Способ моделирования паркинсонического синдрома

 

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии. Цель изобретения - повышение точности способа за счет приближения модели к течению естественной патологии. С этой целью в хвостатые ядра мозга животного вводят 200 мкг гамма-глобулина, содержащего антитела к дофамину. Применение способа позволяет повысить точность моделирования паркинсонического синдрома по сравнению с прототипом за счет приближения модели к течению естественной патологии за счет воздействия на дофаминергические структуры хвостатых ядер.

СОЮЗ СО8ЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 С 09 В 23/28

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCH0MY CBHQETEJlbCTBV лине лошади.

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И OTHPblTHRM

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 4408469/28-14 (22) 22.02.88 (46) 30.04.90. Бюл. К 16 (71) Научно-исследовательский инсти тут общей патологии и патологической физиологии АМН СССР (72) Г.Н.Крыжановский, М.А.Атаджанов, С.В.Магаева, Л.А.Башарова, Л.А.Ветрилэ и В.А.Евсеев (53) 615.475 (088.8) (56) European journal. of. pharmaco-—

logy, 1984, V. 100, р. 189-194. (54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПАРКИНСО-, НИЧЕСКОГО СИНДРОМА (57) Изобретение относится к медиИзобретение относится к медицине, а именно к неврологии.

Цель изобретения — повьппение точности способа за счет приближения модели к течению естественной патологии, Способ осуществляют следующим образом.

Конъюгат дофамин-белок синтезируют с использованием диазотированного белка. В качестве белкового носителя используют бычий сывороточный .альбумин. Синтезированный конъюгат выделяют гель-хроматографией фадексе. Количественное содержание дофамина в конъюгате определяют спектрофотометрически по приросту оптической плотности в конъюгате по сравнению с белком-носителем с учетом поглощения дофамина. Полученный конъюгат содержит 30 молекул дофамина на 1 молекулу белка. Для иммуниэа2 цине, а именно к неврологии. Цель изобретения — повьппение точности способа за счет приближения модели к течению естественной патологии.

С этой целью в хвостатые ядра мозга животного вводят 200 мкг гамма-глобулина, содержащего антитела к дифамину. Применение способа позволяет повысить точность моделирования паркинсонического синдрома по сравнению с прототипом эа счет приближения модели к течению естественной патологии за счет воздействия на дофаминергические структуры хвостатых ядер. ции используют кроликов-самцов из породы Шиншила массой 2,5-2,7 кг.

Уровень антител к дофамину и их специфичность определяют в твердофазном иммуноферментном анализе с использованием в качестве тест-антигена конъюгата, синтезированного по той же схеме, но на гетерологичном белковом носителе — гамма-глобу.Гамма-глобулин из имунных сывороток выделяют методом переосаждения сульфатом аммония. Гамма-глобулин

0 лиофилизируют и хранят при +4 С.

Для внутримозгового введения используют гамма-глобулины, очищенные от антител к белку-носителю методом аффинной хроматографии с.использованием в качестве иммуносорбента сефарозы 4-В с иммобилизованным на ней бычьим сывороточным альбуми1561084 ном, а также сывороточные гамма-глобулины неиммунизированных кроликов.

За 7 сут. до введения гамма-глобулинов животному проводят стерео5 таксическую операцию вживления электродов и канюль в правое и левое хвостатые ядра. Перед операцией крысе вводят гексанал из расчета

150 мг/кг массы тела.

В хвостатые ядра крыс линии Вис,тар массой 270-350 г по координатам стереотаксического атласа мозга при ,помощи микрошприца вводят по 200 мкг в 5 мкл гамма-глобулины, содержащие антитела к дофамину, полученные из сывороток кроликов, иммунизированных конъюгатом дофамин-белок.

Используют гамма-глобулины, очищенные от антител к белку-носителю методом аффинной хроматоГрафии. Регистрируют электрическую активность хвостатых ядер и актограмму. Оценивают основную триаду симптомов паркинсонического синдрома: олигокинезию,25 ригидность, тремор.

Пример. Подопытной крысе за, 7 сут. до моделирования паркинсонического синдрома проводили стереотаксическую операцию вживления электродов и канюль в правое и левое хвостатые ядра. Перед операцией крысе вводили гексенал .из расчета 150 мг/кг массы тела. Вживление электродов и ка" июль проводили в стереотаксическом аппарате по координатам атласа мозга крысы. Униполярные нихромовые электроды вживляли по следующим координатам: А = -2, 4 = 2 5, Н = 4,5.

Канюли вводились по координатам:

А = -2, d = 2,5, H = 5.

Через 7 сут. после проведения стереотаксической операции проводили запись электрической активности хвостатых ядер и исследовали поведение крысы в открытом поле и в камере-актографе. Эти показатели состояния центральной нервной системы не обнаруживали каких-либо отклонений от нормы.

В этих условиях под легким эфирHblM наркозом в стереотаксическом аппарате через вживленные канюли вводили гамма-глобулины, содержащие антитела к дофамину, из расчета

200 мкг в объеме 5 мкл в каждое хвостатое ядро.

После выхода из наркоза крысу помещали в камеру-актограф. Электрокаудатограмму и поведенческую активность регистрировали непрерывно

1 в течение 8 ч. в первые сутки и в течение 3 ч. на вторые сутки.

Через 5 мин. после внутрикаудатного введения антител к дофамину на электрокаудатограмме возникали одиночные и групповые высокоамплитудные (до 700 мкВ) колебания.. Начиная с 10-й минуты регистрировали периоды высокоамплитудной активности продолжительностью 27 — 66 мин. с преобладанием колебаний тетаподобного;". диапазона с амплитудой до 600-700 мкВ.

Мощность разряда дости -ала 1440 мкВ/с..

Начиная с 12-й минуты после введения антител к дофамину наблюдали олигокинезию с периодами "застывания". Через 17 мин развивалась устойчивая акинезия, отдельные периоды которой достигали 2ч 40 мин.

Через 21 мин после введения антител возникал среднеамплитудный тремор головы и развивалась ригидность.

Периоды высокоамплитудной активности и приступообразный тремор головы регистрировали на протяжении

22 ч,30 мин.

Применение предлагаемого способа позволяет повысить точность модели- рования паркинсонического синдрома по сравнению с известным за счет приближения модели.,к течению естесвенной патологии за счет воздействия на дофаминергические структуры хвостатых ядер.

Формула изобретения

Способ моделирования паркинсонического синдрома путем создания у животного недостаточности дофаминергической системы хвостатых ядер, отличающийся тем, что с целью повышения точности способа за счет приближения модели к течению естественной патологии, в хвостатые ядра мозга вводят 200 мкг гамма-глобулина, содержащего антитела к дофамину.