Способ получения 6-метилен-1,2 @ -метиленандрост-4-ен-3,17- диона

 

Изобретение касается замещенных стероидов, в частности получения 6-метилен-1,2-β-метиленандрост-4-ен-3,17-диона, способного ингибировать ароматазу. Цель - создание нового более активного вещества указанного класса. Синтез ведут метилированием 1,2β-метиландрост-4-ен-3,17-диона с помощью формальдегидодиацеталя в среде органического растворителя в присутствии конденсирующего агента при температуре дефлегмации. Выход 60%, брутто-ф-ла C<SB POS="POST">21</SB>H<SB POS="POST">26</SB>O<SB POS="POST">2</SB>. Новое вещество ингибирует ароматазу планцеты человека на 44%. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

09) (Н) (51) 5 С 07 1 1/00

А3

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Р1, п1 4; 19 "°.;:

1 ° Ф 1 1 Фe!1.. alan

), . .-; . с —. 1 :: 1.

Ф \

° и

° °

Н" (т)

О сн

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

IlO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

1 (21) 4202750/23-04 (22) 19.06.87 (31) 8615092 (32) 20.06.86 (33) СВ ("Ц 15.01.90. Бюл, H 2 (71) фармиталиа Карло Эрба С.п.А. (ГХ)

{72) Франко Буццетти, Энрико Ди Салле и Паоло Ломбарди (IT) (53) 547,689.6.07 (088.8) (56) Патент ФРГ 11 3422187, кл. A 61 к 31/56, 1984.

Аппеп К. et а1. — Synthesis, 34 (1982).

Патент США М 4235893, кл. 424-243, 1980.

Изобретение относится к способу получения нового б-метилен-1,28.-метиленандрост-4-ен-3, 17-диона Формулы

o \ обладающих способностью ингибировать . ароматазу.

Цель изобретения - получение ново го производного андрост-4-ен-,3, 17диона, обладающего фармакологическими преимуществами перед известными структурными аналогами подобного действия, 2 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ б-ИЕТИЛЕН- !,2 P"

-ИЕТИЛЕНАНДРОСТ-4-ЕН-3,17-ДИОНА (57) Изобретение касается замещенных стероидов, в частности получения б-метилен-1,2-8-метиленандрост-4-ен-3,17-диона, способного ингибировать ароматазу. Цель — создание нового более активного вещества указанного класса. Синтез ведут метилированием .1,2р-метиландрост-4-ен-3,17-диона с помощью формальдегидодиэтилацеталя в среде органического растворителя в присутствии конденсирующего агента при температуре дефлегмации. Выход

603, брутто-Ф-ла С«Н О, Новое ве- ф щество ингибирует ароматазу плаценты человека на 443, 1 табл.

Пример 1. Смесь ацетата нат-. рия (1 г), абсолютированного хлоро- м форма (30 мл), формэльдегиддизтилаце=таля (30 мл, 0,24 моль), фосфорид хлорида (3,8 мл, 0,04 моль) и 1,2 метиландрост-4-ен-3,17-диона (0,806 г, 2,7 моль) перемешивают при темпера- д туре кипения с обратным холодильником в течение около 5 ч, т.е. до тех пор, пока не исчезнет исходный мате" риал. Суспензии дают остыть, при интенсивном перемешивании добавляют в по каплям насыщенный раствор карбоната натрия до тех пор,, пока рН вод- (ф ного слоя не становится щелочным (примерно 1 ч). Органический слой выделяют, нейтрализуют водой и сушат сульфатом натрия. После концентрирования при пониженном давлении масля1537141 нистый остаток очищают на хроматографической колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан и этилацетат. С 603-ным выходом получают чистый 6-метилен-1;-28-метиленандрос-4-ен-3,17-дион.

Найдено, Ф: С 81,80; Н 8,35.

С у» НАДБО

Рассчитано, 3: С 81,25; Н 8,44.

ЯМР о мд: 0,92 .(3Н, с), 1,18 (3Н, с); 4,82 (2Н, м); 5,60 (1H, синглет) .

Масс-спектр (м/Z) 310

Пример 2. Можно приготовить таблетки массой О, 15 r к аeж д аeя, содержащие по 25 мг активного вещест ва, следующим образом.

Композиция содержит (на 10000 таб. леток), r:

6-Метилен-1 2(5-метилен3 20 андрост-4-ен-3,17-дион 250

Лактоза 800

Кукурузный крахмал 415

Порошок талька 30

Стеарат магния 5

6-Метилен-1, 2g-метилена ндрост-4-ен-3,17-дион; лактозу и половину кукурузного крахмала смешивают, затем полученную смесь продавливают через сито с отверстиями 0,5 мм. Кукурузный крахмал (10 г) суспензируют в теплой воде (90 мл), полученную пасту используют для гранулирования порошка.

Полученный гранулят сушат, просеивают на сите с отверстиями 1,4 мм, а затем добавляют остальное количество крахмала, тальк и стеарат магния, тщательно перемешивают и прессуют таблетки.

Пример 3. Можно получить капсулы, каждая массой 0,2 г, содер жащие по 20 мг активного вещества.

Композиция для 500 капсул содержит, r: б-метилен-1,2)-метилен45 андрост-4-ен-3,17-дион 10

Лактоза 80

Кукурузный крахмал 5

Стеарат магния 5

Композицию помещают в состоящие из двух частей твердые желатиновые капсулы в дозе 0,2 г в каждую капсулуь

Предлагаемое соединение является ингибитором биотрансформации андро" 55 генов в экстрогены, т.е. оно является ингибитором стероидной ароматазы.

Активность ингибирования аромата зы предлагаемого соединения была п -:демонстрирована с использованием in

vitro теста, описанного Томпсоном и Ситери (Е.А. Thempson Cmol P.Ê, Siiter, J. l3ioI Chem, 249, 5364, 1974), в ко- тором используют человеческую плацентарную микросомную фракцию в качестве источника фермента. В этом тесте скорость ароматизации андростендисна в эстрон оценивают, инкубируя (IP, 2 -3Н) андростендион (50 нМ) в присутствии NADPH с препаратом фермента и измеряя количество ЯК О, образующегося за 20 мин инкубирования при 37 С.

»

В таблице приведены результаты биологических испытаний предлагаемых соединений - 1,2 ..-метилен-6-метиленандрост-4-ен-3,17-диона и известного структурного аналога-1,2Р-метиленандросат-4-ен-3,17 диода (ДЕ Р3422187) и 4-гидроксиандрост-4-ен-3,17-диона (патент CEA N 4235893)

Определяли требуемую концентрацию каждого из соединений для осуществления контроля ароматазы на 503 (ICs0) путем графического изображения 3 ингибирования от концентрации ингибитора.

Относительную силу каждого соединения в сравнении с 4-гидроксиандрост-4-ен-3,17-дионом вычисляли как отношение:

Относительная сила =

ICso 40H-А

IC z0 испытуемого соединения

Из результатов, приведенных в таблице, можно видеть, что предлагаемое соединение .FGE. 25026 обладает большей относительной силой как ингибитор ароматазы.

Благодаря своей способности ингибировать ароматазу.и соответственно снижать уровень эстрогена предлагаемое соединение является полезным при лечении и предотвращении различных заболеваний, зависящих от экстрогена, например. рака груди, матки, яичников и поджелудочной железы, гинекомастии доброкачественных заболеваний молочной железы, эндометриоза.

Острая токсичность (ЛД >0) предла гаемого соединения у мышей, определенная по разовому введению в повышающихся дозах и определенная на седьмой день после обработки, была найдена пренебрежимо малой,и его можно отнести к категорий малотоксичных.

5 1537141

6 ф о р м у л а и з о б р е т е н и я отличающийся тем, что, соединение формулы

Способ получения 6-метилен-1,2 -метиленандрост-4-ен-3,17-диона фор.мулы

О, Н, Ингибиторование ! ароматазы плаценты человека

in vitro

Относительная сила

Соединение

1,00

2,64

2 11

Составитель И.федосеева

Техред Л.Олийнык Корректор,И.Муска

Редактор Н.Киатулинец

Заказ 117 Тираж 282 Подписное

8НИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул. Гагарина,101

4-Гидроксиандрост-4-ен-3,17-дион

1,2 -Метилен-б-мети.ленандрост-4-ен

3,17-дион (FGE 25026)

1,2 -Иетиленандрост-4-ен-3,17-дион

0 подвергают метилированию с помощью формальдегиддиэтилацеталя в среде ор ганического растворителя при температуре дефлегмации в присутствии конденсирующего агента.