Способ исследования структуры биологических объектов, излучающих свет
Изобретение относится к оптическим методам, конкретно - к способу исследования структуры биологических объектов, излучающих свет. Цель - определение местоположения области локализации свечения. Исследуемый объект приводят в оптический контакт с преломляющим элементом. Регистрируют угловое распределение интенсивности свечения объекта в преломляющем элементе. По угловому распределению рассчитывают расстояние от клеточной стенки до области локализации свечения. 1 ил.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (19) (11) (51) 5 G 01 N 21/64
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н A ВТОРСКОМУ СВИД.:ТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (21) 4437527j31-25 (22) 06.06.88 (46) 30.08.90. Бюл. К - 32 (71) Институт биофизики СО АН СССР и Красноярский государственный университет (72) O,А.Кудрявцева, В.А.Охонин и С,И.Барцев (53) 543.42.065 (088.8) (56) Харрик Н. Спектроскопия внутреННего отражения. М.: Мир., 1970, с, 35, Скворцов Г.Е. и др.. Микроскопы.
Л,: Машиностроение, 1969, с. 25, Изобретение относится к оптическим методам исследования биологических объектов и может быть использован в цитологии.
Цель изобретения — определение местоположения, области локализации свечения.
На чертеже показано угловое распределение бактериального свечения в оптическом преломляющем элементе.
Исследование направления распространения преломленной волны позволяет оценить характерное расстояние от границы раздела сред до области локализации свечения в слое. .Пля оценки расстояния используют принцип взаимности или обратимости световых лучей.
2 (S4) СПОСОБ ИССЛЕДОВАНИЯ СТРУКТУРЫ
БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ,ИЗЛУЧА10ЩИХ
СВЕТ (57) Изобретение относится к оп-,ическим методам, конкретно — к способу исследования структуры биологических объектов, излучающих свет. Цель изобретения — определение местоположения области локализации свечения. Исследуемый объект приводят в оптический контакт с преломляющим элементом.
Регистрируют угловое распределение интенсивности свечения объекта в пре— ломляющем элементе. По угловому распределению рассчитывают расстояние . от клеточной стенки до области локализации свечения. 1 ил.
При исследовании светящихся бакте,рий возможна локализация источников @вам бактериальной люминесценции в пери- ЯД плазматическом пространстве, заполнен-- яо ном жидкостью, с оптической плот- ц р ностью физиологического раствора, показатель преломления которого n = @ — l,33.
С .
Способ осуществляют при помощи оптического рефрактометра, содержащего преломляющий оптический элемент в виде полуцилиндра, который покрыт,фЬ непроницаемым экраном. В центральной части верхней грани оптического элемента на экране имеется окно, в которое помещают исследуемые клетки бактерий. Клетки фиксируют IIpH ITotfo ши покровного стекла и винта, Элемент
1 589155 крепится держателем. Регистрацию свечения производят под различными углами возле нижней круглой поверхности преломляющего элемента через свето5 вод на микрофотометрической установке
В рефрактометре используют оптический элемент из стекла ТФ-5 с показателем преломления п = 1,76.
Пример. Определение области .гьокализации люминесцентной системы в светящихся бактериях РЬо1 оЬас ег1шп
Te:ogtI;.гЬ1.. Длина волны максимума све чения данного вида бактерий равна
Ф,, = i!75 нм,.
Бактерии выращивают на ско"я:ином аГаре в течение нескольких часов при комнатной температуре. Суспензию бактерил„отмьньгх 3%-ным раствором NaCT наносят пипеткой через окно на преламляющий элемент. Для обеспечения оптического контакта межцу исследуемЫми клетками бакгерий и преломляюшим элементом и,цля поддержания метаболизма клетки (работы люминесцент- gg пой системы),, сверху бактерии покрывают твердым слоем агара, а затем фнксируют при помощи покровного стекла и винта. Измерение интенсивности свечения производят возле нижней ЗО
:,фуглой поверхности преломляющего элемента в диапазоне углов от 35 до 55
Значение Т(Ц ) согласнс графику
T(q) при y == 50 pa I!о T(q,) 0)23.
Интенсивности свечения Т(ф
1 — Т(() =. 0,08 соответствует угол
С(55
lTo оси .ординат отложены относи- 4О тельные значения интенсивности све,ения, которые рассчитывались по формуле
AIL+ К. где T — значение интенсивности при
1 определенном уг.пе регистра - ции;; .
1, . - максималь !пе значение интенсивности р д:II .Hoì диапазоне углов;
Х .дО, " фо -!OBoe свечеHHp.
Предельный угол при -реломлении
eçeòÿ на границе раздела сред с по
