Способ определения гемолиза эритроцитов
Изобретение относится к медицине, а именно к биофизическим способам исследования в гематологии. Цель - повышение точности определения процента гемолизированных эритроцитов, уменьшение времени анализа и упрощение способа, Регистрируют оптическую плотность негемолизированных клеток в гипотонических растворах хлорида натрия (от 1,0 до 0,9%) на фотоэлектрическом колориметре при длине волны 650-750 нм. Процент гемолиза Б каждой пробе вычисляют по формуле: % гемолиза Ч(Омакс-Ох)/(0Макс-Омин)3 100, где Омакс. Омин - максимальная и минимальная оптические плотности; DX - оптическая плотность исследуемой пробы. 4 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКuX
РЕСПУБЛИК
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ ПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4605884/14 (22) 15.11,88 (46) 07.05.91. Бюл. М 17 (71) 1-й Ленинградский медицинский институт им. акад. И. П. Павлова (72) С: И. Рябов, Г, Д. Шостка, В. Н, Спиридонов и Д. Н. Бочков (53) 621.111,32(088,8) (56) Лабораторные методы исследования в клинике.!Под ред. В. Л. Меньшикова. M.: Медицина, 1987, с, 119. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЕМОЛИЗА ЭРИТРОЦИТОВ (57) Изобретение относится к медицине, а Изобретение относится к медицине, а именно к биофизическим способам исследования в гематологии. Цель изобретения — повышение точности способа. Способ осуществляется следующим образом. В ряд пробирок разливают по 5 мл раствора хлорида натрия концентрации от 0,1 до 0,9 ) . В каждую пробирку добавляют по 0,02 мл гепаринизированной крови и измеряют оптическую плотность образцов на фотоэлектроколориметре при длине волны 670 — 750 нм (красный фильтр) в кювете с толщиной слоя 10 мм против холостой пробы. Измерения проводят после того, как прекращается уменьшение оптической плотности вследствие гемолиээ (для первого образца не более 1 мин, для последующих „„ Ж„„1647403 А1 l4M8HHo к биофиэическим способам исследования в гематологии. Цель — повышение точности определения процента гемолизированных эритроцитов, уменьшение времени анализа и упрощение способа, Регистрируют оптическую плотность негемолизированных клеток в гипотонических растворах хлорида натрия (от 1,0 до 0,9 Д) на фотоэлектрическом колориметре при длине волны 650 — 750 нм. Процент гемолизэ в каждой пробе вычисляют по формуле:$ гемолиза =((Омакс Dx)/(Омакс Эмин)) 100, где Омакс, Омичи максимальная и минимальная оптические плотности; Ок — оптическая плотность исследуемой пробы. 4 табл, значительно меньше, так кэк за время измерения оптической плотности первого образца в остальных пробирках гемолиэ завершается). Холостая проба — раствор хлорида натрия соответствующей концентрации. Специальное оборудование — колориметр фотоэлектрический концентрационный "КФК вЂ” 2МП". Процент гемолиза в каждой пробирке вычисляют по формуле 0, гемолиза — макс " 100, Омакс Омин где Омакс. Омин — максимальная и минимальная оптические плотности; Дк — оптическая плотность исследуемой пробы. 1647403 Пример 1. Кровь Д-ева, 25 лет, практически здоров. Длина волны фотоэлектроколориметра 670 нм. Результаты эксперимента представлены в табл. 1. Формула изобретения Способ определения гемолиэа эритроцитов путем воздействия 0,1-0,97-ных 5 растворов хлорида натрия, добавление гепариниэированной крови и измерение оптической плотности растворов, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью упрощения, повышения точности и ускорения способа, 10 оптическую плотность измеряют при длине волны 670-750 нм. Пример 2. Кровь больного Ис-ва,37 лет, хроническая почечная недостаточность. Условия эксперимента аналогичны условиям, описанным в примере 1. Данные представлены в табл. 2. Таблица 1 Оптическая плотность (Д) и процент гемолизированных эритроцитов по прототипу и по изобретению По прототипу $ Д(длина волны Д (540 нм) (насадочной жидкости NaCl, $ По изобретению гемолиза 670 нм) гемоглиза Таблица 2 Оптическая плотность (Д) и процент гемолизированных эритроцитов по прототипу и по изобретению (пример 2) NaO, $ П б По и ототип етению гемолиэа гемолиэа 9,3 2,2 1,2 0,0 1,5 19,0 56,6 97,1 99,1 99,0 100,0 0,90 0,80 0,70 0,60 0,55 0,50 0,45 0,40 0,30 0,20 0,10 0,90 0,80 0,70 0,60 0,55 0,50 0,45 0,40 0,30 0,20 0,10 0,003 0,002 0;003 0,001 0,000 0,031 0,042 0,060 0,065 0,059 0,062 0.005 0,002 0,006 0,005 0,004 0,027 0,060 0,079 0,085 0,088 0,090 5 0 68 97 100 5,6 2,2 6,7 5,6 4,4 30,0 66,7 88,7 94,4 94,6 100,0 0,496 0,499 0,495 0,494 0,493 0,242 0,148 0,017 0,017 0,009 0,006 0,546 0,589 0,595 0,602 0,593 0,478 0,266 0,029 0,007 0,008 0,004 — 0,6 0,0 1,0 1,0 1,0 32,0 70,0 97,7 97,7 99,0 100,0 1647403 Таблица 3 Показатели гемолиза в 7 Прототип Предлагаемый способ 0.9 1,61 + 0,14 0,351 О 1854-0 088 0,216 2,28 > 0,1 > 0,05 1,64 0,7 4,26+0,33 0,807 1,46 +0,09 0,224 >0,1 < 0,01 12,9 0,6 M +м о 4,49 0,71 1,73 7,12 0.09 0,210 3,7 < 0,001 < 0.005 67.8 0.5 83,96 0,65 1,46 62,31 0,90 2,02 M+м >0,1 1,91 < 0,001 19.5 0,1 99,69 +0,12 0,289 97,59 +0,69 1,68 M +м < 0.001 33,8 < 0,005 3,04 п р и м е ч а н и е. Т вЂ” критерий Стьюдента, F критерий Фишера, Концентрация хлористого нат ия 0,37 0,0 0,49 О.О 0.0 0,25 1,23 1,48 1,72 1,72 1,23 1,36 7,51 7,02 7,14 7,14 7,02 6.90 86,71 83.62 85,22 83,00 82.27 99,63 100.0 100.0 99,75 99,26 99,51 2,06 1,38 1,38 1,38 2,06 1,38 4,14 4,14 3,45 3,45 4,83 5,52 2,76 4.14 4,15 6,21 6,90 2,76 59.86 65,31 62,59 61,22 62,58 95,17 97,24 100,0 96,55 98,62 97,93 1647403 Таблица 4 Временные затраты на проведение осмотического гемолиза по предлагаемому способу и по прототипу Составитель B,Mèòþøèí Техред М.Моргентел Корректор М.Пожо Редактор А.Шандор Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул,Гагарина, 101 Заказ 1394 Тираж 419 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета nb изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб.. 415
