N-циано-n'-пиридилгуанидины, или их n-оксиды, или их фармацевтически приемлемые нетоксичные соли, способы их получения, фармацевтическая композиция и способ ингибирования пролиферации опухолевых клеток

 

N-циано-N'-пиридилгуанидины формулы I, где R, R', R'' - водород или галоген; С_1-8-алкилен, возможно замещенный гидроксилом; Х - кислород, -S(O)_n-, n = 1 или 2, или NН; его таутомерные формы, или их N-оксиды, или их фармацевтически приемлемые нетоксичные соли, являются антагонистами серотонина (5НТ), а некоторые из них подавляют разрастание опухолевых клеток. 7 с. и 10 з.п.ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к ряду соединений, их фармацевтически приемлемым солям и их N-оксидам, к способам получения упомянутых соединений, солей или N-оксидов, к лекарственным препаратам, содержащим упомянутые соединения, дозированным единицам лекарственных препаратов и к методам лечения больных, в которых используют упомянутые препараты и дозированные единицы.

Новые соединения или их таутомерные формы, которые пригодны при лечении человека и в ветеринарии, имеют общую формулу (I): при этом присоединение к пиридиновому кольцу осуществляют в 3- или 4-положении, в котором R', R'' являются одинаковыми или разными и означают водород, галоген или трифторметил, гидрокси, C₁-C₄-алкил или алкокси, нитро или цианогруппы. Алкилен означает прямую или разветвленную C₁-C₈-углеводородную цепь, которая может быть замещена гидрокси или галогеном, нитро или цианогруппами.

X - означает кислород, - S(O)_n-, где n означает целое число от 0 до 2, или =N-R₁, где R₁ является водородом: или C₁-C₄-алкилом.

R - означает водород или один или несколько C₁-C₄-алкильных или алкокси, гидрокси, галогеновых, трифторметильных, циано-, карбоксамидо, сульфамоил или нитрорадикалов.

В случае, когда настоящие соединения содержат один или несколько асимметричных углеродных атомов, эти соединения могут образовывать оптические изомеры или диастереоизомеры. Настоящее изобретение также включает такие изомеры и их смеси.

Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы I включают гидрохлориды, гидробромиды, фосфаты, сульфаты, нитраты, арилсульфонаты, цитраты, тартраты, малоаты, эти примеры следует рассматривать как но ограничивающие изобретение.

Предпочтительными соединениями изобретения являются такие соединения формулы I, в которых присоединение к пиридиновому кольцу находится в 4-иоложении, и/или в которых алкилен означает прямую C₃-C₆ углеводородную цепь, и/или в которых X означает кислород.

N-алкил-N-циано-N-пиридилгуанидины, описанные в патенте Великобритании N 1489879, являются сильнодействующими активаторами (возбудителями) калиевого канала с резко выраженным действием, которые в качестве продкапиллярных вазодилататоров уменьшают общее периферическое сопротивление сосудов у животных и человека и являются, таким образом, пригодными в качестве гипотензивных средств. Введение арилоксисодержащих радикалов в алифатические группы цитированного патента привело к структурам, проявляющим более специфическое фармакологическое воздействие на отдельные ткани и клетки, не оказывающим или оказывающим незначительное действие на отток ⁸⁶Rb из калиевых каналов по сравнению с установленным воздействием соединений, защищенных вышеупомянутым патентом Великобритании. Среди соединений, представленных формулой (I) настоящего изобретения, некоторые неожиданно оказались антагонистами серотонина (5HT), как было наглядно показано на отдельных полосках дна органа крысы и отеками лапы крысы, вызванными 5НТ, что делает эти соединения потенциально пригодными для лечения заболеваний, при которых 5НТ вовлечен в патологическую реакцию, например, астмы, аллергии и нарушений CNS.

Для изучения сродства настоящих соединений к рецепторам серотонина₂ (5НТ) определяли подавление связывания [³H]кетансерина в специфические рецепторы 5НТ₂ на кортикальных оболочках крысы с помощью метода, описанного в Leysen et al: [³H] Кeтансерин: селективный меченый тритием лиганд для участков связывания серотонинового₂ рецептора. Молекулярная фармакология 21: 301-314 (1982). Результаты представлены в таблице 1.

Эти результаты показывают, что соединения настоящего изобретения подавляют связывание кетансерина в 5НТ₂ рецепторы и, следовательно, обладают высоким сродством к таким рецепторам.

Некоторые представители настоящего класса также подавляют разрастание опухолевых клеток при культивировании и продлевают продолжительность существования крыс, имеющих опухоль, что делает их потенциально полезными в противоопухолевой химиотерапии.

Подавление разрастания опухолевых клеток изучали при использовании саркомовых клеток Yoshida, первоначально производных от печеночных опухолей крысы, вызванных канцерогеном о-аминоазотолуолом.

Клетки культивировали in vitro в течение 24-х часов в присутствии исследуемого соединения. Синтез DNA оценивали путем включения [³H] тимидина и вычисляли среднюю угнетающую концентрацию [IC₅₀] соединений.

Цитотоксичность соединений в нормальных лимфоцитах оценивали методом, исключающим краситель, и выражали в виде концентраций, в результате использования которых получали 50% жизнеспособность (VC₅₀). Результаты показаны в таблице 2.

Подобно были получены многообещающие результаты in vitro при использовании множества человеческих раковых клеток. Результаты показали, что соединения настоящего изобретения способны подавить разрастание опухолевых клеток in vitro при концентрациях, которые приблизительно в 100 раз меньше концентраций, которые являются цитотоксическими для нормальных клеток.

Продление существования крыс, имеющих опухоль, изучали на инбредных самках крыс, зараженных саркомовыми клетками Yoshida (идентичными клеткам, описанным выше) в количество 2·10⁷ клеток. Крысам, имеющим опухоль, дозировали перорально один раз в день в течение от одного до трех дней после передачи опухолевых клеток и до смерти или до тех пор, пока масса тола увеличивалась на 10% вследствие разрастания опухоли. Время, потребное для смерти 50% животных, оценивали линейным регрессионным анализом. Результаты показаны в таблице 3.

Эти результаты показывают, что соединения настоящего изобретения способны продлевать продолжительность существования крыс, имеющих саркомовую опухоль Yoshida.

Антагонистическое воздействие соединений изобретения на 5НТ можно сравнить с желательным противорвотным воздействием, компенсирующим известное рвотное воздействие других противоопухолевых средств, которые можно использовать в сочетании с соединениями настоящего изобретения.

Соединения изобретения хорошо переносятся, нетоксичны, благотворно влияют на активность, при этом но оказывают воздействия или оказывают минимальное воздействие на общее кровяное давление.

В общем, их можно вводить перорально, внутривенно, интраперитонеально, через нос или внутрикожно.

Настоящее изобретение также относится к способам получения желательных соединений формулы (I).

По одному варианту пиридилкарбодиимид формулы (II),
в которой заместители являются такими, как они определены выше в формуле (I), взаимодействует с эквивалентным количеством или избытком цианамида при использовании или без использования обычного инертного растворителя при комнатной или близко к комнатной температуре. Реакцию можно катализировать основаниями, например триэтиламином. По другому варианту тиомочевина формулы (III),

в которой заместители являются такими, как они определены выше в формуле (I), взаимодействует с одним или несколькими эквивалентами N,N-дициклогексилкарбодиимида (DCCD) и цианамида в инертном растворителе, например ацетонитриле, при комнатной или выше комнатной температуре, что приводит к выходу соединения формулы (I) и N,N'-дициклогексилтиомочевины (DCTU). Может быть использован основной катализатор, например триэтиламин.

По еще одному варианту соединение формулы (IV),

в которой заместители R' и R'' являются такими, как они определены выше, а Y является галогеном, предпочтительно хлором, или C₁-C₄-алкилтиорадикалом, взаимодействует с соответствующим амином где символы имеют те же самые значения, что и в формуле (I). Амин можно использовать в избытке в инертном растворителе, например пиридине, при комнатной температуре или выше комнатной температуры, например в кипящем пиридине. В случае, когда Y означает галоген, может быть предпочтительным использование эквивалента агента, связующего кислоту, например третичного амина.

По еще одному варианту соединение формулы (V),

в которой заместители являются такими, как они определены выше, взаимодействует с эквивалентным или слегка избыточным количеством необходимого амина, , где символы имеют те же самые значения, что и в формуле (I), в присутствии одного эквивалента или чуть большего количества DCCD в инертном растворителе, например диметилформамиде, при 0^oC или при комнатной температуре, что приводит к образованию соединения (I) и DCTU.

В способах, описанных выше, по желанию может быть получен стереоизомер формулы (I) при использовании соответствующего изомера соответственного амина, , где символы имеют то же самые значения, что и в формуле (I), в качество исходного вещества.

Альтернативно может быть использован рацемический исходный материал, тогда полученную смесь можно подвергнуть повторному растворению рацемата, например путем кристаллизации соответствующей соли с оптически активной кислотой или путем хроматографии в асимметричной колонке.

Соединения формулы (II) могут быть получены из необходимой тиомочевины (III) или соответствующей мочевины обычными методами, например путем обработки трифенилфосфином, тетрахлорид-углеродом и триэтиламином в сухом метиленхлориде.

Соединения формулы (IV) можно получить путем взаимодействия цианамида с соответствующим пиридилизотиоцианатом в присутствии третичного амина и затем обработкой C₁-C₄-алкилиодидом, в том случае, когда Y означает C₁-C₄-алкилтиорадикал. Когда Y означает галоген, соединения (IV) могут быть получены путем взаимодействия соединения формулы (V), например, с фосгеном в инертном растворителе в присутствии третичного амина.

Исходные вещества формулы (V) можно получить из необходимых пиридилизотиоцианатов и цианамида, используя один эквивалент третичного амина, в инертном растворителе. Альтернативно, пиридилдитиокарбаминовая кислота, например 4-пиридилтиокарбаминовая кислота, может провзаимодействовать с по крайней мере двумя эквивалентами цианамида и одним эквивалентом третичного амина, например в метаноле, для выхода аминовой соли желательной пиридилцианиминотиокарбаминовой кислоты (V).

N- и S -оксиды формулы (I) могут быть удобно получены окислением исходных соединений, например m-хлорпербонзойной кислотой, в инертном растворителе, например хлороформе.

Еще одной целью настоящего изобретения является обеспечение лекарственных препаратов (I), которые являются пригодными для лечения вышеупомянутых заболеваний.

Необходимое количество соединения формулы (I) (в дальнейшем упоминаемого как активный ингредиент) для терапевтического воздействия будет, конечно, изменяться в зависимости от особенностей соединения, способа введения и млекопитающего, подвергнутого лечению. Подходящая доза соединения формулы (I) для системного лечения составляет от 0,1 до 400 мг на килограмм веса тела, наиболее предпочтительная доза составляет от 0,1 до 100 мг на кг веса тела млекопитающего, например от 5 до 20 мг/кг, при этом ее вводят один или несколько раз в день.

Термин "дозированная единица" означает унитарную, т.е. разовую дозу, которую можно вводить больному и с которой можно легко обращаться и легко упаковывать, при этом она остается в виде физически и химически устойчивой унифицированной, включающей или активный материал, как таковой, или смесь его с твердыми или жидкими лекарственными разбавителями, или носителями.

Препараты настоящего изобретения для ветеринарии и лечения человека содержат активный ингредиент в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем и возможно другим(и) лечебным(и) ингредиентом(ами). Носитель(и) должен(ны) быть "приемлемым" в смысле совместимости с другими ингредиентами препарата и но должен быть вредным для реципиента.

Препараты заключают в форму, подходящую для перорального, ректального, парентерального введения (включая подкожное, внутримышечное, внутривенное и интраперитонеальное введение).

Препараты могут подходяще присутствовать в форме дозированной единицы и могут быть получены любым из способов, хорошо известных в области фармации. Все способы включают стадию приведения активного ингредиента в ассоциацию с носителем, который состоит из одного или нескольких добавочных ингредиентов. В общем, препараты получают путем однородного и равномерного приведения активного ингредиента в ассоциацию с жидким носителем или тонко измельченным твердым носителем, или с тем и другим, и затем, если необходимо, путем формования продукта в желательный препарат.

Препараты настоящего изобретения, подходящие для перорального введения, могут быть в форме дискретных единиц, например капсул, таблеток или лепешек, каждая из которых содержит предварительно определенное количество активного ингредиента; в форме порошка или гранул; в форме раствора пли суспензии в водной жидкости или неводной жидкости, или в форме эмульсии "масло в воде" или эмульсии "вода в масле". Активный ингредиент можно также вводить в форме шариков, лекарственной кашки пли пасты.

Таблетку можно получить путем прессования пли формования активного ингредиента возможно с одним или несколькими добавочным(и) ингредиентом(ами). Прессованные таблетки можно получить путем прессования в подходящем прессе активного ингредиента в свободнотекучей форме, например порошка или гранул, возможно смешанных со связующим, смазкой, инертным разбавителем, поверхностно-активным веществом или диспергирующим веществом. Формованные таблетки можно получить путем формования в подходящей машине смеси порошкового активного ингредиента и соответствующего носителя, увлажненного инертным жидким разбавителем.

Препараты для ректального введения могут быть в форме суппозитория, включающего активный ингредиент и носитель, например масло какао, или в форме клизмы.

Препараты, подходящие для парентерального введения, подходяще включают масляный или водный состав активного ингредиента, который предпочтительно является изотоническим с кровью реципиента.

Помимо вышеупомянутых ингредиентов составы этого изобретения могут включать один или несколько дополнительных ингредиентов, например разбавителей, буферов, веществ, улучшающих вкус, связующих, поверхностно-активных веществ, сгустителей, смазок, консервирующих средств, например метилоксибензоат (включая антиоксиданты), эмульгаторов и т.п.

Составы могут, кроме того, содержать другие терапевтически активные соединения, обычно используемые при лечении вышеупомянутых патологических состояний, например антиастматические средства и противоопухолевые средства, которые могут привести к синергическому воздействию на опухолевые клетки.

В соответствии с изобретением настоящие соединения вводят больному, страдающему от одного из вышеупомянутых патологических состояний, суточной дозой (для взрослого человека) от 7 до 28000 мг, предпочтительно от 70 до 7000 мг, и в ветеринарной практике соответственно суточной дозой, составляющей от 0,1 до 400 мг/кг веса тела.

Далее изобретение будет описано в последующих неограничительных примерах.

Пример 1.

N-циано-N'-(3-феноксипропил)-N''-3-пиридилгуанидин
N-(3-феноксипропил)-N'-3-пиридилтиомочевину (1,73 г) суспендировали в ацетонитриле (10 мл) и добавили цианамид (0,50 г) и N,N''-дициклогексилкарбодиимид (2,47 г), затем триэтиламин (0,14 мл).

Смесь держали при перемешивании при комнатной температуре в течение 3-х дней, затем ее отфильтровали, промыли ацетонитрилом и простым эфиром до получения твердой смеси сырого продукта и N,N'-дициклогексилтиомочевины, которую удалили экстракцией хлороформом (25 мл). Продукт собрали фильтрацией и промыли хлороформом.

Затем осуществили очистку путем растворения полученного остатка в 0,5N соляной кислоте (20 мл), фильтрации и переосаждения с помощью 9 N гидроксида натрия. Точка плавления 180^o-187^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала) 1.99 (m, 2Н), 3.42 (m, 2Н), 4.02 (t, 2Н), 6.93 (m, 3H), 7.27 (m, 2Н), 7.36 (dd, 1H), 7.51 (bt, 1H), 7.67 (m, 1H), 8.34 (m, 1H), 8.47 (m, 1H), 9.15 (bs, 1Н).

Пример 2.

N-циано-N'-(2-фeнилaминoэтил)-N''-4-пиpидилгуaнидин.

N-циано-N'-4-пиридилтиомочевину (1,80 г) суспендировали в диметилформамиде (5 мл). При перемешивании в бане со льдом добавили N-фенилэтилендиамин (1,4 мл) и N,N'-дициклогексилкарбодиимид (2,50 г), что привело к получению прозрачного раствора. Смесь оставили при комнатной температуре на 3 дня, когда образовалась суспензия, ее выпарили под высоким вакуумом. Остаток повторно растерли в порошок с простым эфиром (порции 15 мл) и остаточное твердое экстрагировали 1N соляной кислотой (50 мл). После фильтрации из фильтрата путем добавления 9 N гидроксида натрия и переноса в этилацетат (3х75 мл) осадили сырой продукт.

После выпаривания объединенных экстрактов этилацетата остаток перемешали со смесью ацетона и простого эфира при соотношении компонентов в смеси 1:1 до получения чистого соединения. Точка плавления: 167-170^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 3.23 (m, 2Н), 3.44 (m, 2Н), 5.72 (bt, 1Н), 6.54 (t, 1Н), 6.60 (d, 2Н), 7.08 (dd, 2H), 7.21 (d, 2Н), 7.86 (bs, 1Н), 8,37 (m, 2Н), 9.48 (bs, 1Н).

Пример 3.

N-циано-N'-(I-фeнокси-2-пропил)-N''-пиридилгуанидин
N-(1-фенокси-2-пропил)-N'-4-пиридилкарбодиимид (2,53 г) растворили в простом эфире (5 мл). Добавили цианамид (0,55 г) и триэтиламин (0,04 мл) и смесь оставили при перемешивании на всю ночь в открытой колбе при комнатной температуре.

Отверженный остаток перемешали с простым эфиром (20 мл) и суспензию отфильтровали в промыли простым эфиром до получения сырого продукта, который растворили в 0,5N соляной кислоте (30 мл), отфильтровали и переосадили путем добавления 9N гидроксида натрия, затем собрали фильтрацией и промыли водой до получения чистого соединения. Точка плавления: 164^o-166^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 1.24 (d, 3H), 4.01 (d, 2Н), 4.31 (m, 1H), 6.97 (m, 3H), 7.20 (bs, 2Н), 7.31 (dd, 2Н), 7.96 (bd, 1Н), 8.35 (bs, 2Н), 9.58 (bs, 1Н).

Пример 4.

N-циано-N'-(2-фенилтиоэтил)-N''-3-пиридилгуанидин
S-метил-N-циано-N'-пиридилизотиомочевину (1,92 г) растворили в пиридине (10 мл) и добавили 2-фонилтиоэтиламин (3,06 г). Смесь оставили при комнатной температуре на 4 дня, затем ее выпарили в вакууме. Остаток растерли в порошок с простым эфиром (40 мл) и полученную суспензию отфильтровали и промыли простым эфиром.

Сырой продукт очистили путем растворения в избытке 0,5N соляной кислоты, фильтрации и осаждения путем добавления к водному фильтрату 9N гидроксида натрия.

Точка плавления: 126^o-128^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 3.14 (m, 2Н), 3.42 (m, 2Н), 7.20 (m, 1Н), 7.35 (m, 5Н), 7.57 (bt, 1Н), 7.67 (m, 1Н), 8.36 (m, 1Н), 8.47 (m, 1Н), 9.25 (bs, 1Н).

Пример 5.

N-циано-N'-(3-феноксипропил)-N''-пиридилгуанидин
Следуя процедуре примера 1, но при замещении N-(3-феноксипропил)-N'-пиридилмочевины на N-(3-феноксипропил)-N'-4-пиридилтиомочевину, получили желаемое соединение.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 2.00 (m, 2Н), 3.45 (q, 2Н), 4.03 (t, 2Н), 6.93 (m, 3H), 7.21 (bd, 2Н), 7.28 (m, 2Н), 7.91 (bt, 1Н), 8.37 (bd, 2Н), 9.43 (очень b, 1Н),
Пример 6.

N-циано-N'-(2-феноксиэтил)-N''-3-пиридилгуанидин
Следуя процедуре примера 1, но при замещении N-(3-феноксипропил)-N'-3-пиридилтиомочевины на N-(2-феноксиэтил)-N'-3-пиридилтиомочевину, получили желаемое соединение.

Точка плавления: 182^o-184^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 3.62 (m, 2Н), 4.11 (t, 2Н), 6.96 (m, 3H), 7.31 (m, 2Н), 7.37 (dd, 1Н), 7.60 (bt, 1Н), 7.67 (m, 1Н), 8.35 (m, 1Н), 8.48 (m, 1Н), 9.25 (bs, 1Н).

Пример 7.

N-циано-N'(2-феноксиэтил)-N''-4-пиридилгуанидин
Следуя процедуре примера 1, но при замещении N-(3-феноксипропил)-N''-3-пиридилтиомочевины на N-(2-феноксиэтил)-N'-4-пиридилтиомочевину, получили желаемое соединение. Точка плавления: 167^o-170^oC.

Точка плавления: 167^o-170^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 3.67 (m, 2Н), 4.13 (t, 2Н), 6.95 (m, 3H), 7.24 (m, 2Н), 7.30 (dd, 2Н), 8.04 (bs, 1Н), 8.38 (m, 2Н), 9.55 (bs, 1Н).

Пример 8.

N-циано-N'-(1-фенокси-2-пропил)-N''-3-пиридилгуанидин
Следуя процедуре примера 1, но при замещении N-(3-феноксипропил)-N'-3-пиридилтиомочевины на N-(1-фенокси-2-пропил)-N'-3-пиридилтиомочевину, получили желаемое соединение.

Точка плавления: 130^o-133^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 1.23 (d, 3H), 3.98 (m, 2Н), 4.29 (m, 1Н), 6.97 (m, 3H), 7.30 (m, 2Н), 7.34 (dd, 1Н), 7.45 (bd,1Н), 7.65 (m, 1Н), 8.31 (m, 1Н), 8.46 (m, 1H), 9.25 (bs, 1H).

Пример 9.

N-циано-N'-(2-фенилтиоэтил)-N''-4-пиридилгуанидин
Следуя процедуре примера 1, но при замещении N-(3-феноксипропил)-N'-3-пиридилтиомочевины на N-(2-фенилтиоэтил)-N'-4-пиридилтиомочевину, получили желаемое соединение.

Точка плавления: 161^o-163^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 3.17 (m, 2Н), 3.46 (m, 2Н), 7.21 (m, 3H), 7.35 (m, 4Н), 8.00 (bs, 1Н), 8.39 (d, 2Н), 9.56 (bs, 1H).

Пример 10.

N-(3-p-хлорфенокси-2-гидроксипропил)-N'-циано-N''-4-пиридилгуанидин
Следуя процедуре примера 2, но при замещении N-фенилэтилендиамина на 3-p-хлорфенокси-3-гидроксипропиламин, получили желаемое соединение.

Точка плавления: 149^o-151^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 3.45 (m, 3H), 3.96 (m, 3H), 6.96 (d, 2Н), 7.28 (m, 4Н), 7.76 (bt, 1Н), 8.37 (d, 2Н), 4.5-10.5 (очень b, 1Н).

Пример 11.

N-(2-p-хлорфеноксиэтил)-N'-циано-N''-3-пиридилгуанидин
N-(2-p-хлорфеноксиэтил)-N'-3-пиридилтиомочевину (1,05 г) суспендировали в ацетонитриле (10 мл) и добавили цианамид (285 мг), N,N'-дициклогексилкарбодиимид (1,40 г) и триэтиламин (0,04 мл). Смесь поддерживали при перемешивании при комнатной температуре в течение недели, затем ее отфильтровали, промыли ацетонитрилом и простым эфиром. Твердую смесь сырого продукта и N, N'-дициклогексилтиомочевину экстрагировали хлороформом (15 мл) до получения чистого продукта, который собрали фильтрацией и промыли хлороформом в простым эфиром.

Точка плавления: 174^o-176^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 3.61 (bs, 2Н), 4.10 (t, 2Н), 7.00 (d, 2Н), 7.35 (d, 2H), 7.37 (m, 2Н), 7.37 (m, 1H), 7.59 (bs, 1H), 7.66 (m, 1Н), 8.34 (dd, 1Н), 8.47 (d, 1Н), 9.25 (bs, 1Н).

Пример 12.

N-(2-p-хлорфеноксиэтил)-N'-циано-N''-4-пиридилгуанидин
Следуя процедуре примера II, но при замещении 3-пиридиланалога на N-(2-p-хлорфеноксиэтил)-N'-4-пиридилтиомочевину, получили желаемое соединение.

Точка плавления: 174,5^o-177^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 3.66 (bt, 2Н), 4.13 (t, 2Н), 6.99 (d, 2Н), 7.22 (bd, 2Н), 7.34 (d, 2Н), 8.01 (bs, 1Н). 8.38 (d, 2Н), 9.57 (bs, 1Н).

Пример 13.

N-циано-N'-(4-феноксибутил)-N'-3-пиридилгуанидин
N-(4-феноксибутил)-N'-3-пиридилтиомочевину (1,41 г) растворили в ацетонитриле (10 мл) и добавили цианамид (400 мг), N,N'-дициклогексилкарбодиимид (1,95 r) и триэтиламин (0,08 мл). Смесь оставили на 3 дня при комнатной температуре, затем ее отфильтровали, промыли ацетонитрилом и простым эфиром до получения твердой смеси сырого продукта и N,N'-дициклогексилтиомочевины. Чистое соединение получили путем экстракции смеси 0,5 N соляной кислотой (16 мл), фильтрования и переосаждения добавлениям к фильтрату 9N гидроксида натрия.

Точка плавления: 137,5^o-138^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 1.71 (m, 4Н), 3.30 (q, 2H), 3.98 (t, 2Н), 6.92 (m, 3H), 7.28 (m, 2Н), 7.37 (dd, 1H), 7.48 bt, 1H), 7.67 (bd, 1Н), 8.34 (dd, 1H), 8.47 (d, 1H), 9.10 (bs, 1Н).

Пример 14.

N-циано-N'-(4-феноксибутил)-N''-4-пиридилгуанидин
Следуя процедуре примера 13, но при замещении 3-пиридиланалога на N-(4-феноксибутил)-N'-4-пиридилтиомочевину, получили желаемое соединение.

Точка плавления: 131^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 1.72 (m, 4Н), 3.34 (m., 2Н), 3.99 (t, 2Н), 6.92 (m, 3H), 7.22 (bs, 2Н), 7.27 (m, 2Н), 7.90 (bt, 1Н), 8.38 (bd, 2H), 9.42 (bs, 1Н).

Пример 15.

N-(5-бром-3-пиридил)-N'-циано-N''(2-фенилтиоэтил)гуанидин
S-метил-N-(5-бром-3-пиридил)-N'-цианизотиомочевину (650 мг) и 2-фенилтиоэтиламин (740 мг) в пиридине (0,5 мл) нагревали до 50^oC в течение 5 часов. К полученному прозрачному раствору добавили простой эфир (10 мл) и желаемое чистое соединение собрали фильтрацией и промыли простым эфиром.

Точка плавления: 168^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 3.16 (t, 2Н), 3.43 (bs, 2Н), 7.20 (m, 1Н), 7.35 (m, 4Н), 7.77 (m, 1Н), 7.96 (t, 1Н), 8.47 (t, 2Н), 9.34 (bs, 1Н).

Пример 16.

N-циано-N'-(2-фенилтиоэтил)-N''-3-пиридилгуанидин, S-оксид
N-циано-N'-(2-фенилтиоэтил)-N''-3-пиридилгуанидин (пример 4) (595 мг) суспендировали в хлороформе (40 мл) и порциями в течение 15 минут добавили m-хлорпербензойную кислоту (520 мг) при 0^oC и перемешивании. Полученный прозрачный раствор выпарили в вакууме и остаток перемешали с простым эфиром (50 мл), отфильтровали и промыли простым эфиром до получения сырого продукта. Тонкослойной хроматографией в силикагельной колонке при использовании в качестве элюента смеси метиленхлорида и метанола при их соотношении в смеси 90:10 получили чистое соединение. Точка плавления: 167,5^oC.

ЯМР: (DMSO; δ-шкала): 3.00 (m, 1Н), 3.24 (m, 1Н), 3.45 (m, 1Н), 3.58 (m, 1Н), 7.39 (dd, 1Н), 7.47-7.75 (m 7H), 8.36 (dd, 1Н), 8.47 (d, 1Н), 9.32 (bs, 1H).

Пример 17.

N-циано-N'-(2-фенилтиоэтил)-N''-4-пиридилгуанидин, S-оксид.

Следуя процедуре примера 16, но при замещении 3-пиридиланалога на N-циано-N'-(2-фенилтиоэтил)-N''-пиридилгуанидин (пример 9), получили желаемое соединение.

Точка плавления: 166,5^o-167^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 3.05 (m, 1Н), 3.27 (m 1Н), 3.50 (m, 1Н), 3.63 (m, 1H), 7.21 (m, 2Н), 7.60 (m, 3H), 7.70 (m, 2Н), 7.95 (m, 1Н), 8.40 (m, 2Н), 9.66 (m, 1Н).

Пример 18.

N-циано-N'(5-феноксипентил)-N''-4-пиридилгуанидин
Следуя процедуре примера 14, но при замещении N-(4-феноксибутил)- N'-4-пиридилтиомочевины на N-(5-феноксипентил)-N'-4-пиридилтиомочевину, получили желаемое соединение.

Точка плавления: 188^o-189^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 1.46 (m, 2Н), 1.59 (m, 2Н), 1,74 (m, 2Н), 3.31 (m, 2Н), 3.96 (t, 2Н), 6.91 (m, 3H), 7.21 (bd, 2Н), 7.27 (t, 2Н), 7.87 (bs, 1Н), 8.38 (d, 2Н), 9.42 (bs, 1Н).

Пример 19.

N-циано-N'-(3-феноксипропил)-N''-4-пиридилгуанидин, S-оксид
N-циано-N'(3-феноксипропил)-N''-4-пиридилгуанидин (пример 5) (1,20 г) суспендировали в метиленхлориде (20 мл) и порциями в течение 2-х часов добавили m-хлорпербензойную кислоту (990 мг) при 0^oC и перемешивали. Полученный раствор выпарили в вакууме и остаток перемешали с двумя порциями простого эфира (20 мл), который удалили декантацией. Добавили метиленхлорид (20 мл) и порциями в течение одного часа при 0 ^oC и перемешивании добавили дополнительное количество m-хлорпербензойной кислоты (990 мг). Смесь выпарили в вакууме и остаток окончательно дважды экстрагировали простым эфиром (20 мл) до получения сырого продукта. Тонкослойной хроматографией на силикагельной колонке при использовании в качество элюента смеси метиленхлорида, метанола и 25%-го водного аммиака при соотношении компонентов в смеси соответственно 80:20:1 получили чистое соединение.

Точка плавления: 165^o-166^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 2.00 (m, 2Н), 3.50 (q, 2Н), 4.03 (t, 2Н), 6.92 (t, 1Н), 6.93 (d, 2Н), 7.27 (m, 2Н), 7.45 (bd, 2Н), 8.08 (t, 1Н), 8.28 (d, 2Н), 9.98 (bs, 1Н).

Пример 20.

N-(5-бром-3-пиридил)-N'-циано-N''-(3-феноксипропил)гуанидин
Следуя процедуре примера 15, но при замещении 2-фенилтиоэтиламина на 3-феноксипропиламин, получили желаемое соединение.

Точка плавления: 129^o-130^oC.

ЯМР (DMSO; δ-шкала): 1.98 (m, 2H), 3.42 (q, 2Н), 4.01 (t, 2Н), 6.92 (m, 3H), 7.28 (m, 2Н), 7.68 (bt, 1Н), 7.95 (t, 1Н), 8.44 (d, 1Н), 8.47 (d, 1Н), 9.23 (bs, 1H).

Пример 21.

N-циано-N'-(6-феноксигексил)-N''-4-пиридилгуанидин
Следуя процедуре примера 14, но при замещении N-(4-феноксибутил)-N'-4-пиридилтиомочевины на N-(6-феноксигексил)-N'- 4-пиридилтиомочевину, получили желаемое соединение.

Пример 22.

Таблетка
Производство 10000 таблеток:
I. N-циано-N'(5-феноксипентил)-N''-4-пиридилгуанидин (активное соединение) - 10000 кг
Натрийкросскармеллоза - 0,300 кг
II. Гидроксипропилметилцеллюлоза низкой вязкости - 0,200 кг
Сорбимакрогололеат - 0,010 кг
Очищенная вода - достаточное количество
III. Натрийкросскармеллоза - 0,200 кг
Коллоидальный безводный диоксид кремния - 0,050 кг
Стеарат магния - 0,050 кг
I однородно смешали в смесителе с высоким сдвиговым усилием, смочили II и гранулировали во влажную массу.

Сырой гранулят сушили в сушилке с псевдоожиженным слоем при температуре воздуха на входе 60^oC до тех пор, пока высушенный гранулят имел активность воды 0,3-0,4 (= в равновесии с воздухом с относительной влажностью 30-40%).

Высушенный гранулят пропустили через сито с отверстиями 850 мкм.

Просеянный гранулят окончательно смешали с III в коническом смесителе. Обработанный гранулят прессовали в таблетки массой 1071 мг, имеющие достаточную твердость.

Формула изобретения

1. N-циано-N'-пиридилгуанидины общей формулы I

и их таутомерные формы, при этом присоединение к пиридиновому кольцу представлено в 3- или 4-положении,
где R', R'' являются одинаковыми или различными и означают водород или галоген;
алкилен означает прямой или разветвленный C₁ - C₈-алкилен, который может быть замещен гидроксигруппой;
X означает кислород, -S(O)_n-, где n означает целое число 0 или 1, или NH группу;
R означает водород или галоген; или их N-оксиды; или их фармацевтически приемлемые нетоксичные соли.

2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что присоединение к пиридиновому кольцу представлено в 4-положении.

3. Соединение по п.1, отличающееся тем, что алкилен означает прямую C₃ - C₆ углеродную цепь.

4. Соединение по п.1, отличающееся тем, что X означает кислород.

5. Соль по п.1, отличающаяся тем, что ее выбирают из группы, состоящей из солей, образованных соляной кислотой, бромистоводородной кислотой, фосфорной кислотой, серной кислотой, азотной кислотой, арилсульфокислотой, лимонной кислотой, винной кислотой и малеиновой кислотой.

6. Соединение по п.1, отличающееся тем, что его выбирают из группы, состоящей из
N-циано-N'-(3-феноксипропил)-N''-4-пиридилгуанидина,
N-циано-N'-(4-феноксибутил)-N''-4-пиридилгуанидина,
N-циано-N'-(5-феноксипентил)-N''-4-пиридилгуанидина
и их солей и N-оксидов, которые определены в п.1.

7. Фармацевтическая композиция, ингибирующая пролиферацию опухолевых клеток, отличающаяся тем, что в качестве активного компонента содержит эффективное количество соединения по любому из пg.1 - 6 и фармацевтически приемлемый носитель.

8. Фармацевтическая композиция по п.7, отличающаяся тем, что содержит другие необходимые вспомогательные агенты.

9. Способ лечения больных путем ингибирования пролиферации опухолевых клеток, отличающийся тем, что в качестве активного компонента вводят одно или несколько соединений по любому из пп.1 - 6 в суточной дозе 7 мг - 28000 мг.

10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что активный компонент вводят в сочетании с другими терапевтически активными компонентами.

11. Способ получения соединения формулы I по п.1, отличающийся тем, что пиридилкарбодиимид формулы II

в которой заместители являются такими, как они определены выше, подвергают реакции с эквивалентом или избытком цинамида при комнатной температуре или при близкой к комнатной температуре.

12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что его проводят в присутствии инертного растворителя.

13. Способ получения соединений формулы I по п.1, отличающийся тем, что тиомочевину формулы III

в которой заместители являются такими, как они определены выше, подвергают реакции с одним или несколькими эквивалентами N, N'-дициклогексилкарбодиимида (DCCD) и цианамида в инертном растворителе, например, ацетонитриле, при комнатной температуре или выше комнатной температуры, что приводит к образованию соединения формулы (1) и N,N'-дициклогексилтиомочевины (DCTV).

14. Способ получения соединений формулы I по п.1, отличающийся тем, что соединение формулы 1V

в которой заместители R¹ и R'' являются такими, как они определены выше, и где Y является галогеном, предпочтительно хлором, или C₁ - C₄ алкилтиорадикалом, взаимодействует с соответствующим амином формулы

где символы имеют те же самые значения, что и в формуле I.

15. Способ получения соединений формулы I по п.1, отличающийся тем, что соединение формулы V

в котором заместители являются такими, как они определены выше, взаимодействует с эквивалентом или небольшим избытком необходимого амина, где символы имеют те же самые значения, что и в формуле I, в присутствии одного эквивалента или слегка большего количества DCCD, в инертном растворителе, например, диметилформамиде, при 0^oC или при комнатной температуре, что приводит к образованию I и DCTV.

16. Соединение по п.1, обладающее противоопухолевой активностью.

17. Соединение по п.1, обладающее ингибирующей пролиферацию опухолевых клеток активностью.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4