Способ получения гиббереллина

 

I86938

Союз Советских

Социвлистических

Республик

Зависимое от авт, свидетельства №

Кл. 6а, 14

45/, 19i00

Заявлено 09.111.1965 (№ 947449)28-13) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 11.Х.1966. Бюллетень № 20

Дата опубликования описания 15.XI,19бб

МПК С 12k

А Oln

УДК 663.18:576.8.093.1 (088.8) Комитет по делам изобретений и аткрь тий при Совете Министров

СССР

Авторы изобретения

Г. С. Муромцев, 1О, С. Раковск

Всесоюзный научно-исследовательский и 1(урганский завод медицин

Заявители

С11ОСОБ ИОЛУЧЕНИЯ ГИББЕРЕЛЛИНА

Способ получения гиббереллина выращиванием продуцирующего его микроорганизма

Fusarium moniliforme sheld на питательной среде, содержащей в качестве источника углерода сахарозу или подсолнечное масло, а также источник азота и минеральные соли, известен.

Процесс ферментации гиббереллина по предлагаемому способу протекает более эффективно, чем по известному. При этом значительно увеличивается выход гиббереллина.

Зто достигается тем, что в качестве источника углерода используют насыщенные и ненасышенные жирные кислоты или содержащие их продукты.

Способ заключается в следующем.

В качестве основной питательной среды применяют модифицированную среду Ролен — Тома следующего состава, О7О:

Источники углерода (различные масла — подсолнечное, оливковое, хлопковое, льняное, жирные кислоты — пальмитиновая, олеиновая, кашалотовый жир) 4 — 8

МН4N Оз 0,3

КН РО4 0,2

К2>О4 0,02

MgSO4 7НеО 0,02

Кукурузный экстракт 0,1

Смесь микроэлементов 0,1

Исходный рН среды 5,5. На питательную среду засевают Fusarium moniliforme sheld u проводят глубинное культивирование в колбах емкостью 750 лтл на ротационной качалке (210 об/лин) при встряхивании или в ферментерах емкостью 500 л. Содержание гиббереллина в культуральной жидкости определяют нзвестнымн колориметрическим и биологическим методами.

10 Пример 1. Использование ряда растительных масел и насыщенной жирной кислоты.

В опыте на качалке каждый источник углерода берут в концентрации 4%, продолжи15 тельность ферментации 8 суток, культура № б.

Получают следующие результаты (см. табл. 1).

Пример 2. Использование олеиновой кислоты (ненасыщенной) в качестве источника углерода.

20 Штамм Fusarium moniliforme pg-7 культивируют в ферментерах емкостью 500 л на среде с 0,3% NÍ4NO и 8% технической олеиновой кислоты (см. табл. 2) .

Тот же штамм продуцента культивируют в

25 колбах на ротационных качалках на среде с

0,3% NH4NO и олеиновой кислотой в течение

9 суток (см. табл. 3) .

Пример 3. Использование кашалотового жира в качестве источника углерода и энер33 гии, 186938

Таблица 1

Концентрация гиббереллина

Вес сухого мицелия, о рн культуральной жидкости

Продуктивность минеи к контролю лия, мкг/мг!

Источник углерода,кг/л

1,40

75,85

7,6

100

5,4

228,2

1,81

300

12,6

Масла

3,42

3,01

2,58

3,68

330,4

290,1

255,3

424,0

382

336

559

4,4

4,4

4,2

4,3

9,6

9,6

9,9

11,5 подсолнечное оливковое хлопковое льняное

Таблица 2 о ох

lD х оvav

z. v

o" x xб х х х х

Е о - о ааох

f о оно х х х,."

6 о 0. . о, О,-, v а -,-> о

Qa v td =

1 о о о о сО. ох х

v o

I х

» о х х 0 -. х

С ь ем гиббереллина, мг/л

Концентрация гИббереллина лг/л, на время, sac, при сливе,.гоа

Таолица 5

11,9

21,6

22,1

18,5

157

338

278

36,2

61,0

83,3

60,2

303

282

377

321

1318/229 230

1565/336 180

1539/394, 245

1474/320 218

Концентрация гиббереллина

Продоли<ительность ферментации сутки

Источник углерода г! к RoHTролю

Таблица 3

Концентрация гиббереллина

Подсолнечное масло (конт15 роль) .

Кашалотовый жир

18

1018

1560

153

Источник углерода.г к контролю мг/л (контПодсолнечное масло роль)

Олеиновая кислота

То же

100 20

122

8

4 б

893

1075

Предмет изобретения

Таблица 4

30 х "х х х о х о

Пхо

v х х ах

o +,- . х о

v и ох»

=

В о о о а7 х о

1 dd,о о, f

v vv ох ххах о+v„ о х

2vl v од о о -"

С,ем иббереллина, мг/л

Концентрация гиббереллина, мг/л, на время, rac, при сливе

147

32,3

220

13,5

1113/258

790/324

1179/367

126

147

Очистка не проводилась

То же

125

Составитель М. Андреева

Тсхред Л. Я. Бриккер Корректоры: Т. В. Муллина и С. М. Белугина

Редактор Л. A. Ильина

Заказ 3440;! Тираж 850 Формат бум. 60y90 /, Объем 0,21 изд. л. Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр. Сапунова, 2

Сахароза (контроль)

Насыщенная жирная пальмптиновая кислота (этиловый эфир) Штамм Fusarium moniliforme pg-7 культи- 25 вируют в ферментере емкостью 500 л на среде с 0,3в/д ХН1ХОа и 8% кашалотоього жира (см, табл. 4).

Тот же штамм продуцента культивируют в колбах на ротационной качалке на среде с 8% кашалотового жира и 8% подсочнечного масла (см. табл. 5).

Таким образом, использование в питательной среде насыщенных и ненасыщенных жирных кислот, являющихся оолее эффективными источниками углерода и энергии, чем сахара, значительно интенсифицирует биосинтез гиббереллина.

Способ получения гиббереллина путем выращивания продуцирующего его микроорганизма Fusarium moniliforme sheld на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности процесса ферментации гиббереллина и увеличения выхода конечного продукта, в качестве источника углерода используют насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты или содержащие их продукты.