Штамм гриба fusаriuм sроrотriснiеllа, используемый для получения т-2 токсина

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ВОПЯТ% -%й409ЧМ6В

БЫЬЛИОтенй (72) А.Н.Котик и В.А.Труфанова (53) 576.8,093;3(088.8) I ,,л Ю (21) 4373312/13 (22) 03.03.88 . (46) 30.11.91. Бюл. N 44 (71) Украинский научно-исследовательский институт птицеводства (56) Соболев В.С., Эллер К.И., Болтянская

Э.В., Дмитриева И.В., Тутельян В.А. Изучение токсинообраэования Ризаг! огл

sporotrichlella, Известия Академии наук

СССР, серия биологическая, 1984.

М 1, с. 137-140.

Т-2 токсин. Технические условия ТУ10-07-301/86, утверждены Главным управлением ветеринарии Госагропрома СССР

14 ноября 1986.

Изобретение относится к биотехнологии, производству микотоксинов, в частности Т-2 токсина (4.15-диацетокси-8(3-метилбутирилокси)-12, 13-эпокситрихотец-9-ен-З-ола), применяемого в качестве вещества-свидетеля в процессе санитарно-гигиенического контроля качества продовольственного и фуражного зерна и продуктов его переработки, а такжедля научно-исследовательских целей.

Цель изобретения — новый штамм

Fusarlum sporotuichlella 2m-15, обладаю, щий повышенной токсинообраэующей способностью, что позволит увеличить производство Т-2 токсина.

Штамм Fusarlum sporotrichiella 2m-15 получен при воздействии N-нитроэометил,,5U, 1503295 А1 (sI)s С 12 N 1/14//{ С 12 N 1/14,С 12 R 1:77) (54) ШТАММ ГРИБА Fusarlum sporotrlchleila.

ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ Т вЂ” 2

ТОКСИНА (57) Изобретение относится к биотехнологии, к производству микотоксинов и может найти применение в процессе санитарногигиенического контроля качества продовольственного и фуражного зерна и продуктов его производства. Цель изобретения — новый штамм Fusarium sporotrichielia

ВНИИА М 315А. обладающий повышенной токсинообразующей способностью. При выращивании на стерильном увлажненном зерне (рис, просо) при 6 — 12 С в течение 4-6 недвль или при 24-28 С в течение 1-4 недель штамм образует Т вЂ” 2 токсин в количестве 8-10 г/кг субстрата. Использование штамма позволит значительно увеличить производство

Т вЂ” 2 токсина. 3 табл. мочевины на исходный штамм Fusarium

sporotrichlella 2m и отбора среди полученных мутантов по признаку токсинообразования. Полученный штамм Fusarium зрогОтг!сЫеНа 2m-15 депонирован в коллекции культур микроорганизмов В НИ И антибиотиков и имеет регистрационный номер

315А.

Штамм Fusarlum sporotrichiella НИИ N.

315А характеризуется следующими признаками:

Морфологические признаки. Микроконидии образуются в воздушном мицелии на простых или разветвленных конидиеносцах, многочисленные, большей частью грушевидные. почти округлые, реже овальные или удлиненные, иногда веретеновидные, 1503295

Таблица 1

Динамика продуцирования Т-2 токсина шт, F. sporotrlchietla ВНИИА M 315 А большинство беэ перегородок. реже с 1-2 перегородками. Макроконидии веретеновидно-серповидные, веретеновидные или серповидные с постепенно сужающейся верхней клеткой, с более или менее выраженной ножкой у основания, иногда имеющей вид сосочка. Образуются в воздушном мицелии, обычно с 3 перегородками. Хламидоспоры в мицелии промежуточные, реже конечные, Культуральные признаки. На агаре Чапека 10-суточная колония ровная округлой формы с неровными краями, центральная часть колонии плоская, воздушный мицелий слаборастущий, низкий, бело-розового цвета. Строма окрашена в розовый цвет. С возрастом культуры окраска колонии изменяется от розового до фиолетово-бурого цвета. На сусловом агаре колония слабопаутинистая, ровная, округлой формы, с неровными краями, центральная часть колонии плоская, воздушный мицелий роэовофиолетовый. Строма лилово-фиолетового цвета на картофельном агаре колонии складчато-бугристые, округлой формы, с неровными краями, воздушный мицелий белорозовый. Строма красно-лилового цвета. На плотных питательных средах колонии характеризуются ограниченным ростом (величина 2-недельных колоний, выращенных при 24-28 С, не превышает в диаметре 1215 мм), а также обильным конидиеобраэованием.

Токсинообразующая активность. При выращивании на стерильном увлаженном зерне (рис, npoco) при 24-28ОC в течение

1-4 недель, при 6-12 С в течении 4-6 недель образуется Т-2 токсин в количестве

8-10 r/êã субстрата.

Пример 1. Штамм F. sporotrlchlella

ВНИИА М 315А выращивают в пробирке нэ скошенном агаре Чапека при 28 С в течеи ние 10 сут. Полученной культурой засевают субстраты (рис, рис с просом1, предварительно увлажненные водопроводной водой (40 мл на 100 г субстрат и стерилизованные в автоклаве при давлении 1 атм в течение 1 ч. Колбы с засеянными субстратами выдер5 живают в термостате при 28 С в течение 5-6 сут, а затем в холодильнике при 8 — 10 С в течение 3-6 недель, после чего биоавтографическим методом определяют содержание

Т-2 токсина. Результаты исследования при10 ведены в табл.1.

Пример 2. Токсинообразующая способность штамма Fusarlum sporotrlchiella

ВНИИА N 315A, а также штамма Fusarlum

sporotrlchleIla var, рсае 407/4, испол ьэуемо15 ro в процессе производства Т вЂ” 2 токсина в настоящее время в нашей стране и принятого нами эа прототип, представлена в табл.2 и 3, Культуры обоих штаммов на увлажненном стерильном зерне инкубируют в

20 течение 6 суток при 28 С и затем выдерживают при 6 — 12 С в холодильнике в течение

4-6 недель.

Как видно из табл.1, штамм ВНИИАМт

315А отличается от штамма 407/4 большей

25 токсинообразующей способностью.

Результаты определения количества Т—

2 токсина в культурах штаммов на зерне. выращенных при 28 С, представлены в табл.3, 30 Как видно из таблиц, новый штамм вырабатывает Т-2 токсин как при 6-12, так и при 28", Использование штамма Fusarium

35 sporotrlchlella ВНИИА hL 315А для производства Т-2 токсина вместо используемого в настоящее время штамма Fusarlum

sporotrlchlelIa var.ðoaå 407/4 позволит значительно увеличить производство T-2 ток40 сина.

Формула изобретения

Штамм гриба Fusarlum sporotrichlella

ВНИИА N. 315A, используемый для получе45 ния Т-2 токсина.

503295

Таблица 2

Токсинообразующая активность штаммов Fusarlum sporotrlchlella 407/4и ВНИИА N.

315 А при 6 — 12 С

Таблица 3

Токсинообразующая активность штамм Fusarlum sporotrichlella 407/4 и ВНИИА

N315А при 28 С

Составитель В.Романова

Техред М.Моргентал Корректор M. Êó÷å ðÿ Bàÿ

Редактор Н.Козлова

Заказ 4644 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб.; 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина. 101