Способ определения локализации ионов кальция в нервных клетках

 

Изобретение относится к области медицины, в частности к фтизиатрии, и может быть использовано для определения наличия или отсутствия распада тьани в нервных клетках. Целью изобретения является повышение точности способа за счет учета функциональной активности клеток. С этой целью проводят замораживание ткани жидким азотом, обезвоживание в ацетоне, охлажденном твердой углекислотой, пропитывают под вакуумом , окрашивают 2%-ным раствором калия и определяют локализацию ионов кальция по выпадению электронно-плотного осадка. При этом до момента замораживания ткани определяют биоэлектрическую активность клеток, а локализацию ионов кальция устанавливают в точках наибольшей биоэлектрической е активности. tf

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ активности.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

llQ ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4182293/14 (22) 19.01.87 (46} 28.02.91. Бюл. У 8 (71) Институт физиологии им. И.П.Павлова (72) В. Ф.Машанский, И.С.Базанова, Н.В.Березина и С.А.Евдокимов (53) 616-0,89 ° 9(088.8) (56) Машанский В. Ф., Базанова И.С. и др. Архив анатомии, гистологии и эмбриологии, 1982, т.82, в.3, с.36. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛОКАЛИЗАЦИИ

ИОНОВ КАЛЬЦИЯ В НЕРВНЫХ КЛЕТКАХ (57) Изобретение относится к области ,медицины,в частностик фтизиатрии,и может быть использовано для определения

Изобретение относится к медицине, а именно к цитохимическим методам исследования.

Цель изобретения — повышение точности способа за счет учета функциональной активности клеток.

Способ осуществляют следующим образом.

Изолированный нервный ганглий помещают в физиологический раствор. В область нейрона Ретциуса вводят электрод, регистрирующий спонтанно возникающие потенциалы действия. На этом фоне, не прерывая записи биоэлектрической активности, производят фиксацию нейрона, с помощью прикосновения охлажденйЬго жидким азотом до — 190 С о (1) G 01 N 1/28, А 61 В 10/00 наличия или отсутствия распада ткани в нервных клетках. Целью изобретения является повышение точности способа за счет учета функциональной активности клеток. С этой целью проводят замораживание ткани жидким азотом, обезвоживание в ацетоне, охлажденном твердой углекислотой, пропитывают под вакуумом, окрашивают 2%-ным раствором калия и определяют локализацию ионов кальция по выпадению электронно-плотного осадка. При этом до момента замораживания ткани определяют биоэлектрическую активность клеток, а локализацию ионов кальция устанавливают в точках наибольшей биоэлектрической бруска. Момент соприкосновения отражается на осциллограмме резким смещени-.. ем луча, что маркирует момент фиксации.

Далее ганглий замораживают и готовят срезы на ультрамикротоме. Срезы окрашивают 2Х.-ным раствором пироантимоната калия. На срезах выпадение осадка определяют в клетках с наибольшей биоэлектрической активностью.

Одновременная фиксация позволяет точно определить, в какой биоэлектрической активности находилась клетка, что дает возможность получать достоверные результаты о динамике распределения кальция в период работы нерв1631347

Составитель Л,Стебаева

Техред Л.Сердюкова Корректор M.Ìàêñèìèøèíåö

Редактор И.Касарда

Заказ 537 Тираж 392 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 ной клетки,в разные фазы потенциала действия, П р е р. Нервный ганглий, помещенный в физиологический раствор и подключенный к электроду, фиксирует в момент замораживания потенциал действия. При окраске пироантимонатом калия выявлено выпадение осадка на мем.бранах эндоплазматического ретиКулума. Много осадка в гиалоплазме. В период покоя гранулы осадка лежат вдоль плазматической мембраны.

Способ позволяет точно связать локализацию кальция в клетке с ее физи- 15 ологическим состоянием.

Формула изобретения

Спосбб определения локализации ионов кальция в нервных клетках путем замораживания ткани жидким азотом, f обезвоживания в ацетоне, охлажденном твердой углекислотой, пропитывания в смолах под вакуумом и окрашивания клеток 2 -ным раствором пироантимоната калия с последующим определением локализации ионов кальция по выпадению элЕктронно-плотного осадка, о тл н ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет учета функциональной .активности клеток, до момента замораживания ткани определяют биоэлектрическую активность клеток, а локализацию ионов . кальция устанавливают в точках наибольшей биоэлектрической активности.