Способ выявления больных лейкозом крупного рогатого скота животных при алейкемическом и лейкопеническом проявлениях болезни

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Владельцы патента RU 2263312:

ГОСУДАРСТВЕННОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ДАЛЬНЕВОСТОЧНЫЙ ЗОНАЛЬНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ (RU)

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для выявления больных лейкозом крупного рогатого скота животных при алейкемическом и лейкопеническом проявлениях болезни. Способ включает выявление положительно реагирующих в РИД животных и определение в крови количества лейкоцитов, при котором дополнительно проводят дифференцированный подсчет лейкоцитов у животных с нормальным количеством лейкоцитов и лейкопенией, и при наличии в мазках крови процента лимфоцитов выше нормы, составляющего 65-70 и более процентов, животное оценивают как больное. Технический результат: предложенный способ позволяет провести более точную, достоверную и своевременную прижизненную диагностику лейкоза. 2 табл.

Известен гематологический способ выявления больного лейкозом крупного рогатого скота животного, включающий предварительное выявление животных, положительно реагирующих в РИД, основанное на обнаружении в сыворотке крови специфических преципитирующих антител к антигенам вируса лейкоза крупного рогатого скота. Животных, сыворотки крови которых дали положительный результат в РИД, признают зараженными вирусом лейкоза и исследуют гематологическим методом, заключающимся в подсчете лейкоцитов в единице объема крови. При обнаружении повышенного их количества выводят лейкоцитарную формулу и оценивают статус животного по лейкозу согласно «лейкозному ключу» как здорового, подозрительного по заболеванию лейкозом или больного лейкозом. Больных животных выводят из стада [1].

Недостатком способа является то, что животные, положительно реагирующие в РИД, но имеющие нормальное или пониженное количество лейкоцитов в крови и оценивающиеся по инструкции как «здоровые», не подвергаются дальнейшим гематологическим исследованиям, в связи с чем не удается обнаружить случаи с алейкемическим и лейкопеническим проявлениями болезни. Невыявленные больные лейкозом животные, не имеющие выраженных свойственных лейкозу гематологических показателей (лейкоцитоз, абсолютный лимфоцитоз), продолжают находиться в стаде и способствуют развитию и ускорению инфекционного и эпизоотического процессов болезни.

Задачей заявляемого изобретения является повышение качества, достоверности и точности диагностики, своевременное (раннее) выявление больных животных с гематологически невыраженным лейкозным процессом (алейкемическое и лейкопеническое проявления болезни) для их последующей выбраковки.

Технический результат - своевременное выявление больных лейкозом животных с алейкемическим и лейкопеническим проявлениями болезни для их выбраковки.

Указанный технический результат достигается тем, что сначала выявляют положительно реагирующих в РИД животных, подсчитывают лейкоциты в единице объема крови, затем у животных с нормальным (алейкемическим) количеством лейкоцитов и лейкопенией дополнительно проводят дифференцированный подсчет лейкоцитов. Оценивают животное как больное при наличии относительного содержания лимфоцитов выше нормы. Такое животное выбраковывают.

Пример 1.

В опыте было 297 голов крупного рогатого скота 3-6-летнего возраста, из них выявили 85 голов, имеющих положительную реакцию в РИД, и 212 голов, серонегативных в РИД по отношению к антигенам вируса лейкоза крупного рогатого скота. У всех животных провели количественный и качественный подсчет лейкоцитов.

Из таблицы 1 следует, что из 85 голов РИД - положительных животных у всех обнаружено различное количество лейкоцитов и процентное содержание лимфоцитов. В связи с этим РИД (+) животные разделены на 4 группы:

1 группа. Сюда отнесены 57 голов крупного рогатого скота с нормальным количеством лейкоцитов в 1 мкл крови (6,71±0,24), нормальным процентным содержанием лимфоцитов (61,40±1,44), относящиеся по «лейкозному ключу» к здоровым животным.

2 и 3 группы. Сюда отнесено по 10 голов крупного рогатого скота с лейкоцитозом, у которых согласно «Методическим указаниям по диагностике лейкоза крупного рогатого скота» (2000) проводятся дальнейшие гематологические исследования.

4 группа. Сюда отнесено 8 голов крупного рогатого скота с нормальным количеством лейкоцитов в 1 мкл крови (8,09±0,64 тыс.), у которых абсолютное количество лимфоцитов находится в пределах нормы и составляет 6,11±0,63 тыс./мкл (табл.1), т.е. в данном случае гематологические показатели (количество лейкоцитов, абсолютное количество лимфоцитов) по «лейкозному ключу» находятся в пределах показателей здоровых животных, кроме процента лимфоцитов, который в данном случае согласно «Методическим указаниям...» не определяется и соответственно не учитывается при постановке диагноза на лейкоз [1, стр.14]. Как следует из таблицы 1, у животных этой группы выявляется достоверно (Р<0,001) высокое процентное содержание лимфоцитов (75,50±2,38), превышающее таковое у здоровых животных и указывающее на развитие инфекционного процесса при лейкозе крупного рогатого скота несмотря на «спокойные» показатели «лейкозного ключа».

Статус животных, имеющих при дифференцированном подсчете лейкоцитов 65-70 и более процентов лимфоцитов с учетом возраста, оценивают как больных лейкозом и выбраковывают.

Пример 2.

Исследовано 142 головы крупного рогатого скота 3-6-летнего возраста, из них выявили 114 голов, имеющих положительную реакцию в РИД, и 28 голов серонегативных в РИД по отношению к антигенам вируса лейкоза крупного рогатого скота. У всех животных провели количественный и качественный подсчет лейкоцитов.

Из таблицы 2 следует, что у 114 голов РИД - положительных животных обнаружено различное количество лейкоцитов и процентное содержание лимфоцитов. В связи с этим РИД (+) животные разделены на 3 группы:

1 группа. Сюда вошли 74 головы крупного рогатого скота с нормальным количеством лейкоцитов в 1 мкл крови (7,87±0,19) и нормальным процентным содержанием лимфоцитов (61,86±1,27), относящиеся по «лейкозному ключу» к здоровым животным.

2 группа. Сюда вошли 35 голов крупного рогатого скота с лейкоцитозом, у которых согласно «Методическим указаниям по диагностике лейкоза крупного рогатого скота» (2000) проводятся дальнейшие гематологические исследования.

3 группа. Сюда вошли 5 голов крупного рогатого скота с лейкопенией (3,53±0,47 тыс. лейкоцитов в 1 мкл крови) и лимфопенией (2,76±0,42 тыс. лимфоцитов в 1 мкл крови). Как следует из таблицы 2, у животных этой группы выявляется достоверно (Р<0,001) высокое процентное содержание лимфоцитов (77,80±3,30), превышающее норму для здоровых животных и указывающее на развитие лейкозного процесса на фоне лейко- и лимфопении.

Таким образом, для выявления больных лейкозом крупного рогатого скота животных при алейкемическом и лейкопеническом проявлениях болезни выявляют положительно реагирующих в РИД животных, определяют у них в крови количество лейкоцитов, а затем дополнительно проводят дифференцированный подсчет лейкоцитов у животных с нормальным количеством лейкоцитов и лейкопенией, и животное оценивают как больное при наличии в мазках крови процента лимфоцитов выше нормы здоровых в отношении лейкоза особей.

Предлагаемый способ позволяет провести более точную и достоверную прижизненную диагностику лейкоза.

Источники информации

1. Методические указания по диагностике лейкоза крупного рогатого скота: Утверждено Департаментом ветеринарии М-ва сел. хоз-ва России: 23.08.00. - М., 2000. - С.12-16.

Таблица 1 Гематологические показатели крупного рогатого скота 3-6-летнего возраста, серопозитивного к ВЛКРС, на фоне нормального содержания лейкоцитов в 1 мкл крови
Отношение животных к ВЛКРС в РИД	Исследовано гематологически, n	Количество лейкоцитов, тыс/мкл	Лимфоциты, %	Абсолютное количество лимфоцитов, тыс./мкл
РИД (-) n=212	212	7,85±0,26	62,70±1,67	4,92±0,43
РИД(+) n=85	57	6,71±0,24	61,40±1,44	4,12±0,16
	10	19,15±1,94	87,20±1,62	16,70±1,90
	10	14,90±1,01	63,10±3,65	9,40±0,74
	8	8,09±0,64 (до 10-11*)	75,50±2,38 (до 65-70*)	6,11±0,63 (до 9-10*)
Итого: 297	297

Таблица 2 Гематологические показатели крупного рогатого скота 3-6-летнего возраста, серопозитивного к ВЛКРС, при лейкопении
Отношение животных к ВЛКРС в РИД	Исследовано гематологически, гол.	Количество лейкоцитов, тыс./мкл	Лимфоциты, %	Абсолютное количество лимфоцитов, тыс./мкл
РИД (-) n=28	28	7,65±0,36	55,90±2,68	4,20±0,26
РИД(+) n=114	74	7,87±0,19	61,86±1,27	4,88±0,16
	35	20,93±2,74	73,54±2,33	15,50±2,05
	5	3,53±0,47 (до 10-11*)	77,80±3,30 (до 65-70*)	2,76±0,42 (до 9-10*)
Итого: 142	142
Примечание к таблицам 1 и 2: * - показатели, соответствующие показателям здоровых животных по «лейкозному ключу» с учетом возраста

Способ выявления больных лейкозом крупного рогатого скота животных при алейкемическом и лейкопеническом проявлениях болезни, включающий выявление положительно реагирующих в РИД животных и определение в крови количества лейкоцитов, отличающийся тем, что дополнительно проводят дифференцированный подсчет лейкоцитов у животных с нормальным количеством лейкоцитов и лейкопенией и при наличии процентного содержания лимфоцитов выше нормы, составляющего 65-70% и более, животное оценивают как больное.

Изобретение относится к способам определения зольности биоматериалов. .

Способ исследования иммунокомпетентных клеток для оценки иммунного статуса норок // 2263310

Изобретение относится к ветеринарии. .

Электрохимический способ и устройства, предназначенные для применения при определении концентраций исследуемых веществ с поправкой на гематокритное число // 2262890

Изобретение относится к медицине, а именно к устройствам и способам для применения при анализе широкого круга исследуемых веществ в разнообразных пробах и, в частности, для применения при анализе исследуемых веществ, содержащихся в цельной крови или ее производных.

Способ прогнозирования исходов серозных менингитов у детей // 2262304

Изобретение относится к области медицины, а именно к инфектологии. .

Способ прогнозирования течения опухоли юинга у детей // 2262105

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии. .

Способ выявления простейших в периферической крови // 2262104

Изобретение относится к области медицины. .

Способ дифференциальной диагностики хронических обструктивных заболеваний легких // 2262095

Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано в клинической практике. .

Способ прогнозирования исхода острого гепатита с // 2261662

Способ диагностики гипогликемической комы в постмортальном периоде // 2261440

Изобретение относится к области судебной медицины. .

Способ определения эффективности проводимой терапии при лечении хронического простатита // 2261439

Изобретение относится к области медицины, а именно урологии, и может быть использовано, в частности, для определения эффективности проводимой терапии и прогнозирования дальнейшего течения процесса.

Способ определения пола человека, способ получения молекулярного маркера для определения пола человека, молекулярный маркер // 2263313

Изобретение относится к области молекулярной биологии, криминалистики и генетическим исследованиям в медицине

Способ доклинической диагностики хронического аденоидита у детей // 2263314

Изобретение относится к области медицины

Способ прогнозирования продолжительности жизни больных серозной и эндометриоидной карциномой яичников // 2263912

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии

Способ оценки накопления цинка в мышцах и костях птицы // 2264094

Изобретение относится к области птицеводства

Способ оценки заживления раны на матке после операции кесарево сечение // 2264165

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству

Способ определения индивидуальной чувствительности к антагонистам кальция и ингибиторам ангиотензинпревращающего фермента при артериальной гипертонии // 2264625

Изобретение относится к области биохимической фармакологии и кардиологии

Способ определения степени эндогенной интоксикации у собак // 2265217

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к биологическим способам определения степени эндогенной интоксикации

Способ дифференциальной диагностики компенсированной и декомпенсированной форм хронического тонзиллита у детей и подростков // 2265218

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии

Неинвазивное измерение уровня билирубина в коже // 2265397

Способ определения алюминия в биологических объектах // 2265842

Изобретение относится к химико-токсикологическому контролю при санитарно-гигиенической оценке продуктов животноводства, а также для прижизненной и посмертной диагностики случайных отравлений животных соединениями алюминия, а именно к способу определения алюминия в биологических объектах, заключающемуся в минерализации анализируемого образца азотной, серной и хлорной кислотами, выдерживании смеси при комнатной температуре, кипячении до полного ее обесцвечивания, охлаждении, нейтрализации, добавлении реакционной ацетатной буферной смеси, с последующим измерением оптической плотности и определением концентрации алюминия по калибровочному графику, отличающийся тем, что для минерализации образца азотную, серную и хлорную кислоту добавляют к образцу одновременно, смесь выдерживают при комнатной температуре 15-20 мин, затем нагревают в закрытой колбе при постепенном повышении температуры, смесь кипятят до полного обесцвечивания, используют ацетатную буферную смесь, содержащую 10% раствор гидроксиламина солянокислого, 0,3% эриохромцианина R, 10% растворы NaOH и СН3СООН при рН 5,4, а измерение оптической плотности проводят при длине волны =535 нм