Способ диагностики сифилиса

Авторы патента:

Коломойцев Александр Владимирович (RU)

G01N33/571 - венерических болезней, например сифилиса, гонореи, лишая

Владельцы патента RU 2270450:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения Российской Федерации" (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к дерматологии, и касается способа диагностики сифилиса. Сущность изобретения: перед постановкой раздельного ИФА для определения антитрепонемных антител сыворотку крови больного дополнительно обрабатывают магнитным сорбентом с иммобилизированным белком А стафилококка, который сорбирует IgG₁ и IgG₄. Преимущество изобретения заключается в повышении специфичности и упрощении способа. 1 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике инфекций, передающихся половым путем (ИППП).

Известен способ диагностики сифилиса методом иммуноферментного анализа на твердофазном носителе, в качестве которого используют модифицированный полиглюкином композиционный алюмосиликатный магноиммуносорбент (RU 2200327 С2, 10.03.2003)

Недостатки прототипа: сложный, трудоемкий, требует много времени, не высоко специфичный, не позволяет дифференцировать различные формы заболевания.

Изобретение направлено на решение задачи: упрощение при высокой точности, повышение специфичности.

Технический результат: повышение специфичности способа за счет оценки класс-принадлежности иммуноглобулинов (IgM и IgG) и подклассов IgG.

Указанные задачи достигаются путем определения в сыворотке крови методом ИФА антитрепонемных антител IgM, IgGs после обработки ее магнитным сорбентом на основе белка А золотистого стафилококка штамма Cowan I. Магнитный сорбент входит в комплект препарата «Сангвидет» - диагностикума иммуноглобулинового для определения скрытой крови в фекалиях человека в реакции коагглютинации (ФСП №42-0028338002). Магнитный сорбент на основе белка А позволяет проводить аффинное выделение иммуноглобулина G, преимущественно подклассов IgG₁, Ig G₂ и Ig G₄ за счет Fc-рецепторных свойств лиганда (Е.В.Григорьева, В.Н.Сперанская, Н.М.Болдачева. Изучение возможности определения скрытой крови серологическими экспресс-методами. Журн. микробиологии, 1988, №2, с.26-28, Патент на изобретение №2147130 «Способ определения кровопотери из желудочно-кишечного тракта», 27.03.2000. Бюл. №9).

Данный реагент для диагностики сифилиса ранее не использовался.

Способ осуществляется следующим образом. У больного определяют класс-принадлежность иммуноглобулинов в ИФА в нативной сыворотке и после ее обработки магнитным сорбентом. На первом этапе определяют класс-принадлежность иммуноглобулинов в ИФА с использованием стандартных тест-систем (предварительный диагноз). Далее "истощают" нативную сыворотку с помощью магнитного сорбента. Для этого к небольшому количеству магнитного сорбента добавляют сыворотку, тщательно перемешивают осторожным встряхиванием при комнатной температуре в течение 30-40 мин и затем с помощью магнита проводят разделение суспензии на жидкую и твердую фазы. На втором этапе исследуют жидкую фазу для определения класс-принадлежности оставшихся в ней иммуноглобулинов в ИФА. При этом количество IgM остается неизменным, но может существенно снижаться содержание IgG за счет удаления подклассов IgG₁, IgG₂ и IgG₄. Возможные пять вариантов интерпретации получаемых результатов приведены в таблице.

Таблица
Варианты	I этап (ИФА нативной сыворотки)	II этап (ИФА сыворотки, обработанной магнитным сорбентом)	Определение формы сифилиса
IgM	IgG	IgM	IgG
1.	положительно	сомнительно (±)	положительно	отрицательно	Первичный серонегативный
2.	сомнительно (±)	положительно	положительно	отрицательно	Первичный серопозитивный
3.	сомнительно (±)	положительно	положительно	положительно (IgG₃)	Вторичный свежий
4.	отрицательно	положительно	отрицательно	положительно (IgG₃)	Вторичный рецидивный
5.	отрицательно	положительно	отрицательно	отрицательно	Поздние

Если на I и II этапах исследования получают результаты, соответствующие 1 варианту, то диагностируют первичный серонегативный сифилис; если 2 варианту - то диагностируют первичный серопозитивный сифилис; если 3 варианту - вторичный свежий сифилис; если 4 варианту - вторичный рецидивный сифилис; если 5 варианту - поздний сифилис.

Примеры конкретного выполнения

Пример 1

Больной К., 35 лет. Диагноз: Вторичный рецидивный сифилис.

Эпидемиологический анамнез: заболевание выявлено случайно при прохождении профилактического осмотра.

При осмотре выявлена мелкая диффузная розеолезная сыпь на коже туловища, папулезный сифилис, полисклераденит.

Обследование: RW с кардиолипиновым антигеном 3+ в титре 1:10, RW со спирохетным антигеном 4+ в титре 1:20, РИФ 4+, ИФА без сорбции выявил IgG (+), IgM не определялись (-). После обработки сыворотки реагентом в ИФА обнаружены IgM - (+) и IgG - (+). На этом основании поставлен диагноз: Сифилис вторичный свежий. Назначена специфическая антибактериальная терапия.

Пример 2

Больная А., 27 лет. Диагноз: Вторичный рецидивный сифилис. Беременность 10 недель.

Эпидемиологический анамнез: при постановке на учет по беременности проведено комплексное обследование, в том числе RW с кардиолипиновым антигеном - 4+ в титре 1:10. Больная направлена на консультацию к венерологу с диагнозом: Сифилис?

При осмотре обнаружены: диффузное поредение волос, незначительные проявления розеолезной сыпи, широкие кондиломы, полисклераденит. Проведено обследование: ИФА - IgM не обнаружены (-), IgG - определяются (+). После обработки реагентом: IgM - не обнаружены (-), IgG₃ - определяются (+). На основании комплексного обследования подтвержден диагноз: Вторичный рецидивный сифилис. Рекомендовано специфическое антибактериальное лечение, во второй половине беременности - профилактическая антибактериальная терапия с целью предупреждения врожденного сифилиса.

Пример 3

Больной М., 45 лет. Предварительный диагноз: Вторичный сифилис.

Анамнез: Обратился к дерматовенерологу в связи с появлением высыпаний на половых органах.

При осмотре в области половых органов обнаружено единичное плотное по виду папулезное образование с эрозией на поверхности, полисклераденит с преобладанием регионарного, диффузное поредение волос.

Обследование: RW с кардиолипиновым антигеном 4+ в титре 1:160, в отделяемом эрозии обнаружена Treponema pallidum, в ИФА до сорбции определяются IgM (+) и IgG (+), после обработки сорбентом: IgM определяются (+), IgG - не обнаружены (-). Проведенное комплексное обследование позволило провести дифференциальный диагноз между вторичным свежим и первичным серопозитивным сифилисом. Окончательный диагноз: Первичный серопозитивный сифилис. Назначена специфическая антибактериальная терапия.

Положительный эффект от использования предлагаемого способа состоит в следующем: способ высоко специфичен и информативен, экономически целесообразен, позволяет дифференцировать различные формы сифилиса за счет выявления минимальных количеств IgM, которые маскируются (не определяются) при избытке IgG, и обнаружения IgG₃ - маркеров вторичного рецидивного сифилиса.

Способ диагностики сифилиса с помощью иммуноферментного метода (ИФА), включающий истощение сывороток с помощью магнитного сорбента и определение оставшихся в ней иммуноглобулинов, отличающийся тем, что перед обработкой сыворотки магнитным сорбентом в ней определяют класс-принадлежность иммуноглобулинов в ИФА с помощью стандартных тест-систем, а затем истощение сыворотки осуществляют магнитным сорбентом на основе белка А золотистого стафилококка штамма Cowan I, с помощью магнита проводят разделение суспензии на жидкую и твердую фазы и в жидкой фазе проводят повторное определение класс-принадлежности оставшихся иммуноглобулинов.

Изобретение относится к области медицины и касается антигенной композиции и способа обнаружения антител к Treponema pallidum при диагностике сифилиса. .

Способ диагностики носительства микоплазм у мужчин // 2229134

Изобретение относится к области медицины, в частности к дерматовенерологии, а именно к способам диагностики носительства микоплазм у мужчин. .

Способ получения трепонемного антигена для иммуноферментного анализа // 2216743

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской микробиологии, и может быть использовано для серологической диагностики сифилиса. .

Способ диагностики in vitro ложноположительных реакций на сифилис, обусловленных антифосфолипидным синдромом // 2206094

Изобретение относится к медицине, а именно к венерологии, и может быть использовано для диагностики in vitro ложноположительных реакций на сифилис, обусловленных антифосфолипидным синдромом.

Способ серодиагностики раннего нейросифилиса // 2205409

Изобретение относится к области медицины, а именно к венерологии. .

Способ диагностики сифилиса (варианты) // 2200327

Изобретение относится к медицине, а именно к микробиологическим методам исследования. .

Способ получения контрольной сыровотки для диагностики сифилиса // 2185856

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к получению диагностических препаратов. .

Способ прогнозирования течения урогенитальной гонореи // 2161312

Изобретение относится к области медицины, в частности к микробиологии, а именно к способам прогнозирования течения инфекционно-воспалительных заболеваний урогенитального тракта.

Способ дифференциальной диагностики раннего скрытого сифилиса и ложноположительных серологических реакций крови на сифилис // 2157539

Изобретение относится к медицине, а именно к венерологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики ложноположительных серологических реакций крови на сифилис и раннего скрытого сифилиса.

Иммуноферментная тест-система для выявления антител к возбудителю сифилиса // 2156467

Изобретение относится к иммунологии и может быть использовано в производстве диагностических препаратов для выявления сифилиса. .

Панель сывороток с нормированным содержанием антител класса igg k антигенам p17 и p41 treponema pallidum и способ ее получения // 2275635

Изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии и может быть использовано в технологии изготовления панелей сывороток для контроля качества тест-систем, предназначенных для серологической диагностики сифилиса

Диагностическая тест-система в формате иммуночипа и способ серологической дифференциальной диагностики сифилиса // 2397178

Изобретение относится к области клинической лабораторной диагностики, биотехнологии и медицины и касается диагностической тест-системы в формате иммуночипа (биологического чипа) и способа диагностики сифилиса с использованием данного иммуночипа, позволяющего одновременно и дифференциально выявлять реагиновые и трепонемоспецифические антитела (антитела к Treponema pallidum) разных классов

Способ получения контрольной сыворотки для диагностики антикардиолипиновых антител в количественной реакции микропреципитации на сифилис // 2399383

Изобретение относится к получению диагностических препаратов

Способ диагностики урогенитального трихомониаза // 2466731

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, урологии, венерологии, паразитологии, медицинской микробиологии, и касается способа диагностики урогенитального трихомониаза

Способ диагностики качества жизни больных, страдающих генитальными инфекциями // 2469320

Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики качества жизни больных, страдающих генитальными инфекциями

Способ комплексной диагностики инфекционных заболеваний человека путем твердофазного иммуноферментного анализа // 2488832

Изобретение относится к комплексному иммуноферментному анализу

Способ прогнозирования нейросифилиса // 2540912

Изобретение относится к области медицины, в частности к венерологии, и предназначено для прогнозирования нейросифилиса. Проводят исследование титров нетрепонемных антител в крови во флокуляционных тестах до выполнения диагностической пункции, и при обнаружении титров не менее чем 1:32 определяют высокую вероятность нейросифилиса, а при обнаружении титров ниже чем 1:32, определяют титры трепонемаспецифичных антител в крови в реакции гемагглютинации, и при их значениях не менее 1:40960 также определяют высокую вероятность нейросифилиса. Предлагаемый способ является доступным и простым и позволяет достигнуть результата в короткие сроки. 1 табл., 3 пр.

Триплетный антиген treponema pallidum // 2588656

Изобретение относится к биохимии. Описана конструкция триплетного антигена Treponema pallidum, которая включает три антигена к Treponema pallidum (TP15, TP17 и TP47), а также лидерную последовательность из десяти аминокислот (метка 261) и медь-цинк содержащую супероксиддисмутазу (hSOD) человека. Данная конструкция оптимизирована для диагностики сифилитической инфекции in vitro. Также описаны плазмиды, содержащие ДНК, кодирующую триплетный антиген, клетки-хозяева, способы получения, способы обнаружения и наборы. Изобретение расширяет арсенал средств и методов для определения сифилиса. 10 н. и 35 з.п. ф-лы, 19 ил., 8 табл., 4 пр.