Способ диагностики интоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда

 

Способ диагностики хронической профессиональной интоксикации алифатическими аминами жирного ряда относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике профессиональных заболеваний . Цель изобретения: повышение объективности и точности диагностики профессиональной интоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда (ВААЖР), Сущность: Указанная цель достигается путем соединения лейкоцитов пациента с равными объемами 0,5% взвеси глютаризированных эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР. Смесь инкубируют в течение 10-15 минут при температуре + 37,0°-37,50, центрифугируют, делают мазок, фиксируют его, высушивают, окрашивают по Романовскому-Гимза. Просматривают под микроскопом 100 лимфоцитов, отмечая среди них клетки, фиксировавшие на себе три и более эритроцитов барабан (РОК). При увеличении количества РОК, специфичных ВААЖР по сравнению с нормой (3,4± 0,5%), . диагностируют наличие ВААЖР в организме и ставят диаыоз: профессиональная ин-| токсикация высшими алифатическими аминами жирного ряда. Точность способа возрастает на основе объективных данных.

COIO3 СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (si)s G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4870370/14 (22) 01.10.90 (46) 23.12.92. Бюл. М 47 (71) Пермский государственный медицинский институт (72) Т,А Юшкова, B.В.Юшков и Н,С.Сединина (56) Зислин Д.М. Ошибки в диагностике профессиональной хронической интоксикации.

Сов. медицина, 1984, N. 1, с. 90-92. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ИНТОКСИКАЦИИ ВЫСШИМИ АЛИФАТИЧЕСКИМИ

АМИНАМИ ЖИРНОГО Р РА (57) Способ диагностики хронической профессионал ьйой интоксикации алифатическими аминами жирного ряда относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике профессиональных заболеваний. Цель изобретения: повышение объективности и точности диагностики проИзобретение относится к медицине, в частности к лабораторной диагностике йрофессиональных заболеваний, и может быть использовано для постановки диагноза хронической профессиональной интоксикации вйсшими алифатическими аминами жирного ряда (С16-Cm) (СААЖР). . Цель изобретения — повышение объективности и точности диагностики профессиональных болезней, вызванных высшими алифатическими аминами жирного ряда.

Сущность способа — обнаружение ВААЖР— основано на способности лимфоци тов.организма сснсибилизироватьсл к веществу, попадаемому в организм любым Ж 1783438 А1 фессиональной интоксикации высшими алифатическими аминами жирного ряда (ВААЖР}. Сущность: Указанная цель достигается путем соединения лейкоцитов пациента с равными объемами 0,50 взвеси гл ютаризирован н ых эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР, Смесь инкубируют в течение 10-15 минут при температуре +

37,0 -37,5, центрифугируют, делают мазок, фиксируют его, высушивают, окрашивают по Романовскому-Гимза. Просматривают под микроскопом 100 лимфоцитов, отмечая среди них клетки, фиксировавшие на себе три и более эритроцитов барабан (P0K). При увеличении количества РОК, специфичных

ВААЖР по сравнению с нормой(3,4+.0,5$), диагностируют наличие ВААЖР в организме и ставят диагноз: профессиональная интоксикация высшими алифатическими аминами жирного ряда. Точность способа возрастает на основе объективных данных.

ОО путем, что сопровождается активизацией 140 числа соответствующих рецепторов к этим аминам.,,6д

Сущность способа состоит в определе-,(ф нии числа лимфоцитов, способных взаимодействовать с эритроцитами барана, сенсибилизированных ВААЖР.

Способ осуществля ют следующим образом.

Забирают 0,1-0,2 мл крови пациента в

0,1-0,2 мл 5 -ного раствора цитрата натрия для предупреждения свертывания крови.

После тщательного встряхивания пробирки в нее добавляют для лизирования эритроцитов 0,8 мл дистиллированной воды на 30 с, 1 7Ж438 а потом доливают до 9-10 мл среды 199 для восстановления рН=7,0. Пробирки центри фугируют 5-10 мин при 1500 об/мин, после чего надосадочную жидкость сливают, а осадок лейкоцитов ресуспендируют в 0,10,2 мл изотонического раствора хлорида натрия или среды 199. К полученной взвеси добавляют 0,1-0,2 мл 0,5Д-ной взвеси глютаризированных эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР, смесь инкубируют 10-15 мин при +37,0 -37,5 С, после чего центрифугируют при 1500 об/мин 5-10 мин. Надосадочную жидкость удаляют пипеткой, осадок ресуспендиру,от в капле любой интактнай сыворотки (бычьей, лошадиной, человеческой). Из полученной суспензии клеток делают мазок, фиксируют в метиловом спирте или этиловом спирте, высушивают, окрашивают по Романовскому-Гимза, Под микроскопом рассматривают 100 лимфоцитов, отмечая среди них число (/) клеток, фиксировавших на себе три и более эритроцитов (РОК), Обработку эритроцитов барана в глютаровом альдегиде производят следующим образом; соединяют 1 мл 5/ной взвеси тщательно отмытых нативных эритроцитов барана с 0,25/-ным раствором глютарового альдегида в соотношении

1:1. Смесь выдерживают при+37,0 С в течение 15 мин, после чего эритроциты дважды отмывают от альдегида забуференным изотоническим раствором хларида натрия рН=7,2 и доводят до первоначального объема этим >ке раствором (5, -ная взвесь), Для сенсибилизации эритроцитов готовят раствор с концентрацией ВААЖР 0,01 мкг/мл на забуференном физиологическом растворе рН=6,4, 1 мл 5 -ной взвеси глютаризированных эритроцитов центрифугируют, надосадочную жидкость удаляют, а к осадку эритроцитов приливают 1 мл раствора ВААЖР. Смесь тщательно встряхивают и выдерживают при комнатной температуре

25-30 мин, после чего лимфоциты дважды отмывают центрифугированием при 1500 об/мин в течение 10 мин изотоническим раствором хлорида натрия и им же доводят до 0,5 j-ной взвеси. Показателем нормы является обнару>кение числа РОК, специфичных ВААЖР, равное 3,4 0,5/, Примеры практического использования способа.

Пример 1. Б-ная, Л-на, 36 лет, àïïàратчица. До контакта с ВААЖР была здоровой. Ухудшение в состоянии здоровья отмечает после 9-1- лет работы с аминами.

Стаж 15 лет. Жалуется на несдержанность, нервность, слезливость, постоянные головные боли, нарушено засыпание, сОН чут5

55 кий, прерывистый, Плохо переносит жару, резкие запахи, шум, громкие звуки, Лечилась по месту жительства, но улучшения не наступило.

Со стороны внутренних органов терапевтом патологии не обнаружено, Нервная система: сухожильные рефлексы оживлены

> вегетативныэ реакции усилены. стойкий красный дермографизм, гипергидроз ладоней рук, ощущение онемения в дистальных отделах конечностей.

Психическое состояние, Все виды ориентировки сохранены. Имеется гиперестезия к звукам, запахам. Внимание снижено по объему, память ослаблена, прослеживается склонность к детализации, эмоционально лабильна, "близко" слезы, быстро устает.

У больной взяли 0,1 мл крови и добавили 0,1 мл 0,5 -ной взвеси глютаризированнь х эритроцитов барана, нагруженных

ВААЖР, инкубировали 10 мин при +37,0 С.

При подсчете в мазке обнаружено увеличение экспрессии ВААЖР-рецепторов, о чем свидетельствует высокое число РОК, равное

45/, тогда KGK в норме оно не превышает

3,4 0,5 / .

Диагноз: хроническая профессиональная интоксикация ВААЖР, психоорганический синдром.

Пример 2, Б-ная M-ва, 49 лет, аппаратчица. Через 6 лет после контакта с

ВААЖР стала отмечать головную боль, быструю утомляемость, раздражительность, эффективную неустойчивость. Не переносит запахи, шум, езду на транспорте. Снизилась память, стала плаксивой, Нервная система; усилены вегетативные реакции: стойкий красный дермографизм, нарушение сна, онемение и зябкость рук.

Психическое состояние. Все виды ориентировки сохранены, сосредоточена на неп риятн ых ощущениях. Имеется гиперестезия к физиогенным раздра>кителям. Внимание снижено по объему, есть трудности в распределении, выражена истощаемость.

Память снижена. Мышление с некоторой обстоятельностью, ригидностью. Эмоционально лабил ьна, конфликтна, медлительна, астенизирована, щадит себя в нагрузках, в общении с людьми.

У больной взяли 0,1 мл крови и добавили

0,1 мл 0,5;4-ной взвеси глютаризированных эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР, инкубировали 10 мин при+37,5 С. При подсчете в мазке обнаружено 41 Р0К, специфичных ВААЖР, тогда как в норме оно равно +3,4 ="0,5 /.

1783438

Предлагаемый способ в данном случае осуществляли в различных условиях: с использованием 0,1 мл или 0,2 мл крови и 0,1 или 0,2 мл 0,5%-ной взвеси эритроцитов барана, нагруженных ВААЖР, с последующей инкубацией в течение 10 или 15 мин при

+37,0 С или+37,5ОС.

Составитель Г;Крюкова

Техред M.Mîðãåíòàë Корректор M,Êåðåöìàí

Редактор Т.Козлова

Заказ 4512 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва. Ж-35, Раушская наб.. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Диагноз: хроническая профессиональная интоксикация ВААЖР, психоорганический, встено-ипохондрический синдром.

Пример 3.3-ная, С-на,51 год, аппаратчица. Через 6 лет после контакта с ВААЖР стала жаловаться на повышенную утомляемость, головные боли, нарушение сна, обидчивость, конфликтность, раздражительность, неприятные ощущения в дистальных отделах конечностей, Нервная система: недостаточность конвергенции, оживлены сухожильные рефлексы, тремор пальцев вытянутых рук, вегетативные реакции усилены.

Со стороны соматического статуса терапевтом отмечены хронический холецистит, спастический колит.

Психическое состояние. Имеется гиперестезия к шуму, свету, запахам.. Произвольное внимание мало по объему, отмечается быстрая истощаемость, трудности распределения. Память снижена на текущие события. Медлительна, неуверена в принятии решений, эмоционально лабильна, астенизирована.

Диагноз: хроническая профессиональная интоксикация ВААЖР, астенической психоорганический синдром.

Преимущества способа заключаются в

5 высокой специфичности и чувствительности, использовании малого количества крови обследуемых, простоте технического, исполнения, малого Количества доступных реактивов, несложном оборудовании, воз10 можности использования способа при массовых профилактических осмотрах. Способ позволяет диагностировать ранние, начальные доклинические стадии -хронической профессиональной интоксикации ВААЖР

15 на основании обьективности результатов обследования, Формула изобретения

Способ диагностики интоксикации высшими алифатическими аминами жирного

20 ряда путем обследования пациента, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения точности и объективности диагностики, исследуют кровь, при этом к крови больного добавляют равные объемы 0,5% взвеси глю25 таризированных эритроцитов барана, нагруженных высшими алифатическими аминами, смесь инкубируют при 37-37,5ОС в течение 10-15 мин, подсчитывают в мазке число роэеткообразующих лимфоцитов и

30 при увеличении числа розеток по сравнению с нормой диагностируют хроническую профессиональную интоксикацию высшими алифатическими аминами жирного ряда.