Способ определения клофелина

 

Изобретение относится к медицине, точнее к биохимии, может быть применено при судебно-экспертных исследованиях. Цель - возможность осуществления способа при определении клофелина в биологической ткани. Пробу обрабатывают этанолом, в качестве окрашивающего индикатора используют раствор трироданокобальтат аммония, а перед фотометрией проводят реэкстрагирование хлороформом или ацетоном. 3 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 G 01 N 33/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4669820/14 (22) 10.04.89 (46) 07.11.91, Бюл. М 41 (71) Азербайджанский государственный медицинский институт им.Н.Нариманова (72) M,Н.Велиева, M.Î.Âåëèåâ и P.Н,Мамедов (53) 616.07(088,8) (56) Методические рекомендации по приготовлению и анализу лекарственных препаратов. — Баку, М3 Азерб.ССР, 1987, с.21, Изобретение относится к медицине, в частности к биохимии, и может быть применено при судебно-экспертных исследовэниЦель изобретения — возможность осуществления способа при определении кло-. фелина в биологической ткани.

Способ осуществляют следующим образом.

К 100 r измельченного биологического материала прибавляют О,б мг клофелина, перемешивают и через 24 ч извлекают клофелин троекратным настаиванием 70 — ным этанолом по 100 мл. Этанольные извлечения объединяют, фильтруют, добавляют

2 мл 0,5 M раствора триродано-кобальтата аммония, реэкстрагируют продукт реакции

10 мл хлороформа или 10 мл ацетона и проводят фотоэлектроколориметрические определения.

Расчет содержания клофелина определяют по формуле

О,.а 100 о. ь

Ы2 1689853 Al (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КЛОФЕЛИНА (57) Изобретение относится к медицине, точнее к биохимии, может быть применено при судебно-экспертных исследованиях.

Цель — воэможность осуществления способа при определении клофелина в биологической ткани. Пробу обрабатывают этанолом, в качестве окрашивающего индикатора используют раствор трироданокобальтат аммония, а перед фотометрией проводят реэкстрагирование хлороформом или ацетоном. 3 табл. где Dõ — оптическая плотность исследуемого раствора; С:

00 — оптическая плотность стандартного раствора; э — содержание клофелина, мг, в стандартном растворе;

b — навеска клофелина,мг, в исследуемом растворе.

Пример 1. Эксперименты in vitro. О©

Использовались различные органы под- О опытных животных (печень, почки, желудок, 00 кишечник), Во время экспериментов приме-, (Я няют известный способ "добавок", т,е. берут (, ) тщательно измельченные органы в количестве по 100г, прибавляют 4 измельченных таблеток клофелина по 0,00015 (т.е. доза

0,6 мг клофелина), перемешивают и оставлятюбе ют при комнатной температуре (20 С) в течение 1 сут. Затем клофелин извлекают троекратным настаиванием 70%-ным этанолом по 100 мл. Объединив этанольные извлечения, их центрифугируют, фильтруют и упаривают до сухого остатка, прибавляют

10 мл 96%-ного этанола и 2,0 мл 0,5 M

1689853

Таблица 1 ая характеристика

0,47

Табпица2

Выделено

-т— ено KflOна, мг чни

5.,82

6,12

6,03

5,58

7,05

58.,2

61,"

60,3

Q5,8

705

0

0

О раствора триродано-кобальтата аммония (при наличии клофелина образуется изумрудно-синего цвета комплексное соединение, которое хорошо экстрагируется хлороформом или ацетоном). Окрашенные хлороформные или ацетоновые фракции подвергают фотоэлектроколориметрированию.

Измеряют оптическую плотность при длине волны около 570 нм в кювете толщиной 3 мм. В качестве раствора сравнения используют 0,5 -ный стандартный раствор клофелина (т.е. точную навеску 0,5000 r клофелина (ФС-42-1776-83), растворяют в воде в мерной колбе с емкостью 100 мл. В 1 мл стандартного раствора содержится 0,005 г клофелина, Раствор устойчив в течение 1 мес при хранении склянок с . притертой пробкой в защищенном от света месте, Результаты определения клофелина в пече и приведены в табл.1.

Описанный способ позволяет определить в среднем 60,25+0,22; клофелина при содержании 10 мг в 100 г печени.

Пример 2. Используя вышеописанный способ выделения клофелина иэ биоматериала, провели ряд экспериментов с различными объектами биологического происхождения, в частности желудок и кишечник с содержимыми, почки, а при извлечении из крови и мОчи использовались иным способом (т.е, из.них непосредственно выделяли клофелин f4H

Результаты проведенных исследований приведены в табл.2.

Пример 3. Зксперименты в опытах in

vivo.

5 Берут подопытных животных (кролики весом в 2,5-3 кг породы Шиншилла), которым парзнтерально вводят клофелин в различных дозировках, мг; 0,6; 2; 5.5; 10. После затравки животных определяют кпофелин в

10 различных биообьектах (параллельно проводят контрольные опыты), Результаты опытов приведены в табл.3.

Применение способа в медицинской практике позволит определять содержание

15 клофелина в различных объектах биологического происхождения как in vitro, так и in чЬО и облегчит обеспечить возможнас- ь применения способа при проведении судебномедицинских экспертиз.

Формула изобретения

Способ определения клофелина путем взаимодействия пробы с Окрашивающим индикатором с последующей фотометрией

25 продукта,отлича ющий.ся тем,что,с целью воэможности осуществления способа при определении клофелина в биологической ткани, пробу обрабатывают этанолом, в качестве окрашива ощего индикатора ис30 пользуют раствор трироданокобальтата аммония, а перед фотометрией проводят резкстрагирование хлороформом или ацетоном, 1689853

Таблица3

Составитель Н.Вэлеева

Техред M. Moðãåíòàë Корректор 0, Кравцова

Редактор Е.Папп

Производственно-издательский комбинат "Патент", r, Ужгород, ул,Гагарина, 101

Заказ 3810 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5