Вакцина против сальмонеллеза свиней, способ ее изготовления и способ профилактики сальмонеллеза свиней

 

Изобретение относится к ветеринарной биотехнологии. Целью изобретения является упрощение способа получения противосальмонеллезной вакцины, повышение ее иммуногенной активности и эффективности профилактики сальмонеллеза свиней. Изобретение включает способ изготовления вакцины на основе супрессорного ревертанта стрептомицинзависимого мутанта вирулентного штамма Salmonella choleraesuis ВГНКИ N 9 с содержанием 40 60 млрд. живых клеток в 1 см³ 5,4 7,6% сахарозы, 1,0 1,5% желатина, дистиллированной воды до 100% а также пероральный способ профилактики сальмонеллеза свиней указанной вакциной, которую применяют трехкратно поросятам возраста 10 11, 15 17 и 20 24 дня в дозах соответственно 4 4,2; 6 8 и 8 10 млрд. м. к. 4 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к средствам специфической профилактики сальмонеллеза свиней. Целью изобретения является повышение иммуногенной активности вакцины. Для изготовления вакцины используют ревертантный штамм S.choleraesuis ВГНКИ N 18 с искусственно сниженной вирулентностью. Штам характеризуется следующими свойствами. Морфологические признаки. Мелкие грамотрицательные палочки без спор и капсул. Длина палочек 1-1,5 мк, ширина 0,1-0,3 мк. Клетки подвижные с перетрихиально расположенными жгутиками. Культуральные свойства. На мясопептонном бульоне образует равномерное помутнение через 6-8 ч роста при температуре 37^оС; на мясопептонном агаре через 22-24 ч роста при температуре 37^оС образует колонии диаметром 0,8-1,2 мм в S-форме: прозрачные, круглые, гладкие, мелкозернистые, выпуклые. Ферментативные свойства. Сбраживает с образование кислоты и газа глюкозу, мальтозу, маннит, сорбит, ксилозу, образует сероводород; не сбраживает сахарозу, лактозу, арабинозу, раффинозу, не свертывает молоко, не разжижает желатину, не образует индол. Антигенная структура. Агглютинируется сальмонеллезными монорецепторными "0" сыворотками (6, 7) и "Н" сыворотками ("С" и 1, 2, 5, 6). Остаточная вирулентность аттенуированного штамма, выраженная в ЛД₅₀ при подкожном заражении белых мышей массой 14-16 г, составляет 1,2 х 10⁷ ± 0,1х10⁷ клеток. Иммунногенность сохранность животных, иммунизированных штаммом, составила 80-90% П р и м е р 1. Изготовление вакцины против сальмонеллеза свиней из супрессорного ревертанта S.choleraesuis N 9 серии 2. В реактор с питательной средой (мясопептонный бульон Хоттингера, 300 л) вносят в матровую расплодку микробные клетки штамма из расчета 35 млн на 1 см³ бульона. Культивирование проводят при 37 ± 0,5^оС в течение 13 ч. Накопление микробных клеток составило 40 млрд/см³ бульона. После центрифугирования при 15 тыс об/мин в течение 60 мин бактериальную массу штамма смешивают с желатиносахарозным стабилизатором в соотношении 1:2 и получают 6,5 л вакцины с содержанием микробных клеток 120 млрд/см³. После расфасовки по 4 см³ и лиофилизации получают вакцину в количестве 1545 ампул, содержащих 154,500 тыс доз вакцины следующего состава, Штамм S.choleraesuis N 9 (живые микробные клетки, 60 млрд/см³) 32,0 Сахароза 5,4 Желатин 1,0 Дистиллированная вода Остальное П р и м е р 2. Оптимальные иммунизирующие дозы вакцины из штамма S.choleraesuis N 9 устанавливают путем титрования на поросятах различного возраста. Животных иммунизируют перорально различными дозами по схемам, приведенным в табл.1, заражают внутрибрюшинно через 21 день после последней вакцинации оттитрованной смертельной дозой (20-25 млрд клеток) вирулентного штамма S. sholeraesuis N 370. Наибольшую сохранность животных, составляющую 80-90% отмечают при трехкратном введении поросятам 10-11-, 15-17- и 20-24-дневного возраста суммарной дозы 18 млрд клеток (4 + 6 + 8 млрд). П р и м е р 3. Безвредность предложенной вакцины по величине переносимой дозы изучена на белых мышах, морских свинках и поросятах. Данные опытов суммированы в табл.2. Из данных, представленных в табл.2, видно, что переносимая доза вакцины, не вызывающая гибели мышей, в 5 х 10⁵ и 1,0 х х 10⁵ раз ниже минимальной смертельной дозы вирулентного штамма S. choleraesuis N 370 соответственно при подкожном и пероральном заражении. Способ профилактики сальмонеллеза свиней включает трехкратное пероральное введение вакцины поросятам в возрасте 10-11, 15-17 и 20-24 дня в дозах соответственно 4,0-4,2; 6,0-8,0 и 8,0-10,0 млрд микробных клеток. П р и м е р 4. Проведено испытание предложенного способа профилактики сальмонеллеза свиней с использованием вакцины из штамма S.choleraesuis N 9 и S.сholeraesuis TS-177. Результаты опыта представлены в табл.3. Из данных табл.3 видно, что заболеваемость поросят, иммунизированных по предложенному способу вакциной из штамма S.choleraesuis N 9, на 4,1% ниже, а сохранность на 8,2% выше по сравнению с аналогичными показателями для поросят, иммунизированных вакциной из штамма TS-177. Средний вес поросят при передаче на откорм и среднесуточные привесы также выше соответственно на 2,4 кг и 23 г. П р и м е р 5. Проведено испытание предложенного способа профилактики сальмонеллеза свиней с использованием вакцин из штамма S.choleraesuis N 9 м S.choleraesuis TS-177. Из данных, представленных в табл.4, следует, что заболеваемость поросят, иммунизированных по предложенному способу вакциной из штамма S.choleraesuis N 9, на 21% ниже, а сохранность на 8,4% выше по сравнению с теми же показателями для группы поросят, иммунизированных вакциной из штамма ТS-177.

Формула изобретения

1. Вакцина против сальмонеллеза свиней, содержащая бактериальную массу аттенуированного штамма сальмонелл и стабилизатор, отличающаяся тем, что, с целью повышения иммуногенной активности и безвредности, в качестве штамма вакцина содержит штамм Salmonella choleraesuis ВГНКИ N 9 с концентрацией живых микробных клеток 40 60 млрд в 1 см³, а в качестве стабилизатора - раствор сахарозы и желатины в дистиллированной воде при следующем соотношении компонентов, Штамм S. choleraesuis ВГНКИ N 9 (40 60 млрд микробных клеток в 1 см³) 24 32 Сахароза 5,4 7,6 Желатин 1,0 1,5
Дистиллированная вода Остальное
2. Способ изготовления вакцины против сальмонеллеза свиней, включающий подготовку посевного материала, выращивание аттенуированного штамма сальмонелл в питательной среде, концентрирование суспензии с последующим смешиванием со стабилизатором, расфасовкой и лиофилизацией препарата, отличающийся тем, что, с целью повышения иммуногенной активности целевого продукта, в качестве штамма используют штамм S. choleraesuis ВГНКИ N 9 в посевной дозе 30 35 млн микробных клеток на 1 см³, выращивание проводят в течение 12 14 ч, концентрирование осуществляют путем центрифугирования при 10 15 тыс об/мин в течение 60 90 мин, концентрат суспензии с концентрацией 40 60 млрд микробных клеток в 1 см³ смешивают с желатиносахарным стабилизатором в соотношении 1 2 1 3. 3. Способ профилактики сальмонеллеза свиней, включающий введение поросятам вакцинного препарата на основе аттенуированного штамма сальмонелл, отличающийся тем, что, с целью повышения защитного эффекта вакцинации, используют препарат на основе штамма S. choleraesuis ВГНКИ N 9, введение осуществляют трехкратно поросятам 10 11-, 15 17- и 20 24-дневного возраста в дозах 4 4,2; 6 8 и 8 10 млрд микробных клеток.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3