Способ приготовления препарата розеткообразующих клеток

Авторы патента:

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам приготовления препаратов иммунокомпетентных клеток. Целью изобретения является повышение качества препарата. Цель достигается за счет применения смеси, состоящей из глицерина, этилового спирта, поливинилацетата и воды в соотношении 4:16:1:4 соответственно . Для этого готовят раствор глицерина и 96%-ного спирта в соотношении 1:2. Затем отдельно готовят второй раствор , содержащий 1 ч. поливинилацетатной эмульсии, 4 ч. дистиллированной воды и 5 ч. 96%-ного спирта. К4ч. первого раствора добавляют 1 ч второго раствора и хорошо перемешивают. Приготовленную смесь в виде тонкого слоя наносят на чистое предметное стекло, после чего делают мазок. Повышается качество препарата, так как мазок распределяется по поверхности стекла очень равномерно.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (si)s G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР. »

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4625966/14 (22) 22.11.88 (46) 15,05.91. Бюл, № 18 (71) Курский государственный медицинский институт (72) Ю,С.Яхонтов (53) 615.375 (088,8) (56) Тущин И,С. и др, Иммунология, 1981, ¹5, 85 вЂ” 87, (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТА РОЗЕТКООБРАЗУЮЩИХ КЛЕТОК (57) Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам приготовления препаратов иммунокомпетентных клеток. Целью изобретения является повыИзобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам приготовления препаратов иммунокомпетентных клеток.

Цель изобретения вЂ” повышение качества препарата путем равномерного распределения клеток на стекле.

Способ осуществляется следующим образом.

Предварительно готовят два раствора.

Раствор ¹ 1. Динамитный глицерин смешивают с 98%-ным этиловым спиртом в соотношении 1:2, Раствор № 2, Последовательно к 1 ч. поливинилацетатной эмульсии добавляют 4 ч. дистиллированной воды, затем 5 ч. 96%ного этилового спирта.

К 4 ч. раствора № 1 прибавляют 1 ч. раствора № 2 и хорошо перемешивают пу, Ж 1649441 А1 шение качества препарата. Цель достигается за счет применения смеси, состоящей из глицерина, этилового спирта, поливинилацетата и воды в соотношении 4:16:1:4 соответственно. Для этого готовят раствор глицерина и 96%-ного спирта в соотношении 1:2. Затем отдельно готовят второй раствор. содержащий 1 ч, поливинилацетатной эмульсии, 4 ч. дистиллированной воды и 5 ч.

96%-ного спирта, К4ч, первого раствора добавляют 1ч.второго раствора и хорошо перемешивают.

Приготовленную смесь в виде тонкого слоя наносят на чистое предметное стекло, после чего делают мазок. Повышается качество препарата, так как мазок распределяется по поверхности стекла очень равномерно, тем взбалтывания, Приготовленную смесь в виде тонкого слоя наносят на чистое предметное стекло, после чего делают мазок.

Пример. К 0,1 мл взвеси лимфоцитов добавляют 0,1.мл 0,5$ взвеси эритроцитов и полученную взвесь осаждают центрифугированием в течение 5 мин при 200g. Осадок фиксируют 0,05 мл 0,5% глютаральдегида при комнатной температуре в течение 20 мин. Действие глютаральдегида прекращают добавлением 1 мл дистиллированной воды и осаждают взвесь центрифугированием при 200g в течение 5 мин. Супернатант удаляют пастеровской пипеткой, а осадок осторожно ресуспендируют в 2 вЂ” 3 каплях оставшегося в пробирке супернатанта. Полученную взвесь используют для приготовления препарата розеткообразующих клеток: на сухое чистое протертое предметное стек1649441

Составитель Ю, Васильева

Редактор С, Лисина Техред М.Моргентал Корректор Т. Малец

Заказ 1519 Тираж 416 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 ло стеклянной палочкой наносят каплю приготовленной смеси в виде пятна размером

5 вЂ” 8 мм и растирают ее равномерно по поверхности ватным или марлевым тампоном до исчезновения следов жидкости. После этой операции стекло должно быть чистым и сухим. На подготовленную поверхность выливают полученную ранее клеточную смесь, легким покачиванием равномерно распределяют ее по всей необходимой поверхности стекла и дают просохнуть, Фиксацию и окраску производят по общепринятым методикам, например по

Романовскому.

Предлагаемый способ обеспечивает высокое качество препарата, так как мазок распределяется на поверхности стекла очень равномерно даже при исключении тщательного процесса обезжиривания стекол, например с помощью спиртозфирной смеси Никифорова или с помощью двухромовокислого калия и серной кислоты, исключается большой расход проточной воды.

В момент фиксирования препарата в мета5 ноле клеточные элементы прочно удерживаются на поверхности стекла и хорошо прокрашиваются.

Формула изобретения

10 Способ приготовления препарата розеткообразующих клеток, включающий нанесение суспензии клеток на стекло с последующей их фиксацией, о т л и ч а ющ и и с sl тTеeмM, что, с целью повышения

15 качества препарата за счет равномерного распределения клеток, перед нанесением суспенэии клеток стекло обрабатывают смесью, состоящей из глицерина, этилового спирта, поливинилацетата и воды в соотно20 шении 4:16;1;4.

Изобретение относится к медицине, преимущественно к офтальмологии, и может быть использовано для выявления-воспалительных аллергических заболеваний глаза

Способ диагностики лептоспироза // 1649439

Изобретение относится к медицине, в частности к инфекционной иммунологии для выявления лептоспироза

Способ дифференциальной диагностики идиопатической тромбоцитопенической пурпуры и гипопластической анемии // 1647404

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при дифференциальной диагностике заболеваний крови, особенно из атипичных форм

Способ определения антител в твердофазном иммуноферментном анализе // 1645898

Изобретение относится к иммунодиагностике и может быть использовано в методах иммуноферментного анализа и иммунодиагностике заболеваний человека и животных, в сероэпидемио логин, экспериментальной иммунохимии и биотехнологии

Способ определения ротавирусных антигенов // 1645298

Изобретение относится к вирусологии и мохет найти применение при диагностике острых вирусных инфекций, Целью изобретения является упрощение метода, повыпение чувствительности„ Для этого исследуемый материал наносят на мембранный фильтр с размером пор 0,2-0,6 мкм, инкубируют в буферном растворе с бычьим сывороточньм альбумином и на этом растворе выполняют разведения реагентов, этапы исследования осуцествляют путем погружения фильтров в соответствующие растворы , в качестве ферментной метки применяют антипероксидазные антитела в комплексе с пероксидазон, учет реакции производится визуально через 4-5 ч о Преимуществом предлагаемого способа является упрощение, повышение результативности в 1,1-1,5 раза, сокращение сроков исследования в 4,4-6 раз, снижение затрат на реагенты в 28 раз

Способ флуоресцентного иммуноанализа // 1642400

Изобретение относится к биотехнологии , а именно к способам проведения иммуноанализа , и может быть использовано в медицине, сельском хозяйстве, промышленности для определения биологически активных соединений Целью изобретения является повышение чувствительности лантанидного флуоресцентного иммуноанализа

Способ определения антител класса i @ м к корантигену вируса гепатита в // 1642399

Изобретение относится к медицинской биотехнологии, связано с генной инженерией и касается диагностики вирусного гепатита В С целью упрощения способа на твердую фазу сорбируют антитела к Ig M человека, вносят исследуемые образцы сыворотки или плазмы, при этом содержащиеся в них Ig M связывают с сорбированными антителами

Способ лечения синуитов у детей // 1642398

Изобретение относится к области медицины , а именно к оториноларингологии, и может быть использовано для лечения и профилактики воспалительных заболеваний околоносовых пазух у детей

Способ определения иммунокомпетентных клеток // 1642397

Изобретение относится к медицине и биологии и может быть использовано в качестве скрининг-теста в клинической иммунологии и в практике массовых иммунологических обследований

Способ определения активности т-лимфоцитов в организме // 1642396

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для выявления активности интерлейкин-2-опосредованного Т-клеточного звена иммунитета

Способ диагностики ранних отклонений в иммунном статусе новорожденных детей // 2101707

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для диагностики ранних отклонений в иммунном статусе новорожденных

Способ выявления высокоаффинных поли- и моноклональных антител к водонерастворимым гаптенам // 2102080

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к методам иммунохимического определения гаптенов (ксенобиотиков) в образцах биологического происхождения и объектах окружающей среды, и может быть использовано для выявления высокоаффинных поли- и моноклональных антител к водонерастворимым гаптенам

Иммуногенная композиция против боррелиоза лайма, способ иммунизации млекопитающего против боррелиоза лайма, способ получения белка pc borrelia burgdorferi, диагностический агент для обнаружения b.burgdorferi и способ обнаружения антител к b.burgdorferi // 2102081

Изобретение относится к предотвращению болезни Лайма у млекопитающих

Устройства для автоматического проведения иммуноанализа за несколько последовательных этапов по меньшей мере одного биологического вещества из множества биологических образцов, способ и реактив для применения указанных устройств // 2102758

Изобретение относится к устройству для автоматического проведения иммуноанализа за несколько последовательных этапов по меньшей мере, одного биологического вещества из множества биологических образцов, а также к способу и реактивам для использования указанного прибора

Способ обнаружения или количественного определения аналита в образце // 2102759

Изобретение относится к анализам и, в частности к катализируемому осаждению репортера через активированный конъюгат для усиления детектируемого сигнала, вследствие чего улучшается детекция и/или количество аналита в образце

Способ обнаружения или количественного определения аналита в образце // 2102759

Способ определения биологически активных веществ в жидкостях и устройство для его осуществления // 2102760

Изобретение относится к области медицины, медицинской техники, ветеринарии, экологии и может быть использовано для определения биологически активных веществ в любых биологических жидкостях, окружающей среде, пищевых продуктах, в частности в диагностике вирусных, бактериальных, паразитарных и соматических заболеваний, а также для контроля эффективности лечения

Способ диагностики спаечной болезни брюшины у детей // 2103689

Изобретение относится к медицине, а именно к детской хирургии и клинической иммунологии, и может быть использовано для диагностики спаечной болезни брюшины у детей, оперированных по поводу острого аппендицита

Способ определения функциональной активности лейкоцитов при беременности // 2103690

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и может быть использовано для оценки состояния иммунной системы беременной женщины

Способ диагностики хронического простатита // 2103691

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для диагностики хронического простатита