Способ диагностики на зараженность и определения инвазионного состояния личинок мюллерий в сухопутных моллюсках

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к ветеринарной гельминтологии. Способ осуществляется следующим образом: отсеченные подошвы моллюсков помещают по 10 экземпляров в чашки Петри, заливают выше уровня подошвы искусственной средой, содержащей кислоты соляной концентрированной 10 мл, пепсина 4 г, воды 1000 мл, и создают температуру внешней среды от 18 до 30°С, затем проводят микроскопию дна чашек Петри на наличие вышедших личинок мюллерий через час после заливки искусственной средой и еще три раза с таким же интервалом повторяют микроскопию дна чашек, причем личинки подковообразные или имеющие форму незамкнутого кольца с отслоившейся вокруг всего тела кутикулой определяют как неинвазионные, а спирально свернутые личинки, имеющие плотное, почти прозрачное слегка пигментированное тело светло-желтого цвета - как инвазионные. При отрицательном результате микроскопии дна чашек Петри проводят микроскопию 1-2 контрольных соскобов подошвы из чашки Петри. Изобретение позволяет эффективно и целенаправленно осуществлять профилактику и ликвидацию легочных гельминтозов жвачных животных. 1 з.п.ф-лы.

Изобретение относится к сельскохозяйственному производству, в частности к скотоводству, а именно к ветеринарной гельминтологии. Изобретение направлено на решение проблемы методов профилактики и борьбы с легочными гельминтозами жвачных животных.

Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является решение комплекса эпизоотологических вопросов, связанных с методами прогноза гельминтозов путем ускорения способов диагностики на зараженность промежуточных хозяев (сухопутных моллюсков) и определения периода достижения инвазионного (заразного) состояния проникших в них личинок мюллерий. Способ прост в освоении любым практическим работником, связанным с вопросами ветеринарной гельминтологии.

Известно, что в жизненном цикле паразита наличествует фаза развития в тканях ноги сухопутных моллюсков, где проникшие личинки мюллерий после линьки достигают инвазионной стадии и остаются в них до попадания с кормом в организм подходящих хозяев - овцам, козам, а также диким животным - косулям, сернам, безоаровым козлам, европейским муфлонам и кабарге (С.Н. Боев. Протостронгилиды. - М.: изд-во АН СССР - 1975, т. 25. - С. 157-172.; К.И. Абуладзе, Н.В. Демидов, А.А. Непоклонов и др. Паразитология и инвазионные болезни сельскохозяйственных животных. - М.: ВО Агропромиздат, 1990. - С. 222-225).

Предлагаются простые и специальные способы диагностики зараженности моллюсков. Тем не менее простые сводятся к компрессованию тела мелкого моллюска между предметными стеклами или расчленению ноги крупного на отдельные части с последующим также компрессованием. Сложные методы требуют специальной обработки с последующим приготовлением гистологических срезов ноги. В процессе этих манипуляций изучается морфологическое состояние личинок мюллерий (Г.А. Котельников. Гельминтологические исследования окружающей среды. М.: Агропромиздат, 1985. - С. 160-166., Р. Шварц (ЧСФР), Э.И. Прядко, З.X. Тазиева (СССР), А. Паерски (ЧСФР). Промежуточный хозяин в онтогенезе протостронгилид. - Алма-Ата: Гылым, 1991, - С. 9-45). Недостатками этих способов являются: 1 - максимальная зараженность моллюсков не превышает 5%; 2 - оболочки личинок очень чувствительны к сдавливанию и часто разрываются; 3 - гистологические срезы не всегда позволяют уловить все переходные элементы процесса достижения инвазионного состояния.

С целью исключения этих недостатков предлагается способ диагностики зараженности, включающий установленный биологический факт выхода личинок из подошвы моллюсков независимо от стадии развития при воздействии на последнюю искусственной среды (желудочного сока) в течение четырех часов при колебаниях кислотности (рН) от 3 до 3,5 и при температуре внешней среды от 18 до 30°С.

Возможность практического осуществления заявляемого изобретения подтверждается следующим. У отобранных из исследуемого биотопа моллюсков в количестве не более 30 экз. отсекают подошвы и помещают по 10 экз. в чашки Петри, заливают несколько выше уровня подошвы искусственной средой по следующему рецепту: кислоты соляной концентрированной 10 мл, пепсина 4 г, воды 1000 мл. Через час проводят микроскопию дна чашек на наличие вышедших личинок мюллерий. Процедуру просмотра с таким же интервалом без удаления подошв из чашек Петри повторяют 3 раза.

При отрицательном результате, там же в чашках Петри проводят 1-2 контрольных соскоба подошвы скальпелем и сразу же после оседания взвеси микроскопируют на наличие личинок мюллерий.

Способ диагностики эффективен независимо от количества личинок в подошве и позволяет выявлять даже единичные экземпляры паразитов.

Отличительной морфологической особенностью неинвазионных личинок является наличие хорошо отслоившейся вокруг всего тела кутикулы, придающей им очень хрупкий вид. По форме личинки подковообразны или имеют вид незамкнутого кольца.

Инвазионные личинки имеют плотное, почти прозрачное, слегка пигментированное тело светло-желтого цвета. Отслоения кутикулы нет. Всегда спирально свернуты.

В том и другом случае хвостовой конец личинок заострен.

Предложенный способ диагностики на зараженность моллюсков и определения инвазионного состояния личинок имеет существенные отличия от известных как в гельминтологической, так и биологической, в т.ч. медицинской, литературе.

Формула изобретения

1. Способ диагностики на зараженность сухопутных моллюсков инвазионными и неинвазионными личинками мюллерий, включающий микроскопирование на наличие личинок мюллерий, отличающийся тем, что отсеченные подошвы моллюсков помещают по 10 экземпляров в чашки Петри, заливают выше уровня подошвы искусственной средой, содержащей кислоты соляной концентрированной 10 мл, пепсина 4 г, воды 1000 мл, и создают температуру внешней среды от 18 до 30°С, затем проводят микроскопию дна чашек Петри на наличие вышедших личинок мюллерий через 1 ч после заливки искусственной средой и еще три раза с таким же интервалом повторяют микроскопию дна чашек, причем личинки подковообразные или имеющие форму незамкнутого кольца с отслоившейся вокруг всего тела кутикулой определяют как неинвазионные, а спирально свернутые личинки, имеющие плотное почти прозрачное слегка пигментированное тело светло-желтого цвета - как инвазионные.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что при отрицательном результате микроскопии дна чашек Петри проводят микроскопию 1-2 контрольных соскобов подошвы из чашки Петри.