Способ лечения внутримозговой опухоли головного мозга

 

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для лечения внутримозговых опухолей. Предложено до и/или после нейрохирургического вмешательства проводить цитокиновую иммунотерапию, заключающуюся во внутривенном введении лимфакин-активированных киллерных клеток, выделенных из 800 мл венозной крови больного с 2 млн ME дрожжевого рекомбинантного интерлейкина-2. Способ позволяет повысить эффективность лечения и обеспечить более легкое проведение хирургического удаления опухоли при отсутствии выраженных побочных эффектов. 1 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к медицине, а более конкретно касается способа лечения внутримозговой опухоли головного мозга.

Данное изобретение может быть использовано в различных областях медицины, например в нейрохирургии, нейроонкологии, нейроиммунологии.

Внутримозговые опухоли головного мозга склонны давать рецидивы. Скорость рецидивирования обуславливается как степенью анаплазии и пролиферативного потенциала, так и радикальностью операции (тотальное или субтотальное удаление опухоли).

Известна теория "опухолевого поля" (Уиллис В., 1953), согласно которой в органе имеются множественные очаговые пролифераты, которые составляют опухолевое поле. При этом рост опухоли идет из центра к периферии до слияния всех очагов в один опухолевый узел; после того как "опухолевое поле" истрачено, опухоль растет "сама из себя". При нейрохирургической операции после удаления опухолевого узла может остаться зона, состоящая из отдельных опухолевых клеток, которые не выявляются при объективной визуализации с помощью компьютерной и магнитно-резонансной томографии в силу ограничения разрешающей способности приборов. Именно эти оставшиеся опухолевые клетки обеспечивают рецидив болезни.

Известен способ лечения внутримозговой опухоли головного мозга (RU 2133624 С1), заключающийся в том, что осуществляют цитокиновую иммунотерапию, проводят нейрохирургическое вмешательство, заключающееся в тотальном удалении внутримозговой опухоли. Цитокиновая иммунотерапия включает в себя внутривенное введение в виде длительных инфузий заданной дозы дрожжевого рекомбинантного интерлейкина-2.

При введении чистого дрожжевого рекомбинантного интерлейкина-2, несмотря на положительные изменения в иммунодефицитных клетках у больного (как количественных, так и качественных показателей), наличие опухоли в организме обеспечивает продукцию и подавление эффекторов клеточного звена иммунитета за счет выработки опухолевой тканью веществ, блокирующих иммунный ответ (трансформирующий фактор роста β₁ и β₂, простогландины, а также некоторые виды интерлейкинов).

Также при введении чистого интерлейкина-2 происходит системный эффект на иммунодефицитные клетки, то есть стимулируются все виды лимфоцитов, и не происходит акцент на поддержание самой важной с точки зрения уничтожения опухолевой ткани субпопуляции лимфоцитов - CD 16⁺. Именно эта субпопуляция способна на прямую, без антигенов I-II класса основного комплекса чистосовместимости взаимодействовать с опухолевой клеткой и уничтожать ее. Таким образом, не происходит достаточно быстрой индуцированной иммуноцитокиновой реакции в кровяном русле пациента и не обеспечивается необходимого воздействия активированных лимфоцитов непосредственно на опухолевую ткань и перифокальную зону. Опухоль не размягчается достаточно для того, чтобы провести более легкое механическое, то есть менее травматическое и радикальное ее удаление. Возможны летальные осложнения и выраженные побочные эффекты. Продолжительность жизни пациента при данном способе лечения увеличивается незначительно.

В основу изобретения положена задача создания способа лечения внутримозговой опухоли головного мозга, в котором за счет более быстрой индуцированной иммуноцитокиновой реакции в кровяном русле пациента обеспечивается воздействие активированных лимфоцитов непосредственно на опухолевую ткань и перифокальную зону, тем самым разрушая или размягчая опухоль, делая ее менее плотной, что позволяет провести более легкое механическое, то есть менее травматичное и радикальное ее удаление, что в конечном счете позволяет увеличить продолжительность жизни пациента при отсутствии летальных осложнений и выраженных побочных эффектов.

Поставленная задача решается тем, что в способе лечения внутримозговой опухоли головного мозга, заключающемся в том, что осуществляют цитокиновую иммунотерапию, проводят нейрохирургическое вмешательство, заключающееся в тотальном удалении внутримозговой опухоли, согласно изобретению цитокиновая иммунотерапия включает в себя внутривенное введение в виде длительной инфузии в течение от одного до трех дней по четыре-пять часов заданной дозы лимфокин-активированных киллерных клеток вместе с дрожжевым рекомбинантным интерлейкином-2 до суточной дозы 2 млн ME. Целесообразно, чтобы перед цитокиновой иммунотерапией проводили открытую или стереоскопическую биопсию объемного образования головного мозга.

Также целесообразно, чтобы после нейрохирургического вмешательства через две-три недели проводили курс цитокиновой иммунотерапии, включающий в себя внутривенное введение в виде длительной инфузии в течение от одного до трех дней по четыре-пять часов заданной дозы лимфокин-активированных киллерных клеток вместе с дрожжевым рекомбинантным интерлейкином-2 до суточной дозы 2 млн ME.

Данный способ лечения внутримозговой опухоли головного мозга позволяет за счет более быстрой индуцированной иммуноцитокиновой реакции в кровяном русле пациента обеспечить воздействие активированных лимфоцитов непосредственно на опухолевую ткань и перифокальную зону, тем самым разрушая или размягчая опухоль, делая ее менее плотной, что позволяет провести более легкое механическое и радикальное удаление, что в конечном счете позволяет увеличить продолжительность жизни пациента при отсутствии различных осложнений и побочных эффектов. При данном способе лечения использование системного внутривенного введения является более физиологическим с точки зрения обеспечения индуцированной иммунной атаки на ложе удаленной опухоли через артериальную кровь и устранения иммунодефицита крови. Данный способ лечения позволяет избежать наличие катетера в полости удаленной опухоли и не использовать резервуар Ommaya. В отличие от других известных способов лечения, позволяющих лечить как правило только внутримозговые опухоли (глиомы) III-IV степени, данный способ лечения позволяет лечить глиомы всех степеней, то есть I, II, III, IV степени по классификации Всемирной организации здравоохранения. Данное изобретение позволяет исключить использование после нейрохирургического вмешательства традиционные химио- и лучевую терапию.

Данный способ позволяет облегчить хирургическое удаление опухолевой ткани, снизить травматичность вмешательства, а также увеличить протяженность безрецидивного периода (адъювантная иммунотерапия) при внутримозговых опухолях головного мозга (ВОГМ). В дальнейшем изобретение поясняется конкретными примерами.

Способ лечения внутримозговой опухоли головного мозга заключается в том, что осуществляют цитокиновую иммунотерапию, проводят нейрохирургическое вмешательство, заключающееся в тотальном удалении внутримозговой опухоли. При этом цитокиновая иммунотерапия включает в себя внутривенное введение в виде длительной инфузии в течение от одного до трех дней по четыре-пять часов в день заданной дозы лимфокин-активированных киллерных клеток вместе с дрожжевым рекомбинантным интерлейкином-2 до суточной дозы 2 млн ME.

Для проведения терапии лимфокин-активированными киллерными клетками (ЛАК-терапия) осуществляют забор венозной крови больного объемом 800 мл, выделение лимфоцитов центрифугированием, добавление к осадку лимфоцитов стерильной известной натуральной среды, инкубирование приготовленной суспензии лимфоцитов в течение 72 часов при температуре 37^oС, осаждение клеток в центрифуге. При приготовлении суспензии лимфоцитов в культуральную среду могут быть внесены стерильные растворы интерлейкина-1 и интерлейкина-2 (Ронколейкин). Во флакон со стерильным физиологическим раствором объемом до 400 мл, подогретым до 37^oC, вводится приготовленная суспензия лимфоцитов. Содержимое флакона вместе с интерлейкином-2 (International Pharmaco-EEG Group "Night Biennial IPEG Meeting" Abstracts Prague, September 12-14, 1996, стр. 21, "Analysis of the brain electrical activity before..." V.V.Gnezditsky, A. I. Svadovsky и др.) путем длительной внутривенной инфузии вводят больному.

Данный дрожжевой рекомбинантный интерлейкин-2 является менее токсичным. Заданная его доза зависит от ряда клинических причин: возраста пациента, размера опухоли, степени иммунодефицита. Целесообразно, чтобы перед цитокиновой иммунотерапией проводили открытую или стереотаксическую биопсию объемного образования головного мозга (внутримозговой опухоли головного мозга).

Патогенетической основой для проведения терапии по данному способу больным с ВОГМ является снижение показателей клеточного иммунитета в периферической крови, исходно низкая степень лимфоцитарной инфильтрации опухолевой ткани, а также установленная способность активированных лимфоцитов и других цитокинов проникать сквозь гематоэнцифалический барьер (ГЭБ) и лизировать опухолевые клетки.

Для стимуляции трансформации зрелых лимфоцитов периферической крови в лимфокин-активированные киллерные клетки используется рекомбинантный интерлейкин-2 отечественного производства, созданный при использовании культуры дрожжей и лишенный токсических эффектов.

Дрожжевой рекомбинантный интерлейкин-2 может быть использован не только как индуктор трансформации ЛАК-клеток, но и применяться как фоновый препарат до осуществления ЛАК-терапии с целью поднять клеточный иммунитет больного. Целесообразно также применять дрожжевой рекомбинантный интерлейкин-2 после нейрохирургического вмешательства и проведенной ЛАК-терапии для профилактического поддержания клеточного звена иммунитета.

В литературе известны способы введения лимфокин-активированных киллерных (ЛАК) клеток как в саму опухоль, так и в ложе удаленной опухоли через резервуар Ommanya (Jacobs S.K. et al., 1986; Ingram M. еt al., 1990; Yoshida S. еt al., 1992). В данном способе лечения используется системное внутривенное введение ЛАК-клеток, что позволяет обеспечить пролонгированную иммунную атаку на опухолевые клетки, поддерживая определенную концентрацию киллерных клеток в кровяном русле, и устранить иммунодефицит. Предложенный способ позволяет не использовать резервуар Ommanya и избежать возможного в таких случаях присоединения вторичной инфекции.

При данном способе лечения ВОГМ за счет введения в кровяное русло собственно лимфокин-активированных киллерных клеток пациента, проникающих ГЭБ и вступающих в непосредственный контакт с опухолевыми клетками, происходят лизисные изменения в опухоли, что позволяет сделать удаление опухолевого узла менее травматичным, а в послеоперационном периоде воздействовать на отдельные опухолевые клетки по периферии удаленного узла, замедляя (или исключая) тем самым скорость развития рецидива опухоли. Выращивание вне организма лимфокин-активированных киллерных клеток CD 16⁺ лимфоцитов, введение их обратно в организм в кровяное его русло делает их более конкурентоспособными по отношению к другим клеткам в организме, которые не были извлечены. Соответственно они обладают большим потенциалом для уничтожения опухолевых клеток.

Также целесообразно, чтобы после нейрохирургического вмешательства через две-три недели проводили курс цитокиновой иммунотерапии, включающей в себя внутривенное введение в виде длительной инфузии в течение от одного до трех дней по четыре-пять часов заданной дозы лимфокин-активированных киллерных клеток вместе с дрожжевым рекомбинантным интерлейкином-2 до суточной дозы 2 млн ME.

Интерлейкин-2 и ЛАК-клетки в значительной мере повышают проницаемость ГЭБ (обладающего селективной проницаемостью) и позволяют проникать в опухолевую ткань лекарственным веществам с высоким молекулярным весом (например, интерферонам), что обеспечивает частичную или полную деструкцию опухоли. Установлено, что данная ЛАК-терапия приводит к усилению перитуморального отека, и клиренс отечной жидкости происходит через унилатеральную часть желудочковой системы и субарахноидальное пространство по универсальному механизму, также как и при больших локальных повреждениях головного мозга в виде очагов ушиба или внутримозговых гематомах (Svadovsky A.I., Potapov A.A., Likhterman L.B. et al. CT and MRI Evaluation of Traumatic Brain Edema and its Biochemical and Hystological Correlates/ In Book: Intracranial Pressure VIII. - Springer-Verlag. - Berlin-Heidelberg-New-York. - 1993. - Р.499-502).

Анализ опухолевых биоптатов при помощи световой и электронной микроскопии, данные типирования лимфоцитов в опухолевых биоптатах с использованием моноклональных антител свидетельствует о способности активированных лимфоцитов лизировать клетки глиом как у больных с низкой степенью анаплазии, так и с высокой, что обосновывает дооперационное лечение при глиомах низкой степени злокачественности.

Применение данного способа лечения в дооперационном периоде позволяет облегчить удаление опухолевой ткани и снизить травматичность вмешательства. При помощи радионуклидной гамма-энцефалографии (РГЭГ) установлена способность при данном способе усиливать проницаемость ГЭБ только непосредственно в паренхиме внутримозговой опухоли и никогда в интактном мозге. В наших наблюдениях при РГЭГ отмечался очаг цитокин-индуцированного воспаления в виде кольца (или полукольца). Это создает основу для профилактического (адъювантного) использования данной терапии после радикального хирургического вмешательства, направленного на борьбу с оставшимися опухолевыми клетками вокруг ложа удаленной опухоли.

Данный способ лечения ВОГМ был проверен в клинических условиях. Клинические испытания проводились в условиях неврологической и нейрохирургической клиники "Нейроэскулап", г. Москва. Его применяли для лечения пациентов с внутримозговыми опухолями головного мозга, в частности при астроцитомах смешанного, фибрилярного, протоплазматического и анапластического типов, глиобластомах и глиосаркомах, олигоастроцитомах, медуллобластомах и других видах.

Ниже приведены примеры, поясняющие данный способ нейрохирургического лечения внутримозговой опухоли головного мозга.

Пример 1.

Больной Б., 48 лет, поступил в клинику с жалобами на головную боль, шаткость походки, снижение зрения. В другом стационаре поставлен диагноз: внутримозговая опухоль правой лобной доли головного мозга. Астроцитома I-II степени анаплазии. В 1997 году была проведена операция по субтотальному удалению опухоли. После чего больному проведен курс лучевой терапии 40 Gy. В связи с ухудшением состояния в клинике провели магнитно-резонансную терпию (МРТ). Выявили продолженный рост опухоли, дислокацию снижения головного мозга влево, перифокальный отек. Провели больному цитокиновую иммунотерапию в виде внутривенного введения в виде длительной инфузии в течение трех дней по четыре часа ежедневно заданной дозы лимфокин-активированных киллерных клеток вместе с дрожжевым рекомбинантным интерлейкином-2 до дневной дозы 2 млн ME. Затем через неделю после завершения цитокиновой иммунотерапии провели костно-пластическую трепанацию черепа и удаление опухоли. На операции опухоль представляла в значительной степени распавшуюся массу, особенно в центральной части. Послеоперационный период протекал гладко. Головные боли регрессировали. Шаткость походки исчезла. Зрение восстановилось. Заживление раны первичное. Катамнез прослежен в течение 2,5 лет.

Пример 2.

Больной Г., 33 года. Диагноз: анапластическая астроцитона III степени. В 1995 году провели в другой клинике костно-пластическую трепанацию, удаление опухоли правой лобной доли. В 1998 году поступил в клинику с рецидивом анапластической астроцитомы правой лобной доли. Провели иммунотерапию до операции, включающую в себя внутривенное введение в виде длительной инфузии в течение от одного до трех дней по четыре-пять часов заданной дозы лимфокин-активированных киллерных клеток вместе с дрожжевым рекомбинантным интерлейкином-2 до суточной дозы 2 млн ME.

Провели операцию: костно-пластическая трепанация, удаление частично разрушенной опухоли правой лобной доли. Заживление первичное. После операции через три недели проведен повторный курс цитокиновой иммунотерапии. Цитокиновая иммунотерапия включала в себя внутривенное введение в виде длительной инфузии в течение трех дней по четыре часа заданной дозы лимфокин-активированных киллерных клеток вместе с дрожжевым рекомбинантным интерлейкином-2 до суточной дозы 2 млн ME.

Рецидивов нет. Катамнез прослежен в течение четырех лет.

Пример 3.

Больная С. , 27 лет. Диагноз: внутримозговая опухоль лобно-теменно-височных долей. Проведена открытая биопсия для подтверждения опухолевой природы объемного образования. Установлено, что оно представляет собой ВОГМ - астроцитому I степени анаплазии. Больной проведена цитокиновая иммунотерапия.

Цитокиновая терапия включала в себя внутривенное введение в виде длительной инфузии в течение одного дня по пять часов заданной дозы лимфокин-активированных киллерных клеток вместе с дрожжевым рекомбинантным интерлейкином-2 до суточной дозы 2 млн ME. Затем проведено нейрохирургическое вмешательство - субтотальное удаление опухоли. Контрольные данные свидетельствуют об отсутствии признаков рецидива опухоли на протяжении нескольких месяцев. Катамнез прослежен 5 лет.

Пример 4.

Больной Ш. , 57 лет. Диагноз: глиобластома левой теменно-затылочной области. В клинике осуществляли цитокиновую иммунотерапию. Цитокиновая иммунотерапия включала в себя внутривенное введение в виде длительной инфузии в течение одного дня по пять часов заданной дозы лимфокин-активированных киллерных клеток вместе с дрожжевым рекомбинантным интерлейкином-2 до суточной дозы 2 млн ME. Затем проведена костно-пластическая трепанация, удаление опухоли. Спустя 3 недели после операции проведен курс цитокиновой иммунотерапии, включающий в себя внутривенное введение в виде длительной инфузии в течение трех дней по четыре часа заданной дозы лимфокин-активированных киллерных клеток вместе с дрожжевым рекомбинантным интерлейкином-2 до суточной дозы 2 млн ME с целью профилактики дальнейшего роста опухоли. Катамнез прослежен на протяжении 5 лет.

Пример 5.

Больной X. , 48 лет, поступил в клинику с жалобами на упорную головную боль диффузного характера, судорожные припадки. Весной 1993 года перенес стереотаксическую биопсию объемного образования области желудочкового треугольника левого полушария головного мозга. Гистологическое заключение: астроцитома II степени анаплазии.

В дальнейшем больной от оперативного вмешательства отказался, лечился по месту жительства. В связи с ухудшением состояния (учащением судорожных припадков, утратой работоспособности) поступил на обследование и лечение в июне 1997 года. Больному предложен курс иммунотерапии по данному способу. Он был выполнен путем внутривенного введения в виде длительной инфузии в течение трех дней по четыре часа заданной дозы лимфокин-активированных киллерных клеток вместе с дрожжевым рекомбинантным интерлейкином-2 до дневной дозы 2 млн ME. Затем была выполнена костно-пластическая трепанация теменно-височной области слева, тотальное удаление внутримозговой опухоли латеральных отделов области желудочкового треугольника. Гистологическое заключение: олигоастроцитома (II-III ст. анаплазии). Заживление первичное. Катамнез прослежен до настоящего времени.

Пример 6.

Больной Г. , 33 года, поступил в клинику с жалобами на судорожные припадки (всего три эпизода). Обследовался в диагностическом центре, где на КТ головного мозга выявлен объемный процесс в правой лобной доле, играющий роль масс-эффекта со сдавлением унилатеральной желудочковой системы. МРТ подтвердила наличие объемного образования. С целью уточнения диагноза и в качестве первого этапа лечения выполнена в начале июня 1997 года открытая биопсия объемного образования лобной доли справа. Гистологическое заключение: опухоль астроцитарного ряда. Больному предложен курс цитокиновой иммунотерапии, включающий в себя внутривенное введение в виде длительной инфузии в течение одного дня по четыре часа заданной дозы лимфокин-активированных киллерных клеток вместе с дрожжевым рекомбинантным интерлейкином-2 до суточной дозы 2 млн ME. 17.06.1997 произведена костно-пластическая трепанация, тотальное удаление внутримозговой опухоли правой лобной доли. Гистологическое заключение: анапластическая астроцитома. После операции осложнений нет. Катамнез прослежен в течение пяти лет.

Таким образом, проверка в клинических условиях данного способа лечения внутримозговой опухоли головного мозга позволяет сделать вывод, что в данном способе лечения за счет более быстрой индуцированной иммуноцитокиновой реакции в кровяном русле пациента обеспечивается воздействие активированных лимфоцитов непосредственно на опухолевую ткань и перифокальную зону, тем самым разрушая или размягчая опухоль, делая ее менее плотной, что позволяет провести более легкое механическое и радиальное ее удаление, что в конечном счете позволяет увеличить продолжительность жизни пациента при отсутствии летальных осложнений и выраженных побочных эффектов.

Формула изобретения

1. Способ лечения внутримозговой опухоли головного мозга, включающий нейрохирургическое вмешательство и цитокиновую иммунотерапию, отличающийся тем, что цитокиновая иммунотерапия включает внутривенное введение лимфакин-активированных киллерных клеток, выделенных из 800 мл венозной крови больного с 2 млн МE дрожжевого рекомбинантного интерлейкина-2.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что цитокиновую иммунотерапию проводят до и/или после нейрохирургического вмешательства.