Способ инактивации инфекционности вируса лихорадки западного нила

 

Использование: медицина, вирусология , биотехнология. Инактивации инфекционности вируса лихорадки Западного Нила достигают обработкой переменным магнитным полем с частотой 2000-6000 Гц, индукцией 0,0002-0,25 мГ, временем экспозиции 25-30 мин монослоя культуры клеток, зараженного вирусом, после культивирования его в течение 48 ч. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК.) ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

1 (21) 4929528/13 (2 2) 19,04.91 (46) 30.01.93. Бюл. ¹ 4 (71) Научный центр эпидемиологии, гигиены и профзаболеваний Министерства здравоо ранения и социального обеспечения рес ублики Грузия (72) M.Á.MèðöxóëàBà, Н,О.Барнэбишвили, АР.Цибадзе и 3.А,Иванидзе (7(3) А,Д. Цибадзе

Изобретение относится к медицине, в стности вирусол огии.

В вирусологии известны разные спосоинактивации ннфекционности вирусов, они малоэффективны — не достигается лная инактивация инфекционности.

Наиболее близким решением к изобрению является инактивация инфекционнои при действии на вирусы ионизирующего лучения и больших доз ультрафиолетовосвета, однако действие этих факторов наду с инактивацией инфекционности русов нарушаег целостность и функциорование клетки-хозяина.

Целью изобретения является по Ьая активация инфекционности вируса лиходки Западного Нила без нарушения целоности и функционирования клеток.

Это достигается тем, что в предлагаем способе полная инактивация инфекциности вируса лихорадки Западного Нила стигается путеь; воздействия переменномагнитного поля на зараженные клеточ е культуры. Применяются магнитные ля звуковых частот, которые не нарушают н

ll т с и г р в

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (,ОСПАТЕНТ СССР) фПИСАНИЕ Ы„„1792425 А3 (51) С 12 N 7/00, 7/02

2 (54) СПОСОБ ИНАКТИВАЦИИ ИНФЕКЦИОННОСТИ ВИРУСА JlИХОРАДКИ ЗАПАДНОГО НИЛА (57) Использование: медицина, вирусоло гия, биотехнология. Инактивации инфекционности вируса лихорадки Западного Нила достигают обработкой переменным магнитным полем с частотой 2000 — 6000 Гц, индукцией 0,0002 — 0,25 мГ, временем экспозиции

25 — 30 мин монослоя культуры клеток, зараженного вирусом, после культивирования его в течение 48 ч. 1 табл.

Ф

В целостность и функционирование клеток при нецитопатических величинах индукции поля и используются в физиотерапии.

Исследования проводились на зараженных вирусом лихорадки Западного Нила культурах клеток Чего и V-Е-6. Исходный титр вируса 7,5-8,0 Ig. В экспериментах ис° Ъ пользовался вирус, разведенный до 6,0 Ig.

Титр вируса в реакции гемагглютинации (РГА) — 1:5000-1:10000. После заражения ви- Q русами клеточных культур абсорбцию виру- 13 са на клетки проводили при температуре,фь.

37 С в течение 1-1,5 ч. После чего неадсор- . Я бированные вирусы удаляли, а монослой (Л промывали и заливали средой поддержки, После этого этапа помещенные в пеницилиновые флаконы заряженные культуры инкубировали в течение 18 ч при 37 С и: 4 помещали потом в соленоид, где создавалось переменное магнитное поле (частота

50 — 10000 Гц, индукция 0,0001-0,5 мТ) при прохождении переменного синусоидального тока от генератора Г3-33..Спустя 24 ч после воздействия магнитным полем удостоверялись по РГА в присутствии вируса в

1792425

Формула изобретения

Способ инактивации инфекционности вируса лихорадки Западного Нила, заключающийся в том, что выращивают монослой клеток, заражают его вирусом, культивируют в течение 48 ч с последующей обработкой переменным магнитным полем с частотой 2000 — 6000 Гц, индукцией 0.0002—

0,25 мТ, временем экспозиции 25 — 30 мин.

Зависимость вьюкивземостн сосунков при введении БКЖ зараженных клеточных культур or часготы и индукции прилохгенного к культурам переменного магнитного полл -летальный исход. то ме самое наблюдается для необлученных образцов (в инкубационный период); и летальный исход после инкубационного периода:

+ не развиваетсл характерная для зарвкения картина с летальным исходом. НПА-цитопатическое действие переменного магнитного поля на клеточные культуры.

Составитель M.Ìèðöõóëàâà

Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор О.Кравцова

Редактор 3.Ходакова

Заказ 169 Тираж . Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производс1 а.нно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 вирусосодержа щей кул ьтурал ьной жидкости (ВКЖ) и вводил,и ВКЖ сосункам белых мышей. При введении ВКЖ необлученных полем образцов у сосунков развивалась характерная инфекция с летальным исходом. 5

Зависимость выживаемости сосунков при введении ВКЖ образцов, обработанных переменным магнитным полем, от частоты и индукции поля представлена в таблице. Как видно, в широком диапазоне частот (2000- 10

6000) и индукции (0,0002 — 0,25 мТ) происходит полная инактивация вируса лихорадки

Западного Нила - вЪе сосунки остались живыми. Были использованы следующие экспозиции в указанном диапазоне поля — 15

5,10,15,20,25,30,40,50,60 мин.. Экспозиция указанным магнитным полем в течение 5 — 20 мин, 50,60 мин и введение ВКЖ этих образцов сосункам приводили к летальному исходу, однако при 20 мин воздействия сосунки 20 погибали после инкубационного периода, Таким образом, полная ииактивация вируса . наблюдается в диапазойе следующих характеристик переменного магнитного поля: частота 2000 — 6000 Гц, индукция 0,0002 — 0,25 25 мТ, время экспозиции 25-40 мин. Допредельные величины: частота 1500 Гц, индукция .

0,0001 мТ, время 20 мин. Послепредельные величины: частота 6500 Гц, индукция 0,3 мТ, время 50 мин.

Для достоверности у оставшихся в живых сосунков после 30 дней определяли титр антител, который выявился у всех сосунков — 1:20. Что указывает на присутствие вируса в ВКЖ образцов при введении сосункам и отсутствие инфекционности вируса лихорадки Западного Нила при обработке зараженных клеточных культур переменным магнитным полем вышеуказанных характеристик.