Способ диагностики тимомегалии у детей

 

Изобретение относится к практической медицине, в частности к клиническои иммунологии и педиатрии, может найти применение в практическом зравоохранении при обследовании детей с подозрением на наличие гиперплазии вилочковой железы и дальнейшем их лечении с применением иммуномодуляторов. Цель изобретения - упрощение способа, сокращение времени и снижение осложнений Для этого проводят иммунологическое обследование детей и при повышении абсолютного числа лимфоцитов до 6,5-8,5 , абсолютного числа Т-лимфоцитов до 2,5 4,0«1 О9/л и В-лимфоцитов до 1,2- 2,6 10 /л или дисбалансе относительного и абсолютного содержания Т- и В-лимфоцитов, заключающемся в снижении относительного числа Т-лимфоцитов до 15-30% при нормальных значениях их абсолютного числа и повышенном абсолютном числе лимфоцитов до 6,5 8,5«109/л и В-лимфоцитов до 1,2- 2, диагностируют наличие тимомегалии у детей. S to

СООЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

;„,SUÄÄ 1642395 (gg)g С 01 N,ÇÇ 53

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

К АВТОРСКОМ ь(СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 445?028/14 (22) 29. 06. 88 (46) 15.04 ° 91. Бюл, № 14. (71) Ростовский медицинский институт (72) В.В.Зотова, . С.М.Кузнецов, :Л„А,Анисимова и Л, В,Символокова (53) 615 ь 3 75 (088в 8) (56) Педиатрия, 1983, ¹ 5, . с, 10-12 (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ТИМОМЕГАЛИИ

У ДЕТЕ l (57) Изобретение относится к прак-. тической медицине, в частности к клинической иммунологии и педиатрии, может найти применение в практическом зравоохранении при обследовании детей с подозрением на наличие гиперплазии вилочковой железы и дальнейшем их Изобретение относится к практической медицине, в частности к клинической иммунологии и педиатрии, может найти применение в практическом здравоохранении при обследовании де, тей с подозрением на наличие гиперплазии вилочковой железы и дальней шем их лечении с применением иммуномодуляторов, Цель изобретения - упрощение, со» кращение времени и вероятности осложнений

Способ осуществляется следующим образом °

Дпя осуществления способа необходимо произвести подсчет общего коли» чества лейкоцитов, лимфоцитов и опре2 лечении с применением иммуномодуляторов. Цель изобретения - упрощение способа, сокращение времени и снижение осложнений, Для этого проводят иммунологическое обследование детей и при повышении абсолютного числа лимфоцитав до 6 5 8,5 109/л, абсолютногоо числа Т-лимфоцитов до 2,5

4,0 ° 1О /л и В-лимфоцитов до 1,29

2,6 1О /л или дисбалансе относительного и абсолютного содержания Т- и

В-лимфоцитов, з аключающемся в сниже нии относительного числа Т-лимфоцитов до 15-30% при нормальных значениях их абсолютноro числа и повышенном абсолютном числе лимфоцитов до 6, 58,5 10 /л и В-лимфоцитов до 1,22,61109/л диагностируют наличие тимомегалии у детей, делить число Т- и В-лимфацитов в кро ви.

Ю

Определение числа Т- и В-лимфа- Cr4 цито в. СР

1 ° Забор крови Кровь получают из Qt безымянного пальца, После обработки

: этанолом палец прокалывают скарифика тором и кровь в объеме 0,2 мп самоте ком набирают в туберкулиновый шприц (смоченный предварительно раствором гепарина концентрации 200 ед/мп и высушенный при 37 С в термостате).

Кровь помещают в стеклянную центрифужную пробирку объемом 1О мп и тщательно встряхивают, :2 Выделение материала для иссле дований Количество лейкоцитов и

1642395 лимфоцитов определяют по стандартным методикам, дпя чего отбирают

0,02 мп крови, Оставшуюся крсвь пентрифугируют при 200 g в течение мин. Отслоившуюся плазму выливают, а осадок используют для выделения лейкоцитарной взвеси, 3. Пригато.зление лейкоцитарной взвеси, Лейкоцитарную взвесь полу чают путем лизиса эритроцитов гемолитическай жидкостьк следующего состава". к 0,083%-ному раствору хлористого аммония добавляют 0,04 г/л

ЭДТА. Доводят рН раствора да 7;2...

7,4 7,5%-ным раствором бикарбоната натрия, К ос авшимся поспе центрифугирования клеткам крови добавляют

5 мл гемолитической жидкости на

30 с при по егоsr ином помешивании ф 20

Ватем добавляют 5 б мл среды 199 для

: —:p екр ащения действия гемалитиче ской

:идкости на клетки„центрифугируют !

О мин при 200 g сливают надосадочную жидкость, осадок осторожно встря- 25 хивают, Добавляют 1-2 мл гемалитической жидкости на 3-5 с, затем добавляют 10 мл среды 199, центрифугируют 10 мин при 200 g, Надосадочную жидкость сливают Остатки жидкости удаляют фильтровальной бумагой„К полученному осадку клеток добавляют

0,2 мл среды 199

4. Определение числа Т- и В" лимфоцитов Определение числа Т- и

В-лимфоцитов проводят метоцом розет кообразования Реакции ставят в 96луначных планшетах для иммунологических реакций одноразового пользования.

В лунку планшета наливают 0,05 кп полученной суспензии лейкоцитов, добавляют 0,05 мл 0,5%ной суспензии эритроцитов барана для определения

Т-лимфоцитов или 0,05 мл 0,5%-ной суспензии эритрацитов мыши для определения В-лимфоцитов. Крышку на планшете закрепляют и центрифугируют при

200 g в течение 5 мин. Планшет инку бируют 30 мин при 4 С, затем в лунки

О 50 осторожно добавляют каплю 3%-нага раствора глутарового альдегида, выдерживают при комнатной температуре

5 мин, После этого надосадочную жид55 кость удаляют, а в лунки наливают по

О, 1 мп,цистиллиро ванной воды. Осадок тщательно ресуспендируют и готовят маз ки, 5, Определение абсолютного содержания роз еткообразующих клеток в мкл ко о ви, blc /hhKк — Л%

Р0 11

) Ь С/мил 100% где РО"!>biC(- абсолютное количество роз еткообразующих лимфоцитов в 1 мкл кро ви;

Т !, - абсолютное содержание лимфоцитов в

1 мкл кра ви;

РОЛ% - количество розеткообразующих лимфоцитов, i, Всего обследовано 369 детей в возрасте от четырех мес до четырех лет, Из них у 52 человек выявлены нормальные по каз атели Т- и В-лимфоцитов, абсолютные значения лимфоцитов были значительно выше нормы

Содержание лимфоцитов в крови де тей с тимомегалией приведены в таблице, Высокие абсолютные показ атели Ти В-лимфоцита в, увеличение аб солютного зн ачения лимфоцито в характеризуют их функциональную незрелость, обусловленную тимомегалией. Так, абсолютное число лимфоцитов у детей с тимомегалией увеличено до 6,58,5 10 /л, абсолютное число Т лимфоцитов цо 3,5-4,0 107 /л, а В-лимфоци тов 1,2-2,6 !07/л, Кроме того, возможно наличие дисбаланса между относительным и абсолютным числом Т-лимфоцитов, каторь и з акпючается в снижении относительного числа Т=лимфоцитов до 15-30% при нормальных значениях их абсолютного и повышенном аб солютном числе лимфоцитов до 6,58,5 101/л и В-лимфоцитав до 1,22,6 1О /л, Пр и»е р 1„Больной П,, 2 года. Реоенок rloступил в грудное отделение детской областной больницы с диагнозом: пневмония, з атяжное течение, Рентгенологически у ребенка выявлено: срединная ткань в верхней и средней трети грудной клетки рас ширена в обе стороны за счет тени вилочковой железы, КТТ=индекс 0,58, При иммунологическом обследовании выявлено: лимфоциты 8„11.109/л, Т-РОЛ 527, абс. 4,22 109/л, В-РОЛ

38%, абс. 2, 81-10 /л, Увеличение аб солютных показателей лимфоцитов, а

1642395

1О

Дети

ыэ

51,5++!,22 1,85+0,18 18,5+1,05

0,77+0,11

1,60 0 21

2, 5+0, 1!

7 64+0,26

Здоровые

С тимоме галией

3, 38+0, 2 2 1, 3+ 1, 1

45,!+2,2 т люке Т- и В-лимфоцито в спиде тельствует об их функциональной незрело сти и обусловлено тимомегалией, что нашло подтверждение при рентгеновском об следовании, Пример 2, Больной К,, 1 год 3 мес, История болезни N - 835, Поступил в кажное отделение детской больницы !! 3 с дигнозом: детская экзема.

При иммунологическом обследов-.нии боль но га выя вле на: Ли мфоци тьi

7, 94 10 /л; Т-РОЛ 52%, абс. 4 3 х х 1ОЗ/л, В-РОЛ 20%, абс» 1,59 )0 /ä.

Выявленное увеличение абсолютных показателей лимфоцитов, Т- и В-РСЛ свидетельствует о функционапьной незрело сти лимфоцито k, характерной дпя тимамегалии ., чта была подтверж"" дено при рентгенологическом исследовании {КТТ-индекс 0,45) .

При мер 3БольнайЩ

2 года, По ступил в кожное отделение детской больницы !! - 3 с диагнозом: лет ская экзема, При иммун ало гиче ском об следа вании установлено: лимфоциты 8 о 10 /л, г 9

Т-РОЛ 8%, абс„1,55" !О !/л, В;РОЛ

15%, абс 1,29 10 /л, Явный дисбаланс между относительными и абсолютными показателями Т- и В-лимфо- цитов обусловлен функциональной незрелостью лимфоцитов, выявляемой при тимомег алии. Однако при ре н тгеналагическом обследовании больного в прямой проекции тень тимуса не опрецелялась и КТТ индекс не превышал

0,38, При рентгеноло гиче ском аб сле довании в боковой проекции выявлено увеличение вилочкавой железы, Анализируя изложенные данные, можно заключить, что изменения показа1

»

ЮФ Ю ЗЭ Э»» Юф» телей иммунного статуса в виде суще ст вен на го увел ич ения rto к аз ателей

Т- и В-лимфоцитав, а также дисбаланс между относительными и аб салютными

5 показателями при увеличенном абсолютном числе лимфоцитав может служить основанием для постановки диагноза тимомегалия °

Использование предп агаемо го способа диагностики тимомегалии у детей имеет следующие преимущества: нет необходимости проводить рентгенологическое обследование детей; сокращение времени и сложности исследования (время исследования сокращается до 4 ч, не нужна R-установка, пленка); при массовых иммунологиче ских обсле20 даваниях детей дает воэможность вьгявить детей с тимамегалией и проводить своевременное профилактическое лечение; отсутствует побочный,. эф фект °

Фар мул а изобретения

Способ диагно стики тимомегалии у детей путем клинического исследо

3С вания, отлич ающий ся тем, что, с целью упрощения, сокращения времени и снижения осложнений прова дят исследование крови с определением числа лимфоцитов Т- и В-лимфоцитов и

3 при значении числа лимфоцитов (6,5-8,5) ° 10> кл/л, абсолютного количества Т-лимфоцитов (2,5-4, О) ° 109 кл/л при нормальных значениях относительного числа или относительном числе

4С Т лимфоцитов 15-30% при нормальном абсолютном количестве, числа Э-лимфа цитов (1,2 2,6) 10 кл/л диагностируют наличие тимомегалии у детей