Способ дифференциальной диагностики гипертонической болезни и артериальной гипертензии, обусловленной хроническим пиелонефритом

 

Использование: медицина, дифференциальная диагностика гипертонической болезни (ГБ) в периоде обострения и артериальной гипертензии, обусловленной хроническим пиелонефритом. Сущность изобретения: регистрируют величину активности катзлазы или супероксид днемутазУ эритроцитов. Способ позволяет упростить, ускорить и обезопасить процесс дифференциальной диагностики ГБ.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (I () ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ! «4г «(г " ("ч" g с стики ГБ. (21) 4893999/14 (22) 25.12.90 (46) 30.04.93. Бюл. N. 16 (71) Крымский медицинский институт и Украинский институт усовершенствования врачей (72) Ю.И.Кулагин, А.А.Сюрин, В.Н.Нескоромный и В.В.Никонов (56) Авторское свидетельство СССР

М 1527586, кл. G 01 N 33/52, 1988.

{54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ГИПЕРТОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ И АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ, Изобретение относится к области клинической медицины, в частности к внутренним болезням, преимущественной областью его использования является дифференциальная диагностика гипертонической болезни (ГБ) и артериальной гипертензии, обусловленной хроническим пиелонефритом (ХП).

Цель настоящего изобретения — упрощение способа дифференциальной диагностики ГБ и ХП с артериальной гипертензией за счет сокращения трудоемких операций путем определения у больных ГБ k ХП активности каталазы и супероксиддисмутазы

{СОД) эритроцитов.

Способ осуществляется следующим образом. Из локтевой вены больного в пробирку с раствором цитрата натрия отбирают 5 мл крови, центрифугируют 10 мин (4000

06/мин) и затем отделяют зритромассу от плазмы. Эритромассу дважды промывают физиологическим раствором (перемешива(s(>s G 01 N 33/52//G 01 N 33/68; А 61 В 10/00

ОБУСЛОВЛЕННОЙ ХРОНИЧЕСКИМ ПИЕЛОНЕФРИТОМ (57) Использование; медицина, дифферен циал ьная диа гностика ги пертонической болезни (ГБ) в периоде обострения и артериальной гипертензии, обусловленной хроническим пиелонефритом.

Сущность изобретения; регистрируют величину активности каталазы или супероксиддисмутазы эритроцитов. Способ позволяет упростить, ускорить и обезопасить процесс дифференциальной диагнонием и центрифугированием по 5 мин при

2000 об/мин). После второго центрифугирования надосадок сливается, Для определения активности каталаэы 0,1 мл промытой д эритромассы гемолизируют дистиллирован- Q) ной водой и получают гемолизат разведения

1: 2000 0,1 мл полученного гемолизата переносится в пробирку, доводится 0,05М

Трис-HCI буфером рН 7,4 до 1 мл, прибавля- Ф ется 2 мл 0,03 Н202 и инкубируется в тер- О мостате при 25 С в течение 10 мин, После 4 инкубации вносится 2 мл 4 раствора молибдата аммония. Полученную пробу спектрофотометрируют при длине волны 410 нм.

Экстинцию опытной пробы сравнивают с экстинцией контрольной пробы, которую получают таким же образом, только 0,1 мл гемолизата добавляется в пробирку после инкубации в термостате, непосредственно перед добавлением молибдата аммония. По разнице между экстинциями контрольной и опытной проб судят о величине каталазной

1812497 активности. Расчеты производят, исходя из коэффициента миллимолярной экстинции перекиси водорода, и результаты выражают в мМ инактивироаанной НгОг 1 л эритромассы за 1 сек. 5

Для определения активности СОД брали 0,1 мл отмытой эритромассы при подготовке эритроцитов для исследования СОД в системе феназинметасульфат-НАД Н-нитросиний тетразолий. Эти 0,1 мл отмытой 10 эритромэссы гемолизируют и разбавляют

0,9 мл 5 мМ трис-HCI буфера (рН 7,4), переносят в центрифужную пробирку, добавляют 0,25 мл этанола, 0,15 мл хлороформа и

0,6 r кристаллического КНгРО4. Все это пе- 15 ремешивается стеклянной палочкой в течение 15 мин, выдерживается в холодильнике при 4ОС 30 мин и центрифугируется при

5000 об/мин 15 мин. Затем, отбирается надосадочная жидкость, В пробирку последо- 20 вательно вносят 1,7 мл фосфатного буфера (0,15 М, рН 7,8), 2 мл раствора нитросинего тетразолия (0,01 г на 100 мл 0,15 M фосфатного буфера, рН 7,8); 0,5 мл раствора феназинметасульфата (0,003 r на 150 ил 0,15 M 25 фосфатного буфера, рН 7,8), 0,1 мл надосадочной жидкости и 0,9 мл раствора НАД.Н (0,01 г на 24 мл 0,15 M фосфатного буфера, рН 7,8). Содержимое перемешивали стеклянной палочкой, и пробирку помещали-в 30 темноту и термостатировали при 25ОС в течение 10 мин. После чего, сразу нэ фотоэлектроколориметре при длине волны 540 нм определяли величину экстинции и сравнивали с экстинцией контрольной пробы,,ко- 35 торую получали таким же образом, только в пробирку не вносили надосадочную жидкость. 0 величине активности СОД судят по разнице экстинций контрольной и опытной проб и выражают а процентах {от экстинции 40 контрольной. пробы), При рассмотрений изучаемых показателей в исследуемых группах больных было выявлено, что у 90$ больных ГБ активность каталазы составила от 165 мМ НгОг/л с до 45

235 ММ НгОг/л.с, тогда кэк у 90 больных

ХП этот показатель находился в пределах

239-303 мМ Нг0г/л с. Активность СОД от

32$, до 44 отмечена у 90,5 больных ГБ, а от 48 до 63 - у 92.57 больных ХП.

П р и и е р 1, Больной M„47 лет, был впервые госпитализирован в терапевтическое отделение по поводу повышения артериального давления (АД) для стационарного лечения и обследования. Диагноз при по- 55 ступлении: гипертоническая болезнь?, симптоматическая (почечная) гипертензия?.

При исследовании антиоксидантных

-ферментов обнаружено: активность каталазы составила 183 мМ НгОг/л с, активность

СОД-32 . На основании этих данных было высказано мнение о наличии у больного гипертонической болезни.

При проведении в дальнейшем комплексного клинического и лабораторно-инструментального исследования больного диагноз гипертонической болезни И стадии (криз) был подтвержден.

Пример 2. Больная Г., 50 лет, была госпитализирована в терапевтическое отделение с предварительным диагнозом: гипертоническая болезнь?

При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: активность каталазы составила 165 мМ НгОг/л с, активность

СОД-34 ) . Был сделан вывод о наличии у больной гипертонической болезни, В дальнейшем комплексное и лабораторно-инструментальное исследованив подтвердили диагноз: гипертоническая болезнь И стадии, криз.

Пример 3. Больная М., 45 лет, была направлена на стационарное лечение и обследование с предварительным диагнозом: хронический пиелонефрит в гипертензивной стадии .

При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: активность каталазы составила 220 мМ НгОг/л с, активность

СОД-40/, На основании этих данных был сделан вывод о наличии у больной гипертонической болезни.

В дальнейшем при динамическом наблюдении и проведении комплексного лабораторно-инструментальногЬ исследования диагноз хронического пиелонефрита

6bm снят, Окончательный диагноз: гиперто:ническая болезнь И стадии, кризовое течение.

Пример 4, Больная Л., 43 года, постуdna а терапевтическое отделение по поводу повышенного АД, Диагноз при поступлении; гипертоническая болезнь И стадии, криз, При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено; активность каталазы составилэ 27з мМ НгОг/л с. активность

СОД-40 . Полученные данные позволили сделать вывод о наличии у больной гипертонической болезни.

При проведении комплексного клинического и лабораторно-инструментального исследования диагноз гипертонической болезни II стадии (криз) был подтвержден.

Пример 5. Больной С,, 50 лет, впервые был госпитализирован в терапевтическое отделение по поводу повышения АД. Диаг1812497 ноз при поступлении: гипертоническая бо- Пример 9. Больная С., 46 лет, лезнь 11 стадии, криз. поступила в терапевтическое отделеПри исследовании антиоксидантных ние с диагнозом: хронический пиелонефферментов обнаружено; активность катала- рит, гипертензивная стадия. зы составила 230 мМ HzOz/л с, активность 5 При исследовании антиоксидантных

СОД-44 Был сделан вывод о наличии у ферментов обнаружено: активность каталабольного гипертонической болезни. зы составила 285 MM Нг02/л с, активность

В дальнейшем комплексное клиниче- СОД вЂ” 63 . Был сделан вывод о наличии у с кое и лабораторно-инструментальное больной хронического пиелонефрита. исследование подтвердили диагноз; ги- 10 В дальнейшем на основании комплекспертоническая болезнь Н стадии, криз. ной оценки клиники и данных лабораторноПример 6. Больная К., 49 лет, была инструментального исследования диагноз направлена на стационарное лечение и об- хронического пиелонефрита (гипертензивследование по поводу повышенного АД. Ди- ная стадия) был подтвержден. агноэ при поступлении: гипертоническая 15 Пример 10. У служащего Н., 39 лет, болезнь?, хронический пиелонефрит, симп- при проведении профосмотра определена томатическая гипертензия? активность антиоксидантных ферментов.

При исследовании антиоксидантных Обследуемыйздоров,самостоятельнозаниферментов обнаружено: активность катала- мается спортом. Активность каталазы состазы составила 239 мМ НгО /л с, активность 20 вила 310 MM Н Ор/л с, активность

СОД вЂ” 48 . На основании этих данных был СОД вЂ” 66 . Таким образом, отсутствие гисделан вывод о наличии у больной хрониче- пертонической болезни было подтверждеского пиелонефрита. но.

При комплексном клиническом и лабо- Таким образом, разработанный способ раторно-инструментальном исследовании 25 дифференциальной диагностики ГБ и ХП в диагноз хронического пиелонефрита (ги- гипертензивной стадии позволяет сокрапертензивная стадия) был подтвержден, тить время (Ro сравнению с прототипом)

Пример 7. Больной Р., 41 год, посту- проведения методики в 11,3 раза при опрепил в терапевтическое отделение с предва- делении активности каталазы и — в 3,8 раза рительным диагнозом: гипертоническая 30 при определении активности СОД. Значиболезнь И стадии, криз. тельно сокращается количество трудоемПри исследовании антиоксидантных ких операций, таких как получение ферментов обнаружено: аткивность катала- мембран, экстрагирование липидов. Крозы составила 260 мМ HzOz/л с, активность ме того, устраняется влияние токсичных

СОД-53; . На основании полученных дан- 35 веществ(гептан, серная кислота по Саваных был сделан вывод о наличииубольного лю) и необходимость дополнительных расартериальной гипертензии, обусловленной четов (вычисление диагностического хроническим пиелонефритом. коэффициента). Предлагаемый способ являПри комплексном клиническом и лабо- ется простым, надежным и доступным для раторно-инструментальном исследовании 40 обычной клинико-биохимической лаборатодиагноз хронического пиелонефрита (ги- рии, при этом точность диагностики в сравпертензивная стадия) был подтвержден. нении с известным способом не снижается.

Пример 8, Больной И„38 лет, Формула изобретения поступил в терапевтическое отделение Способ дифференциальной диагнодля лечения и обследования по поводу по- 45 стики гипертонической болезни и артевышенного.АД. Диагноз при поступлении: риальной гипертензии, обусловленной гипертоническая болезнь? хроническим пиелонефритом, включающий

При исследовании антиоксидантных отбор венозной крови, получениеэритроциферментов обнаружено: активность катала- тов и их биохимический анализ, о т л и ч а юзы составила 303 мМ Н О /л с, активность 50 щи и с я тем, что, с целью упрощения споСОД вЂ” 58$. На основании этих данных было соба эа счет сокращения трудоемких операвыскаэано мнение о наличии у больного ций, проводят гемолиз эритроцитов, в хронического пиелонефр та, гемолизате определяют активность каталаВ дальнейшем при динамическом на- зы или супероксиддисмутазы и при активноблюдении и проведении комплексного 55 сти каталазы 165-235 мМ НгО /л.с или лабораторно-инструментального иссле- суперксиддисмутазы 32 — 44 стенки ингидования диагнозгипертоническойболезни бирования восстановления нитросинего был снят. Окончательный диагноз; хрониче- тетразолиевого диагностируют гипертониский пиелонефрит, гипертензивная стадия. ческую болезнь, а при активности каталазы

1812497 B

Составитель. В. Нескромный

Техред М. Моргентал . Корректор Л. Филь

Редактор

Заказ 1573 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r, Ужгород, ул.Гагарина, 101

239-303 мМ НэОэ/л с или супероксиддисмутаэы 48-63 артериальную гипертониэию, обусловленную хроническим пиелонефритом.