Способ определения индивидуальной чувствительности организма к иммуномодулятору

 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения индивидуальной чувствительности организма к иммуномодуляторам. Цель изобретения - сокращение времени анализа и г повышение точности способа. У больного производят забор крови, которую инкубируют в присутствии иммуномодулятора, готовят на стекле мазки, один из которых инкубируют с акридиновым оранжевым, определяют во всех мазках синтетическую активность клеток крови и при увеличении ее на 20% и выше по сравнению с контролем определяют индивидуальную чувствительность организма к иммуномодулятору. По сравнению с прототипом сокращается время анализа в 48-60 раз, а точность увеличивается на 31,2-37,3%.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)з G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ilO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4812331/14 (22) 27.02.90 (46) 15.03.92. Бюл. N. 10 (71) Киевский медицинский институт им.А.А. Богомольца (72) Г.Б .Афонина, Л.И.Скрипка и О,А,Левина (53) 615.375(088.8) (56) Чернушенко Е,Ф. и др, Методы подбора иммуномодулирующих препаратов, Киев, 1985, с. 24. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНДИВИДУАЛЬНОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ОРГАНИЗМА К ИММУНОМОДУЛЯТОРУ (57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологическим методам исследования и может использоваться в широкой клинической практике для индивидуального подбора иммунокорригирующих препаратов.

Цель изобретения — ускорение анализа и повышение точности способа, Способ осуществляется следующим образом.

Кровь больного в объеме 0,1 мл инкубируют при 37 С 1 ч.с 0,1 мл раствора иммуномодулятора в рекомендуемом разведении (опыт), либо с 0,1 мл физиологического раствора (контроль). После инкубации пробы центрифугируют 5 мин при 1500 об/мин и из осадка на обезжиренных предметных стеклах готовят мазки. Препараты высушивают. Акридиновый оранжевый в разведении 1:500000 наносят на высушенный мазок, накрывают покровным стеклом, инкубируют 5 мин при комнатной температуре. Затем препарат просматривают на Ы«, 1720012А1 индивидуальной чувствительности организма к иммуномодуляторам. Цель изобретения - сокращение времени анализа и повышение точности способа. У больного производят забор крови, которую инкубируют в присутствии иммуномодулятора, готовят на стекле мазки, один из которых инкубируют с акридиновым оранжевым, определяют во всех мазках синтетическую активность клеток крови и при увеличении ее на 207ь и выше по сравнению с контролем определяют индивидуальную чувствительность организма к иммуномодулятору. flo сравнению с прототипом сокрашается время анализа в 48 — 60 раз, а точность увеличивается на 31,2 — 37,3 ь. микроспектрофлуориметре, определяя в каждом лимфоците интенсивность флуоресценции зонда при 640 и 530 нм. Всего просматривают 50 лимфоцитов. Вычисляют коэффициент синтетической активности как отношение свечения комплекса акридинового оранжевого с РНК(640 нм) к комплексу с ДНК (530 нм). При повышении показателя по сравнению с контролем на 20 и более определяют индивидуальную чувствительность к иммуномодулятору конкретного больного.

Способ поясняют следующими примерами.

Пример 1. Диагноз: Ишемическая болезнь сердца, постинфарктный кардиосклероз, хроническая коронарная недостаточность t ст. Иммунологическая недостаточность:

Бласттрансформация лимфоцитов после их инкубации в присутствии фитогемагглютинина (ФГА) 46 (. содержание Т-розеткообразующих клеток (Т-РОК) в крови 32 .

1720012

Составитель В.Литовченко

Редактор M,Íåäîëóæåíêo Техред M.Ìàðãåíòàë Корректор А.Осауленко

Заказ 770 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

При назначении иммуномодуляторов проводили их индивидуальный подбор предлагаемым способом. Исследовали следующие препараты: левамизол, тималин, спленин и рабоксин. Через 1,5 ч после взятия крови на исследование предлагаемым способом было установлено возрастание синтетической активности лимфоцитов больного на спленин на 20 и рибоксин на

36 . Проведение курса иммуномодулирующей терапии этими препаратами привело к положительному эффекту — состояние больного улучшилось, бласттрансформация лимфоцитов крови на ФГА повысилась до 58, а содержание Т-РОК до 51о .

Пример 2. Б-ой, О-рь А.И., 61 год.

Диагноз: Ишемическая болезнь сердца, постинфарктный кардиосклероз, хроническая недостаточность кровообращения 1! ст. Иммунологическая недостаточность, Бласттрансформация лимфоцитов на ФГА — 36%, содержание Т-POK в крови — 34 .

Была проведена индивидуальная оценка действия иммуномодуляторов предлагаемым способом. Установлено, что спленин практически не изменял синтетическую активность лимфоцитов (8%), а милдронат повышал ее íà 36 . Проведение курса лечения милдронатом привело к положительному аффекту. БТЛ возросла до 51, содержание Т-РОК до 49, Таким образом, применение предлагае5 мого способа ускоряет подбор иммуномодулятора у конкретного больного, сокращая время проведения исследования с 72 — 96 ч до 1,5 ч, т.е. сокращение анализа составило в 48-60 раэ.

10 Повышение точности по сравнению с известным увеличивалась на 31.2-37,3, Формула изобретения

Способ определения индивидуальной чувствительности организма к иммуномоду15 лятору, включающий забор крови в две пробы, инкубацию опытной пробы в присутствии иммуномодулятора, о т л и ч аю шийся тем; что, с целью повышения точности способа и сокращения времени

20 анализа, после инкубации из опытной и контрольной проб готовят мазки, обрабатывают их акридиновым оранжевым, измеряют свечение в мазках, вычисляют синтетическую активность и при увеличении активно25 сти на 207ь и выше в опытной пробе по сравнению с контрольной определяют индивидуальную чувствительность организма к иммуномодулятору,