Способ индукции чешуй лилий к луковичкообразованию
Изобретение относится к биотехнологии , а именно к микроклональному размножению растений, в частности к размножению лилий луковицами, полученными из чешуи. Целью изобретения является повышение коэффициента размножения лилий при сокращении времени их получения. Способ состоит в том, что отделенные чешуи луковиц замачивают на 8-12 ч в цитокининовом препарате Микроцит (5-15 мл/л) и последующее получение дочерних луковичек осуществляют при.23-27°С. 3 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (SI)S А 01 Н 4/00
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ
Н ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
IlO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (21) 4655720/13 (22) 27.02.89 (46) 28.02.91. Бюл. 1 - 8 (7t) Латвийский государ"твенный университет им.П.Стучки и Институт микробиологии им.А.Кирхенштейна
AH ЛатвССР (72) Д.X Гертнере, А.К.Зоргевиц, М.Я.Карклинь, И.В.Мишке и M.Ê.Òåâåëåâà (53) 578.085.23 (088.8) (56) Иванова Н.В. Влияние регуляторов роста на размножение лилий.
Бюлл. ГБС АН СССР, 1983, вып.127, с.64-62.
Изобретение относится к биотехно-; логии, а именно. к клональному размножению растений луковицами, в частности чешуями луковиц.
Цель изобретения — повышение коэффициента размножения лилий при сокращении времени их получени.".
Способ состоит в том, что отделен ные от материнской луковицы чешуи выдерживаются в цитокининовом препарате Микроцит в концентрации от 5 до
15 мп/л. Микроцит в отличие от синтетических цитокининов (бензиламинопурин или bAII) стимулирует индукцию и рост луковичек и его стимулирующее| действие выше по сравнению с некоторыми препаратами из группы,ауксинов (НУК) .
Для получения препарата Микроцит ведут культивирование эпифитной бак» терии Pseudomonas stutzeri 136 в те„„Я0„„163О710
2 (54) СПОСОБ ИНДУКЦИИ ЧЕИУЙ ЛИЛИЙ
К ЛУКОВИЧКООБРАЗОВАНИЮ (57) Изобретение относится к биотехнологии, а именно к микроклональному . размножению растений, в частности к размножению лилий луковицами, полученными из чешуй. Целью изобретения является -повышение коэффициента размножения лилий при сокращении времени их получения. Способ состоит в том, что отделенные чешуи луковиц замачивают на 8-12 ч в цитокининовом препарате Микроцит (5-15 мл/л) и последующее получение дочерних луковичек осуществляют при .23-27 0. 3 табл. чение 24 ч в 250 мл колбах при соотношении инокулянт:среда = 0,08 сухих клеток на 1 л питательной среды, на качалках 220 об/мин при 28 С. Через, 24 ч культуральную жидкость отфильтровывают и концентрируют на роторном вакуумном испарителе в 10 раз.
Затем стерилизуют при 0 5 атм в течение 10-15 мин. Препарат Микроцит содержит пуриновые вещества с цитокининовой активностью, витамины, органические кислоты, индолилуксусную кислоту, образующиеся как продукты жизнедеятельности эпи@итной бактерии.
Пример 1. Лабораторный опыт.
От выкопанных в сентябре луковиц лилий отделяют по 5-10 наружных чешуй от каждой луковицы. Чешуи выдерживаются в течение 8-12 ч в водных растворах препарата Микроцит от 4 до
16 мл/л. После обработки чешуи по1630710
Таблица
Образование луковичек на чешуях разных сортов лилий после обработки в течение 10 ч
0 регуляторами роста и выдеркивания при температуре 25 С в течение 5 недель
Вариант обработки
Обработка
L.regaie
"Dzelme"
Общая числ,, Индуц. чеш., й
Число луковичек щая Индуц. сл. чеш., шу,шт.
Всего, шт.
На l чеш., шт. чеш. „ шт.
60 82 БО 82
60 66
60 80
60 80
60 82
60 80
60 75
50 80
50 82
50 74
50 80.
50 80.
50 100
50 93
50 90
НУК 25 мг/л
Вода
ВАЛ 10 иг/л
Иикроцит 4. мп/л
Иикроцит 5 ил/л .
Никроцит 10 ип/л
Иикроцит 15 ил/л
Иикроцит 16 ил/л
113 1,89+0,32.2 1,20+0,20.
59 0,98+0,08
78 1,30+0,09
99 1,65 0,21!
3& 2,2т+О, 13
118 1,9600,09
84 1,40+0,10
157 !
82
106 !
37 !
89
l63
ll6
Известная
Контроль, Предлагаемая
Продолжение табл.
"Ьае1ше" :
Вариант обработки
"Dzintars"
Обработка
Число луковичек
К Общая Индуц. числ. чеш., чеш., - Ж шт ° . 141 80 80
100 80, 69
Число луковичек
Всего, На l чеш., шт. шт.
Всего, Иа чеш., шт. mT °
92 1,84+0, 14
65. 1,30+0,09
Известная НУК 25 мг/л
Контроль Вода
86 1,07+0,09 !47
58 0,72+0, 12 100 мещают в полиэтиленовые мешки са сфагновым мхом (антисептик) и выдерживают в термостате при температуре
22-28 С, где в течение 7 недель и!! о дуцируется образование дочерних луко-. вичек.
Пример 2. Полевой опыт. Аналогично лабораторному опыту отделен. ные и обработанные чешуи лилий вы-, 10 саживают в ящики, наполненные на 2/3
: высоты нейтрализованным и обогащен, ным минеральными элементами торфом
;и покрытым слоем перлита . Чешуи высаживают в перлитный слой, углубляя 15 на 2/3 их высоты. Ящики помещают в теплице при 18-20 С на 8 недель, посо ле чего выставляют на зимовку в пар-. ник. Результаты оценивают в мае, Результаты опытов по примерам 20 представлены в табл. 1-3.
Таким образом, настоящий способ обработки чешуй лилий препаратом
Микроцит в концентрации от S до 15 мл/л в течение 8-12 ч с последующим выдерживанием их при температуре .
23-27 С сроком до 5 недель увеличива-. о ет число образовавшихся луковичек °
Их число выше контроля (вода) от 37 до 89% в зависимости от сорта и вьппе 30 ранее известной обработки (НУК) от
11 до 48%. Коэффициент размножения после обработки Микроцитом от 137 до 184%, Особенно чувствите!!ьными в обработке являются трудно размножаемые лилии из группы трубчатых лилий (L.regale, "Dzelme"), число луковичек вьппе контроля на 89%, коэффициент размножения — 189%.
Предлагаемая обработка увеличивает число индуцированной чеш3и от
82 до 100% от всей чешуи, используемой в эксперименте. В контроле (вода) луковицы образуют от 69 до 82%, после обработки НУК вЂ” от 80 до 82% всех чешуй.
Формула изобретения
Способ индукции чешуй лилий к лу.— ковичкообразованию, включающий отделение чешуй, обработку их фитогормонами и помещение на субстрат с последующим получением дочерних.луковичек, отличающийся тем, что, с целью повышения коэффициента размножения лилий при сокращении времени их получения, обработку чешуй после их отделения проводят путем их замачивания на 8-12 ч в водном растворе,,содержащем 5-15 мл/л цитокининового препарата Микроцит, и последующее получение луковичек осуществляют при 23-?7 С.!
630710
Продолжение табл, Обработка
"Dzintars"
"Dze1me"
Вариант обработки
Число луковнчек
Инцуц. чеш., Число луковичек
Общая числ. чеш., шт.
Всего, На 1 чеш,, шт. шт.
На 1 чеш»
mr, Всего, шт.
ВАП 10 мг/л 61
Иикроцит 4 мй/л 70
Иикроцнт 5 мп/л 100
ПредлагаемаяИикроцнт 10 мп/л 123
Иикроцит 15 мп/л !10
Иикроцит t6 мп/л 65
80 90 86
80 91 6t
80 90 36
80 95 87
80 92 85
80 90 59 число луковичек íà 1 чеш. в orrr,rve
>100Е число луковичек на 1, чеш. в контроле
44
К - коз>1)фициент разинонення .
Таблица 2
Образование луковнчек на чешуях разных сортов лнянй в полевом олнте
Г Dze lare"
Обрабатнл
L.геВа1е
Вариант обработки
Число луко- К
Число луковнчск на
t чеш., шт.
Число луковнчек на
1 чеш, шт. г->чек на
1 чеш» шт.
1,42о,09
1,36+0,!О
1,35+0,08
1>60 0>10 .1,60+0,! 1
1,7!+О,!2
f,46+0>09
1,20+0,!8
М» Известная ,Контроль
1 ,;Предлагаемая
Табчнца 3
Влияние ллителъиост» обработки Иикроцнтом на 10 мл/л, температУры и срока янлук>Фн на число луковичек сорта "вае1тен °
Длительность обработки 1нндукция лрн 23 c), ч
Температура во время индукннн (обработка !0 ч), С срок ннлукняи, неА
7 8 f0!
2 !3
Число луковнчак на чешу>а, вт
1,!зло>!О !>!4+0,09 1,28+0>!4 1,20+0 ° 13 f,f820,IÎ 7,!020,fO r,!4+0 ° 09 1,28iO,!4 f>raa0,09 i>00+0>!0
2,30+0>09 2,39+0,20 2>46ао>!8 2,3020>09 2,00+0>20 2,30+0,!4 2,3220,!4 2>46+0,fs 2>30+0,08 2>0020>09
2,. 40+0,09 2,4020,!5 2,47ь0,20 2,2920>!f 2,20 0,09 2 ° 20+0,09 2,32+0,>8 2,4730,20 2,32+б,!4 2,32то f0" а
Составитель В.Демкин редактор С>Лисина Техред Я.Моргентал Корректор Л.Пилипенко
,Заказ 505 Тираж 352 Подписное ! ВНИИХИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб, д. 4/5 и
Производственно-издательский комбинат Патент, г. Ужгород, ул. Га ар
ri л Гага ина 101
НУК 25 ит/л
Вода
БАП:10 мг/л
Инкроцнт 4 мл/л
Инкроцнт 5 мл/л
Иикроцнт !О мп/л
Инкроцнт t5 нн/л
Инкроцнт 16 мл/л
1,23ЧО, 11
f 40+0, 11
2,00+0,09
2,46+0, 18
2,38+0, 09
1,3120, 10
106
154
189
183
102
103
1ÎO
99
1!8
118
126
107
1, 80209 12
1,78+0,09
2>0+0>2f
t 80+),!!
t>8220>!3
2,54+0,12
1,784.0 !4
t,50+Î,09
10!
tt2
10!
t02 !
43
1,07+0,08
0,76+3, 10
1,67+0>08
1,19+0 10
1,06 0 09
0,74+0,09
,35+0, 18
1,28 0,09
1, 13+0,!4
t>20+0 ° f0
1, 20+0 14
1,67+0,О9
1,43+0,12
1,20+0,09
147 1 07
147
147
104
105 .100
88
94
94
130 !
12
