Способ определения активности т-лимфоцитов в организме

 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для выявления активности интерлейкин-2-опосредованного Т-клеточного звена иммунитета. Цель изобретения - повышение точности способа за счет выявления активности Т-лимфоцитов с интерлейкин-2-опосредованным ответом. Обследуемому пациенту вводят внутрикожно фитогемагглютинин и смесь фитогемагглютинина с циклоспорином. Измеряют зоны гиперемии и вычисляют величину 50%-ной ингибиции ответа на фитогемагглютинин. При повышении этой величины по сравнению со здоровыми определяют повышенную активность, а при ее снижении - низкую активность интерлейкин-2-зависимого ответа . В сравнении с прототипом увеличивается точность в определении активности Т-лимфоцитов, т. к. становится возможным определение активности популяции Т-лимфоцитов с интерлейкин-2-зависимым ответом . W Ё

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)л G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4496209/14 (22) 08,09.88 (46) 15.04.91. Бюл. М 14 (71) Минский Государственный медицинский институт (72) Л.П. Титов, Л,И, Тесевич, О.П. Чудаков, Г.Д. Харитоник и И.Н, Семененя (53) 615.374 (088.8) (56) Исаев И.Г. — Терапевтический архив, 1977, т. 49, hh 1, с. 116 — 118. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ Т вЂ” ЛИМФОЦИТОВ В ОРГАНИЗМЕ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для выявления активности интерлейкин — 2-опосредованного Т вЂ” клеточного звена иммунитета. Цель иэобретеИзобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для выявления активности интерлейкин †2 †опосредован Т вЂ клеточного звена иммунитета

Цель изобретения — повышение точности способа путем выявления интерлейкин2-зависимого ответа лимфоцитов.

Способ осуществляют следующим образом.

Обследуемому пациенту проводят постановку трех внутрикожных проб на внутренней поверхности предплечья (в верхней, средней и нижней третях) на достаточном расстоянии для исключения взаимовлияния.

В верхнюю треть предплечья после обработки 70 -ным спиртом вводят внутрикожно

0,1 мл фитогемагглютинина (ФГА) на физио„„!Ж„„1642396 А1 ния — повышение точности способа за счет выявления активности Т вЂ” лимфоцитов с интерлейкин — 2-опосредованным ответом. Обследуемому пациенту вводят внутрикожно фитогемагглютинин и смесь фитогемагглютинина с циклоспорином. Измеряют зоны гиперемии и вычисляют величину 50 «(» — ной ингибиции ответа на фитогемагглютинин.

При повышении этой величины по сравнению со здоровыми определяют повышенную активность, а при ее снижении — низкую активность интерлейкин — 2 — зависимого ответа. В сравнении с прототипом увеличивается точность в .определении активности

Т вЂ” лимфоцитов, т. к. становится возможным определение активности популяции Т-лимфоцитов с интерлейкин — 2 — зависимым ответом. логическом растворе в концентрации 20 мкг/мл, В среднюю и нижнюю трети предплечья аналогичным образом вводят такой же раствор митогена в объеме 0,1 мл и 0,1 мл циклоспорина А (ЦС) на физиологическом растворе в концентрациях соответственно

6,25 и 25 мкг/мл.

Учет проб производят через 24 ч путем измерения поперечного к оси введения диаметра пятна гиперемии в миллиметрах.

Полученные значения подставляют в формулу для вычисления концентрации ЦС, ингибирующей 50$ интерлейкин — 2 — зависимого пролиферативного ответа реакции. Величина концентрации 50 (— ной ингибиции может служить для оценки интерлейкин — 2 — зависимой активности Т вЂ” лимфоцитов у данного индивидуума, а при сравнении с контроль1642396

ИДю

1, Омакс

15

30

55 ной группой давать возможность оценочного критерия повышенной или пониженной активности у пациента.

На основании значений трех кожных проб рассчитывают концентрацию 50%— ной ингибиции по следующей формуле:

6,25 + 25 с

Х 1/D1 1/Омакс 1/D) — 1/Омакс ) 2 где ИДцо — концентрация ЦС, ингибирующая 50 пролиферативного ответа кожной пробы;

Омакс — диаметр пятна гиперемии пробы на ФГА, т, е. максимальная активность Т— популяции лимфоцитов пациентов у данного индивидуума на эту дозу митогена;

Д1 и Д2 — диаметры пятен гиперемии кожных проб ФГА с ЦС в концентрациях соответственно 6,25 и 25 мкгlмл.

Величины ИДщ могут служить критерием оценки и прогнозирования клинического течения некоторых заболеваний исходя из трактовки значимости интерлейкин — 2 — зависимой активности Т вЂ” системы лимфоцитов в данном патологическом процессе.

Пример 1. Пациент Я., 27 лет.

Диагноз: открытый травматический перелом нижней челюсти в области угла справа.

ИДБо — 4,36 мкг/мл, что значительно ниже среднегрупповой величины для группы с переломами нижней челюсти(9,91 0,66 мкг/мл) и ниже среднегрупповой величины для группы здоровых доноров (15,43 +. 0,65 мкг/мл), что говорит о сниженной .интерлейкин — 2зависимой активности Т вЂ” системы лимфоцитов организма данного пациента и о воэможности развития осложнений воспалительного характера. Через неделю у пациента развилась клиническая картина острого травматического остеомиелита.

Пример 2, Пациент А., 25 лет. Диагноз: открытый травматический перелом нижней челюсти в области углов.

ИД5о — 17,49 мкг/мл, что говорит об нормальной активности интерлейкин — 2 — за. висимой системы Т вЂ” лимфоцитов и о благоприятном возможном течении раневого процесса, Консолидация перелома без воспалительных осложнений.

Пример 3. Пациент Р„40 л. Диагноз; системная красная волчанка в стадии обострения.

ИД5о = 28,40 мкг/мл, что значительно выше, чем у здоровых, и свидетельствует об активации интерлейкин-2-зависимого звена T — системы лимфоцитов как негативного фактора при патогенезе данного заболевания, Пример 4, Пациент T„17 л, Диагноз; системная красная волчанка вне обострения с тяжелым клиническим течением с выраженной дисфункцией суставов.

ИДю = 2,85 мкг/мл, что свидетельствует о выраженном угнетении интерлейкин — 2 — зависимой активности Т вЂ” системы лимфоцитов и одновременно об отсутствии активного процесса.

П р имер 5. Пациент С„42 r. Диагноз; ревматоидный артрит с благоприятным течением процесса с сохраненйем достаточной амплитуды движений в суставах

ИД о = 9,73 мкг/мл, что близко к величине ИД5о у здоровых; Это свидетельствует о более благоприятном прогнозе в ближайшее время с учетом патогенеза данного заболевания, Пример 6. Пациентка В„20 л. Диагноз: ревматоидный артрит вне обострения с тяжелым течением заболевания со значительным ограничением подвижности суставной системы.

ИДБо = 2,28 мкг/мл, что свидетельствует о значительном подавлении активности и в прогностическом отношении может говорить о неблагоприятном течении процесса, Таким образом, предлагаемый способ позволяет выявлять и оценивать среди популяц1ли Т вЂ” лимфоцитов интерлейкин — 2— зависимую активность Т вЂ” лимфоцитов непосредственно в живом организме, что повышает точность кожных проб, расширяет их информативность и ценность в отношении прогнозирования течения ряда заболеваний, а также может быть использован как скрининг — тест при массовых иммунологических исследованиях, особенно тех, при которых патогенез связан с избыточной активацией биосинтеза интерлейкина-2. или, наоборот, с его депрессией, Способ прост в исполнении, не требует больших материальных затрат и дорогосто-. ящего оборудования и может быть широко использован в клинической практике.

Формула изобрел . сия

Способ определения активности Т-лимфоцитов в организме, включающий внутрикожное введение фитогемагглютинина с последующим измерением эоны гиперемии, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет выявления активности Т-лимфоцитов с интерлейкин — 2 — зависимым ответом, 1642396

Составитель В.Литовченко

Техред М.Морге нтал Корректор. С.Шевкун

Редактор А.Огар

Заказ 1145 Тираж 419 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 дополнительно вводят внутрикожно одновременно с фитогемагглютинином циклоспорин и после измерения зоны гиперемии вычисляют показатель 50%-ного подавления кожной реакции организма на фитоге- 5 магглютинин циклоспорином и при увеличении этого показателя по сравнению со здоровыми определяют повышенную активность Т вЂ” лимфоцитов, а при его снижении— низкую активность,