Способ получения пробиотической добавки для кормовых средств

 

Изобретение относится к биотехнологии. Способ предусматривает выращивание бифидобактерий, ацидофильной палочки и пропионовокислых бактерий в питательной среде, отделение бактериальной массы от культуральной среды, смешивание ее с защитной средой и сушку. В состав питательной среды дополнительно включают ростстимулирующую добавку, содержащую ферментный комплекс из Streptomyces longisporus 173402, в количестве 10-15% к объему среды. Способ позволяет увеличить выход биомассы и усилить лечебно-профилактическую эффективность.

Изобретение относится к биотехнологии и может применяться в животноводстве.

Для профилактики желудочно-кишечных заболеваний молодняка сельскохозяйственных животных, вызываемых условно-патогенной и патогенной микрофлорой, эффективным является применение бактериальных препаратов и биологически активных кормовых добавок, содержащих симбионтную микрофлору кишечника.

Известны бактериальные препараты и биологически активные кормовые добавки и средства, обладающие выраженными лечебно-профилактическими свойствами, в состав микрофлоры которых входят бифидобактерии, лактобациллы, пропионовокислые бактерии и др./1, 2, 3/.

Технология получения бактериальных препаратов и биологически активных кормовых добавок включает предварительное выращивание микроорганизмов в питательных средах с целью накопления биомассы, концентрацию биомассы, а также ее консервирование с использованием различных способов сушки.

Наиболее близким по технической сущности к изобретению является способ производства биологически активной кормовой добавки, предусматривающий накопление биомассы бифидобактерий совместно с ацидофильной палочкой и пропионовокислыми бактериями (Патент №2173159) /4/.

Недостатком известного способа является недостаточно большой выход биомассы, составляющий 0,6-0,7% от объема питательной среды, использование дефицитных и дорогостоящих ингредиентов в составе питательной среды, таких как пептон.

Одним из важных этапов при производстве биологически активных добавок и препаратов является подбор питательной среды для выращивания микроорганизмов. Как известно, регулировать рост микроорганизмов можно введением в состав среды специфических биостимуляторов, которые повышают синтетическую и репродуктивную активность клеток. Так, например, из дрожжей получен стимулятор роста молочнокислых бактерий, усиливающий синтез ДНК, который по химической структуре является пептидом. Стрептомицеты выделяют в культуральную жидкость стимуляторы биосинтеза протеаз. Известны ростостимулирующие свойства некоторых ферментных препаратов /5/.

Целью предлагаемого изобретения является повышение активности развития бактерий при их выращивании за счет улучшения состава питательной среды, увеличение выхода биомассы при выращивании микроорганизмов и, как следствие, усиление лечебно-профилактической эффективности биологически активных кормовых добавок.

Сущность изобретения заключается в использовании в качестве стимулятора роста микроорганизмов специально подобранной добавки, содержащей ферментный комплекс, полученный путем культивирования Streptomyces longisporus 17342, который вносится в питательную среду для выращивания и повышения активности развития микроорганизмов. Дополнительное введение в состав питательной среды ростостимулирующей добавки, полученной из Streptomices longisporus 173402, в количестве 10-15% позволит повысить прирост биомассы микроорганизмов в 1,5-1,7 раза, сократить продолжительность выращивания микроорганизмов на 6-8 часов.

Пример 1. При реализации предлагаемого способа используются штаммы бактерий, являющиеся собственностью музея чистых культур микроорганизмов кафедры эпизоотологии и микробиологии ВГМХА им. Н.В.Верещагина и поддерживающиеся в рабочем состоянии. Выращивание бактерий осуществляется на питательной среде следующего состава, г/л: лактоза - 5,0; дрожжевой экстракт - 5,0; гидролизованное молоко - 100,0; культуральная жидкость Streptomyces longisporus 173402 - 150,0; вода - до 1000, рН - 6,6-6,9. Питательную среду стерилизуют при 121°С в течение 15 минут, затем охлаждают до 37°С и заквашивают чистыми культурами Bifidobacterium longum T-89, Bifidobacterium thermophilum ТП-8, Lactobacillus acidophilus 97 и Propionibacterium shermanii П-1 при начальном соотношении культур 2,5:2,5:1:4, которые вносят в количестве 8-10% к объему среды. Совместное выращивание микроорганизмов проводят при 37°С в течение 14-16 часов до достижения рН 4,6. В конце роста культуральную среду охлаждают до 14°С и проводят отделение биомассы от культуральной среды центрифугированием. Полученную биомассу смешивают с защитной средой и высушивают.

Пример 2. При получении пробиотической добавки для кормовых средств используют питательные среды с биостимулятором роста и размножения бифидобактерий, лактобацилл и пропионовокислых бактерий. С этой целью Streptomyces longisporus 173402 выращивают на питательной среде Чапека, содержащей, г/л: сахарозу (или глюкозу) - 20,0; NaNO₃ - 2,0; К₂НРО₄ - 1,0; MgSО₄ - 0,5; KC1 - 0,5; СаСО_з - 3,0. Среду стерилизуют при 0,1 МПа (121±1°С) в течение 15 мин. Готовую среду охлаждают до температуры 28-30°С и инокулируют суточной культурой Streptomyces longisporus 173402 в количестве 3-5% к объему среды. Посевы инкубируют при (28±2)°С в течение 36 час. Полученную культуральную жидкость вносят в питательные среды для выращивания бифидобактерий, лактобацилл, пропионовокислых бактерий в количестве 10-15% к объему среды. Обогащение питательных сред биостимулятором способствует увеличению биомассы микроорганизмов в 1,5-1,7 раза.

Предлагаемый способ получения биологически активной кормовой добавки позволит

- осуществить комплексное использование культур бифидобактерий, ацидофильной палочки и пропионовокислых бактерий;

- повысить выход биомассы при выращивании микроорганизмов в 1,5-1,7 раза;

- получить в 1 г добавки содержание жизнеспособных клеток бифидобактерий до 10¹², ацидофильной палочки - до 10⁹, пропионовокислых бактерий - до 10⁹;

- использовать добавку непосредственно для профилактики желудочно-кишечных заболеваний молодняка сельскохозяйственных животных или применять для обогащения кормовых средств на основе молочного сырья.

Источники информации

1. Платонов А.В. Производство препаратов для животноводства на основе микроорганизмов-симбионтов желудочно-кишечного тракта. - М.: 1985. - 44 с.

2. Грунская В.А., Эрвольдер Т.М., Гудков С.А. Использование бифидобактерий в рационах молодняка сельскохозяйственных животных. - М.: АгроНИИТЭИММП. - 1991. - 24 С.

3. Пат. России 2035184, МКИ⁶ А 61 К 35/66, С 12 №1/20 Способ получения бактериального препарата для производства кормового средства. /Гудков А.В., Эрвольдер Т.М., Грунская В.А., Душенин Н.В., Таткина Л.Д.; ВНИИ маслоделия и сыроделия. - №4919189/13; Заявл. 02.01.90; опубл. 20.05.95. - Бюл. №14.

4. Пат. №2173159 Способ производства биологически активной кормовой добавки. /Грунская В.А., Борисова Г.В., Березина Г.Ю.; Вологодская государственная молочнохозяйственная академия им. Н.В.Верещагина. Заявл. 15.12.99; опубл. 10.09.2001. - Бюл. №25.

5. Стимуляция жизнедеятельности микроорганизмов и вирусов. /Под ред. И.И.Шигаева. - Алма-Ата: Наука, - 1986. - 180 с.

Формула изобретения

Способ получения пробиотической добавки, предусматривающий приготовление питательной среды, внесение закваски бифидобактерий, ацидофильной палочки и пропионово-кислых бактерий, накопление биомассы микроорганизмов и отделение ее от культуральной среды, смешивание биомассы с защитной средой и сушку, отличающийся тем, что для выращивания микроорганизмов в питательную среду дополнительно вносят ростстимулирующую добавку, содержащую ферментный комплекс из Streptomyces longisporus 173402, в количестве 10-15% к объему среды.