Способ выявления изоферментов пероксидаз

Авторы патента:

C12N9 - Ферменты, например лигазы (6.); проферменты; композиции их (препараты для чистки зубов, содержащие ферменты A61K 7/28; лекарственные препараты, содержащие ферменты или проферменты A61K 38/43; составы моющих средств, содержащих ферменты C11D); способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов (приготовление солода C12C 1/00)

Изобретение относится к области биохимии. Целью изобретения является повышение специфичности способа выявления изоферментов пероксидаз. Для этого после электрофоретического разделения изоферментов в полиакриламидном геле зоны изоферментов выявляют путем инкубирования геля в растворе, содержащем, мас.%: гваякол 0,1-0,3, этанол 15-30 и 0,01-0,05 М ацетатный буфер PH 5,0 остальное, с последующим добавлением 1,5-3,0%-ного раствора перекиси водорода.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5))$ С 12 N 9/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 3684794/23-63 (22) 03 ° 01.84 (46) 07.06.90. Бюл, ¹ 21 (71) Институт ботаники АН КазССР (72) И.Б. Беклемишев и В.И. Романюта (53) 543,866 (088.8) (56) Н.А. Stafford et al. Ontogeny

and hormonal control of polyphenoloxidase isozymes in tobacco pith.

Plant Physiology. 1970, v. 46, ¹ 6. (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ИЗОФЕРМЕНТОВ

ПЕР ОКСИДАЗ

Изобретение относится к биохимии, в частности к энзимологии, и может быть использовано при выявлении пероксидазы и ее изоферментов.

Целью изобретения является повьппение специфичности способа выявления е изоферментов пероксидаз.

Способ реализуется следующим образом.

После электрофоретического разделения изоферментов в полиакриламидном геле зоны изоферментов выявляют путем обработки геля раствором, содержащим, мас,X: гваякол О, 1-0,.3; этанол 15-30;

0,01-0,05 M ацетатный буфер рН 5,0, остальное, и в момент контакта раствора с полиакриламидным гелем в среду добавляют сульфид натрия до конечной концентрации 0,005 вЂ” 0,030%, а затем добавляют 1,5-3,0Х-ный раствор перекиси водорода, Пример. Анализируемые образцы наносят на поверхность полиакрил,амидного геля по 35икл на трубку.

„.Я0„„1569333 А 1

2 (57) Изобретение относится к области биохимии. Целью изобретения является повышение специфичности способа выявления изоферментов пероксидаз. Для этого после электрофоретического раз деления изоферментов в полиакриламидном геле зоны изоферментов выявляют путем инкубирования геля в растворе, содержащем, мас ° %: гваякол О, 1-0,3, этанол 15-30 и 0,01-0,05 М ацетатный буфер рН 5,0, остальное, с последующим добавлением 1,5-3,0Х раствора перекиси водорода.

Обычным путем проводят диск-электрофорез в щелочной системе, при этом используют неоднородную (прерывистую) С разделяющую систему для концентрирования разделяемых веществ в узкой стартовой зоне.

ФиВ

В процессе проведения электрофоре- СЛ за готовят раствор, содержащий, мас.Х: 1 ф гваякол 0,2, этанол 20, 0,01 M ацетатный буфер рН 5,0 остальное. От- фр дельно готовят 3%-ный раствор перекиси водорода и 0,010Х-ный раствор сульфида натрия. Все растворы должны быть холодными. Предварительно готовят сухие пробирки, которые перед окончанием электрофореза заполняют раствором гваякола и этанола в ацетатном буфере, а затем добавляют раствор сульфида натрия до конечной его 3 концентрации 0,01Х. Полиакриламидные гели вынимают из электрофоретических трубок, инкубируют в пробирках

30 мин, а затем добавляют 3%-ный раствор перекиси водорода

1569333 растворе, содержащем гваякол и бу. фер, и последующее добавление перекиси водорода, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения специфичности способа, раствор дополнительно содержит этанол, в качестве буфера используют 0,01-0,05 М ацетатный буфер рН 5,0, компоненты берут в следующем соотношении,мас,X:

Гваякол 0,1-0,3

Этанол 15-30

0,01-0,05 М ацетатный буфер рН 5,0 Остальное перед инкубацией в раствор добавляют сульфид натрия до конечной концентрации 0,005-0,030Ж, а перекись водорода используют в 1,5-3,0Х-ной концентра20

Рисунки гелей после проявления их на пероксидазную активность в среде едлагаемого состава выявляют зоны и оферментов пероксидазы, совпадаю5 щие по локализации при анализе перок-i сидаз, а также в смеси их с белками и другими гелесодержащнми ферментами (Гемоглобин и каталаза).

Предлагаемый способ позволяет спе- 10 цйфически выявить изоферменч ный состав пероксидаз.

Формула из обретения

Способ выявления изоферментов п6роксидаз, включающий электрофоретЦческое разделение в полиакриламидном геле и определение зон локализацйи фермента путем инкубации геля в

Составитель И, Стояченко

Редактор Н. Гунько Техред Л.Сердюкова Корректор Э . Лончакова

Заказ 1425 Тираж 480 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101

Способ выявления изоферментов пероксидаз

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ получения активатора протеина С из яда щитомордника, способного к превращению протеина С плазмы крови в активную форму, протеин CA

Способ получения ферментсодержащих пленок для определения моноаминов // 1564187

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к получению ферментсодержащих препаратов для химического, клинического и токсикологического анализа

Способ выделения цитохрома с из дрожжей // 1563698

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к микробиологическим способам получения цитохрома С

Способ получения ферментов // 1555362

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к получению биологически активных веществ непрерывным способом и может быть использовано в микробиологической и медицинской отраслях промышленности

Способ получения целлобиаз // 1554379

Способ очистки щелочной фосфатазы // 1554377

Изобретение относится к биохимии, а именно к способам очистки щелочной фосфатазы тонкого кишечника тюленя

Способ получения карбоксипептидазы а и карбоксипептидазы в из поджелудочной железы свиньи // 1551742

Изобретение относится к способу комплексного получения ферментов из животного сырья, а именно карбоксипептидазы А и карбоксипептидазы В, применяемых в биохимии для структурных исследований

Способ выделения формиатдегидрогеназы // 1551741

Изобретение относится к биотехнологии и касается способа выделения и очистки МАД - зависимой формиатдегидрогеназы (КФ 1.2.1.2)

Штамм микроскопического гриба aspergillus теrrеus - продуцент фосфопротеин фосфатазы // 1551732

Изобретение относится к ферментной отрасли биотехнологии и может быть использован для получения фермента фосфопротеин фосфатазы, применяемого в пищевой промышленности и как полуфабрикат в клинической и экспериментальной медицине и фармакологической промышленности, а также препаративной биохимии

Способ получения комплекса литических ферментов // 1549227

Изобретение относится к микробиологической и медицинской отраслям промышленности, а именно к получению ферментного комплекса, лизирующего грамположительные микроорганизмы, в частности патогенные множественно устойчивые к антибиотикам стафилококки, гемолитические стрептококки группы А, радиоустойчивые микрококки и лонингококки

Способ выделения и очистки ферментного комплекса из культивируемых растительных клеток // 2102478

Последовательность днк, белок и способ получения белка // 2103364

Изобретение относится к цефалоспоринацетилгидролазному гену, белку, содержащему аминокислотную последовательность, кодируемую указанным геном и представляющему собой мультимер, предпочтительно тетрамер или октамер, а также к методу получения указанного белка

Полипептид, обладающий уратоксидазной активностью, фрагмент днк, обеспечивающий экспрессию полипептида с уратоксидазной активностью (варианты), вектор экспрессии, содержащий фрагмент днк, обеспечивающий экспрессию полипептида с уратоксидазной активностью (варианты), штамм, экспрессирующий полипептид, обладающий уратоксидазной активностью (варианты), способ получения полипептида, обладающего уратоксидазной активностью // 2105812

Фрагмент днк, кодирующий полипептид к2р со свойствами активатора плазминогена, полипептид к2р со свойствами активатора плазминогена, рекомбинантная плазмидная днк ра27.3, кодирующая полипептид к2р со свойствами активатора плазминогена и фармацевтическая композиция, обладающая фибринолитической активностью // 2107094

Рекомбинантный тканевой активатор плазминогена и способ его получения // 2107727

Изобретение относится к получению тканевого активатора плазминогена (усовершенствованный АПТ), имеющего пролонгированный биологический полупериод существования, повышенную устойчивость к воздействию тепла и кислот и эффективный в качестве ингибитора воспаления вокруг сайта, где образован тромб

Негликозилированный полипептид со свойствами проурокиназы, способ его получения, рекомбинантная плазмидная днк для экспрессии полипептида и способ ее получения // 2108387

Изобретение относится к биотехнологии и позволяет получить полипептиды, используемые в качестве плазминогенных активаторов, имеющие высокую удельную амидолитическую и фибринолитическую активность

Способ получения биомассы // 2111253

Способ получения коллагеназы // 2112036

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к препаративной биохимии, и может быть использовано в клеточной биологии, медицинской практике для лечения ожогов, остеомиелитов, пролежней и удаления рубцов коллагена в косметических целях, косметической и парфюмерной промышленности при изготовлении кремов и мазей для омолаживания кожи, в пищевой промышленности для обработки мяса с целью улучшения его качества и питательных свойств, кожевенно-меховом производстве для получения эластичных, тонких и прочных материалов, а также в научно-исследовательской работе для изучения микроструктуры коллагена, при работе с клеточными структурами, а также с различными тканями и органами для индивидуальных интактных клеток

Способ получения белкового гидролизата из мясного и мясокостного сырья убойных животных // 2112397

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способам получения белковых гидролизатов из мясного, мясокостного, костного сырья убойных животных, и может быть использовано в пищевой и медицинской промышленности

Способ активации комплекса протеолитических ферментов поджелудочной железы убойных животных // 2112801

Изобретение относится к биотехнологии и предназначено для получения белковых гидролизатов