять с достаточной точностью галоидзамещенные феноксикислоТакие же результаты были получены при анализе 2-хлор-4-фторфеноксиуксусной кислоты в пастениях. Предмет изобретения Способ определения галоидзамещенных феноксиуксусных кислот в растительных тканях путем дезалкилирования этих веществ, о тты в таких низких концентрациях, как О,! .иг. Чувствительность метода повышают, применяя мерные колбы 50 лл при окраске аммиачного экстракта. Пример 2. На первичный лист растения фасоли наносят микропипеткой 00 /иг 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты. Через b час не поглощенную листом 2,4-Д смывают 5 м.г этилового спирта. !количество смытого 2,4-Д определяют на СФ-4 при длине волны 284 лил к. От растений отделяют обработанныи,".ист, который так же, как и остальные их надземные части, сначала фиксируют при 105 С, а потом высушивают при 60 С. Сухие образцы анализируют описаннь|м методом. Для контроля используют 10 не обработан :ых гербицидом растений. л и ч а ю шийся тем, что, с целью упрощения анализа, сухой растительный материал, содержащий эти соединения, подвергают непосредственному воздействию солянокислым пиридином, а количество образовавшихся при этом фенолов определяют по интенсивности окраски с 4-аминоантипирином и железосинеродистым калием.
