Способ определения иммунокомпетентных клеток

 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и аллергологии, и может быть использовано в биологии и ветеринарии . Цель изобретения - повышение точности и упрощение способа. Исследование популяционного состава лимфоцитов проводят по количеству клеток, соединившихся с фиксированными в лунке плсйта эритроцитами, в среде, содержащей тео-4 филлин, влияющий на экспрессию рецепторного аппарата лимфоцитов к эритроцитам барана в зависимости от функциональных характеристик клеток,. Использование заявленного способа позволяет повысить точность при трудоемкости , уменьшить расход дефицитных реактивов для проведения исследований. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)э G 01 и 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4782645/14 (22) 14,12,89 (46) 07.02.92. Бюл. М 5 (71) Всесоюзный научный центр радиационной медицины (72) В. Г. Бебешко, А. А. Чумак, Д, А. Базыка, Н. В. Беляева, B. К. Прахова и А. 8. Сарран (53) 615.375(088.8) (56) Унифицированные иммунологические методы обследования больных на стационарном и амбулаторном этапах лечения, Метод, рекоменд. Киев, 1988, с. 19. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИММУНОКОМП ЕТЕ НТН ЫХ КЛ ЕТОК (57) Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и аллергологии, и!

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и аллергологии, предназначено для использования в клинических и исследовательских целях и может быть использовано е биологии и ветеринарии.

Цель изобретения — повышение точности и упрощение способа.

Способ осуществляют следующим образомм, В лунки круглодонного плейта вносят по 0,05 мл 0,5 -ного раствора хлорида хрома и инкубйруют 5 мин при комнатной температуре, после чего полностью удаляют хлорид хрома путем встряхивания плейта резким движением. В лунки вносят по 0,05 мл 0,5 -ной суспензии эритроцитов барана и центрифугируют 10 мин при 1000 об/мин для осаждения и фиксации эритроцитов. В опытные лунки вносят по 0,05 мл теофиллина в концентрации 1 мгlмл, в контрольные по 0,05 мл 0,9ф> раствора натрия хлорида на фосфатном буфере (рН 7,2-7,4) и. Ж, 1711078 А1 может быть использовано в биологии и ветеринарии. Цель изобретения — повышение точности и упрощение способа. Исследование популяционного состава лимфоцитое проводят по количеству клеток, соединившихся с фиксированными в лунке плойта эритроцитами, в среде, содержащей теафиллин, влияющий на экспрессию рецепторного аппарата лимфоцитое к эритроцитам барана в зависимости от функциональных характеристик клеток, Использование заявленного способа позволяет повысить точность при трудоемкости, уменьшить расход дефицитных реактивое для проведения исследований. 1 табл. по 0,05 мл суспенэии лимфоцитов е концентрации 5 10 клеток/мл. Инкубируют 30

5 мин при 37 С, затем помещают в холодильник на 1 ч при 4 С. После инкубации ресуспендируют неп рикрепившиеся лимфоциты и удаляют надосадочную жидкость. В лунки добавляют по 0,1 мл гемолитической жидкости, содержащей 0,8 г/л хлорида аммония и

0,04 г/л этилендиаминотетраацетата (рН

7,2-7,4), на 1 мин, Переносят иэ каждой лунки по 0,1 мл содержимого е стаканчик с

6,25 мл 0,9 -ного раствора натрия хлорида и подсчитывают число клеток в суспензии на проточном кондуктометрическом цитоанализаторе "Лаборскаль" ПСА-1-ПСЛ-1 или аналогичном. Соотношение регуляторнык субпопуляций Т-лимфоцитов определяют по формуле.

К= В А 100, где К вЂ” соотношение теофиллин-реэистентных и теофиллин-чувствительных лимфоцитов; А — количество лимфоцитов в опьпной

1711078

Формула изобретения

Сравнительный анализ выявления соотношения регуляторных субпопуляций

Т-лимфоцитов у больного Н-ва, 33 года, диагноз: хронический гепатохолецистит пробе;  — количество лимфоцитов в контрольной пробе.

Способ был использован при проведении комплексного иммунологического исследования 170 больных, находившихся на лечении в клиниках Всесоюзного научного центра радиационной медицины. Сравнительный анализ результатов по известному и предлагаемому способам приведены в таблице.

Как видно иэ таблицы,при использовании предлагаемого способа отмечена достаточная корреляция показателей при сравнении с известным способом как в области низких, нормальных, так и повышенных значений соотношения субпопуляций.

Способ подтверждается следующим и римером.

Пример, Больной Н., 33 года, диагноз: хронический гепатохолецистит. Кровь больного 0,05 мл инкубируют 5 мин при комнатной температуре, 8 опытные лунки добавляют теофиллин, а в контрольные физический раствор. Количество клеток подсчитывают в цитоанализаторе "Лаборскаль" (табл.j, 5 Технико-экономическая эффективность изобретения. использование заявленного способа позволяет повысить точность при снижении трудоемкости способа, уменьшить расход дефицитных реактивов для

10 проведения исследований.

Способ определения иммунокомпетен15 тных клеток путем выявления количества теофиллин-чувствительных и теофиллин-нечувствительных клеток, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения точности и упрощения способа, субпопуляции лимфо20 цитов определяют по количеству клеток, присоединен: ых к фиксированным на поверхности лунки эритроцитам барана в среде, содержащей 1 мг/мл теофиллина, 1711073

Продолжение таблицы

Составитель Б. Мануйлов

Техред M,Ìîðãåíòàë Корректор Н. Король

Редактор Е, Савина

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101

Заказ 336 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035. Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5