Блокирование накопления микроорганизмов у птиц

Изобретение относится к способу блокирования накопления патогенных микроорганизмов на клетках птиц путем введения в качестве биологически активного вещества одного или нескольких олигогалактуронидов со степенью полимеризации ≥2 и степенью этерификации <20%, в случае необходимости вместе с обычными фармацевтическими носителями, разбавителями, добавками и накопителями в форме, пригодной для приема. Технический результат: лечение тяжелых бактериальных инфекций в ветеринарной медицине в качестве замены антибиотиков при хорошей переносимости, без развития резистентности и при продолжительном эффекте, который сохраняется также после отмены приема вышеописанных олигогалактуронидов. 9 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл.

 

Данное изобретение касается применения фармацевтического препарата, содержащего в качестве биологически активного вещества олигогалактуронид, для блокирования накопления микроорганизмов на клетках птиц.

Известно, что адгезия патогенных микроорганизмов происходит посредством специфических рецепторов на поверхности клеток. Эти рецепторы в различных классах животного мира развивались по-разному. Так, например, протеины клеток птиц имеют совершенно другой сайт гликозилирования, чем клетки млекопитающих или рептилий.

Из патента EP 0716605 известно, что олигогалактурониды со степенью полимеризации ≥2 и степенью этерификации менее 20% в состоянии блокировать накопление микроорганизмов на клетках млекопитающих.

Клетки млекопитающих характеризуются специфической структурой поверхности, на которой возможна адгезия микробов вообще и патогенных микроорганизмов в частности. Для этих специфических структур речь, как правило, идет о структурах углеводов, которые являются видоспецифичными. Так, например, адгезии E.coli на клетках эпителия желудочно-кишечного тракта способствуют бактериальные лектины, которые опознают звенья олигосахаридов на поверхности клеток-мишеней. Таким образом, углеводные структуры на поверхности клеток действительно рассматривают как существенный фактор для известной видоспецифичной патогенности микроорганизмов. Теперь неожиданно было обнаружено, что блокирование адгезии микроорганизмов посредством названных олигогалактуронидов, обнаруженное для клеток млекопитающих, также может блокировать адгезию микроорганизмов на клетках птиц. Это является неожиданным, так как клетки птиц на своей поверхности имеют другие структуры олигосахаридов, чем клетки млекопитающих, что, вероятно, обусловлено уже очень давно прошедшим разделением путей эволюции между птицами и млекопитающими.

Для птиц, особенно при разведении птиц, содержащихся в местах массового содержания животных, инфекции, вызванные микроорганизмами, представляют большую проблему. До сих пор с инфекциями такого рода можно было достаточно успешно бороться только посредством антибиотиков. Однако, так как широко распространенное использование антибиотиков именно в животноводстве уже вызвало большую тревогу риска развития устойчивости к антибиотикам у патогенных микроорганизмов, существует потребность замены антибиотиков другими средствами того же назначения. Это подкрепляется еще и тем, что во многих государствах использование антибиотиков в животноводстве более не разрешено или предстоит запрет на использование антибиотиков для этих целей.

Так как теперь, как упоминалось выше, особенно высокий риск инфекции существует в местах массового содержания птиц, срочно требуются лекарственные средства, которые могут вызывать блокаду адгезии микробов такого рода также на клетках птиц.

Итак, существует большая потребность в создании средства, которое может использоваться вместо антибиотиков при инфекциях птиц, вызванных микроорганизмами, и также может превентивно использоваться, чтобы устранить или предотвратить адгезию патогенных микробов на клетках птиц. Таким образом, задача данного изобретения состоит в том, чтобы изготовить лекарственное средство, блокирующее накопление микроорганизмов на клетках птиц, в частности на клетках эпителия птиц.

Эта задача согласно изобретению решается посредством способа получения фармацевтического препарата для блокирования накопления микроорганизмов на клетках птиц, отличающегося тем, что он содержит в качестве биологически активного вещества один или несколько олигогалактуронидов со степенью полимеризации 2 и степенью этерификации <20%, в случае необходимости вместе с обычными фармацевтическими носителями, разбавителями, добавками и наполнителями в форме, пригодной для применения.

Известно, что способность микроорганизмов к образованию токсинов, например энтеротоксинов, продуцируемых E.coli, представляет собой существенный вирулентный фактор. Однако колонизация слизистых оболочек микробами, которая возможна путем адгезии на углеводных рецепторах эпителия кишечных ворсинок или мочеполового эпителия с видоспецифичными фимбриями, также имеет большое значение для вирулентности микроорганизма как начальная первая стадия каждой инфекции. Исследования патогенеза инфекций указывают на то, что адгезия микробов на клетках эпителия и способствующая этому колонизация слизистых оболочек как вирулентный фактор имеет такое же значение, как образование токсинов.

Некоторые из этих аналогов рецепторов углеводов изолировали и выяснили их структуру. Исследования in vitro смогли доказать полную блокировку адгезии многочисленных видов бактерий, таких как EHEC, ETEC, EPEC, E.coli 078/K80, Salmonella spp. Klebsiella spp., Enterobacter spp. и другие, с помощью низких концентраций этих углеводов. Теперь было интересно выяснить, приводят ли эти углеводы, которые in vitro характеризуются исключительной блокировкой патогенных микроорганизмов, к сокращению септических и локальных осложнений в терапевтическом исследовании на модели птиц.

Неожиданно было обнаружено, что с помощью морковного супа в классическом приготовлении по MORO, мозольного чая (Blasentee) (например, смеси из полевого хвоща, желтого первоцвета, цветков земляники и исландского мха), кокосового молока, клюквы и так далее адгезия патогенных микробов, таких как, например, E.Coli, на клетках птиц, в частности на клетках эпителия желудочно-кишечного и мочеполового тракта, может быть существенно (то есть вплоть до 90%) ограничена. Это действие объясняется пектинами, присутствующими в растительных продуктах, которые в основном являются галактуронидами, образованными из 1,4-α-гликозидных цепей, кислотные группы которых на 20-80% этерифицированы метанолом, и которые кроме галактуроновой кислоты, в случае необходимости, могут содержать также другие фрагменты сахаров, например глюкозы, галактозы, ксилозы и арабинозы.

Неожиданно было установлено, что пектины или олигогалактурониды, которые до сих пор использовались для образования желе в качестве загустителей или в качестве балластных веществ, блокируют накопление микроорганизмов на клетках птиц.

Олигогалактуронид, обладающий блокирующим действием на адгезию микроорганизмов, должен характеризоваться определенной степенью полимеризации и предпочтительно определенной степенью этерификации. Понятие "степень полимеризации" в контексте данного изобретения обозначает число звеньев галактуроновой кислоты, которые содержит олигогалактуронид. Понятие "степень этерификации" обозначает процент этерифицированных (в основном посредством метила) звеньев галактуроновой кислоты олигогалактуронида относительно общего числа звеньев галактуроновой кислоты. Было установлено, что для блокирования адгезии микроорганизмов на клетки птиц требуется степень полимеризации ≥2, то есть мономерная галактуроновая кислота, так же как большое число других сахаридов (например, нейтральные сахариды, глюкуроновая кислота, арабиногалактан, галактоза-1-фосфат, глюкоза-1-фосфат), не проявляет эффекта блокирования адгезии микроорганизмов.

Согласно изобретению в фармацевтическом препарате предпочтительным является использование олигогалактуронидов со степенью этерификации <20%, особенно предпочтительно <10% и еще более предпочтительно <5%. Более всего предпочтительно в основном отсутствие эфирных групп (<2%).

Олигогалактурониды со степенью этерификации <20% получают из природных пектинов посредством полного или частичного деметилирования, например путем омыления щелочью.

Степень полимеризации олигогалактуронидов в фармацевтическом препарате согласно изобретению ≥2, то есть олигогалактуронид имеет, по крайней мере, два звена галактуроновой кислоты. Предпочтительно степень полимеризации олигогалактуронида имеет значение 2-7, еще более предпочтительно 2-4, особенно предпочтительно 2-3 и более всего предпочтительно 2. Таким образом, дигалактуронид, тригалактуронид, тетрагалактуронид, пентагалактуронид, гексагалактуронид, гептагалактуронид и смеси из нескольких этих веществ являются предпочтительными олигогалактуронидами для препаратов согласно изобретению, причем дигалактуронид или дигалактуроновая кислота предпочтительны более всего. Однако в зависимости от вида применения также могут использоваться препараты, которые не содержат вещество, лучшее по действию, если это вещество по фармацевтическим и технологическим свойствам менее благоприятно для специальной формы применения.

Олигогалактурониды со степенью полимеризации от 2 до 4 получают из природных высокомолекулярных пектинов путем ферментативного гидролиза с использованием ферментов, расщепляющих пектин (например, пектиназ), которые в технике в основном получали из грибов, например, родов Aspergillus или Penicillium. С другой стороны, гидролиз высокомолекулярных пектинов может также происходить посредством кислого гидролиза, например, с HCl.

Фармацевтические препараты согласно изобретению могут блокировать накопление микроорганизмов, особенно бактериальных микробов (например, E.coli, Streptokokken, Salmonella spp., Klebsiella spp, Enterobacter spp., Haemophilus influenza, Pneumokokken и т.д.) на клетках птиц или вытеснять уже связанные микроорганизмы. В особенности пригодны препараты согласно изобретению для лечения инфекций желудочно-кишечного тракта, кровеносной системы (гемолитический уремический синдром, вызываемый E.coli 0157), дыхательных путей, мочеполового тракта (например, рецидивирующие инфекции мочевого тракта) и/или полости глотки (например, вызванные посредством Streptokokken, H. influenzae, Pneumokokken).

Фармацевтические препараты согласно изобретению могут, с одной стороны, применяться при уже имеющемся заболевании и, с другой стороны, также профилактически. Например, возможны следующие варианты приема:

а) оральный прием для лечения, например, желудочно-кишечного тракта, мочевого тракта в качестве добавки к регидратационным растворам, в качестве профилактики против аномальных колонизаций в желудочно-кишечном тракте и т.д.

b) локальное применение, например, для лечения полости глотки, мочеполового тракта и т.д. и

с) парентеральное введение.

Олигогалактурониды встречаются в качестве составных частей полисахаридов в большом числе кормовых средств и добавок к кормовым средствам, и поэтому могут вводиться перорально, то есть они не токсичны и исключительно пригодны для фармацевтического использования.

Углеводы, аналогично рецепторам для патогенных микроорганизмов, уже в концентрациях от 0,05 до 0,1% в состоянии блокировать адгезию бактериальных микроорганизмов in vitro.

Галактурониды, используемые для фармацевтических препаратов согласно изобретению, могут быть получены из полисахаридов, происходящих из растений, например из моркови, цитрусовых, яблок, айвы, сахарной свеклы, кокосового молока и других растений или растительных продуктов.

Для получения олигогалактуронидов исходные материалы предпочтительно измельчают и экстрагируют горячей водой. Экстракты могут сначала лиофилизироваться или также непосредственно перерабатываться далее. Дальнейшая переработка предпочтительно происходит хроматографическими методами, посредством которых возможно отделение галактуронидов от других компонентов экстракта (например, других сахаридов). Предпочтительными хроматографическими методами разделения являются гельхроматография (например, разделительные материалы BioGel^®, Sephacril^®) и/или анионообменная хроматография (например, разделительные материалы DEAE- Sephacel^®). Полученные пектины для уменьшения степени этерификации могут далее частично или полностью подвергаться омылению, и/или для уменьшения степени полимеризации подвергаться гидролизу путем обработки кислотой или ферментативно.

Описание фигур

Фигура 1 отражает ежедневную запись числа умерших животных на группу.

Фигура 2 показывает вероятность выживания в виде функции выживания.

Фигура 3 показывает изменение E.coli во флоре кишечника в отдельные периоды действия.

Обозначения: hg = высокая степень, mg = средняя степень, gg = низкая степень, v = единичная степень; V = время предварительного наблюдения; n=10, BV = время лечения опытной группы n=20, BK = время лечения контрольной группы n=20.

Далее изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1

Свежую морковь моют, чистят и шинкуют. Посредством экстракции кипящей водой и последующей лиофилизации получают водорастворимые полисахариды.

Следует первая хроматографическая стадия разделения через колонку с BioGel P2 и дистиллированной водой в качестве элюента. Вещества, элюирующие в вытесненном объеме этой колонки (SF A), объединяют и второй раз разделяют посредством гельхроматографии. В качестве разделительного материала служит Sephacril S-3000HR, и в качестве элюента опять дистиллированная вода. Из двух пиков веществ, которые теперь появляются, собирают позднее элюирующий.

Третьей стадией очистки является ионообменная хроматография через DEAE-Sephacel с градиентом буфера в качестве элюента (0,011 М - 1 М фосфатный буфер, рН 6,4). Фракция, которая элюируется с высокой молярностью (SF II), собирается и перерабатывается далее. После этого следуют гидролиз HCl (pH 1,00, 37°С, 45 мин) и регенерация сахаридов посредством осаждения спиртом.

Гидролизат разделяют путем гельхроматографии (Sephacril S-2000HR, элюент: дистиллированная вода) на три группы веществ, причем углеводы с самым малым молекулярным весом (SF 2/3) собирают.

Антиадгезивная активность фракций, с которыми работают далее, превосходит антиадгезивную активность возможных побочных продуктов.

Интенсивность ингибирования отдельных веществ повышается в ходе переработки от 50% в 0,7%-ном растворе (для SF A) через 86,4% в 0,005%-ном растворе (для SF II) до полного ингибирования также в 0,005%-ном растворе (для SF 2/3).

Это объясняется тем, что с возрастающей чистотой концентрация, необходимая для достижения определенного эффекта, отчетливо уменьшается. Это находится в противоречии с использованием коммерчески доступных пектинов, которые для достижения похожего эффекта должны использоваться в очень высоких концентрациях.

Пример 2

Омыление

11,3 г цитрусового пектина, Fa. Grinstedt (вещество А_о) растворяют в 1200 мл дистиллированной воды, смешивают с 480 мл 0,5 N NaOH и 15 мин омыляют при комнатной температуре. Раствор доводят концентрированной муравьиной кислотой до рН 4,0. Омыленный пектин осаждают двойным объемом метанола, растворяют в 200 мл воды и осаждение повторяют еще 2 раза в равном количестве воды. Осадок, полученный после этого, сушат при 50°С (вещество А₁).

Выход: 7,15 г.

Ферментативный гидролиз

Высушенный осадок растворяют в 100 мл 0,1 М раствора гидрокарбоната натрия, доводят муравьиной кислотой (1 М) до рН 4,5, смешивают с 21 мг пектиназы 5S из Aspergillus niger (Fa. Serva) и 60 минут инкубируют при 60°С. Исходную смесь для активации фермента короткое время нагревают до 80°С, охлаждают и осаждают метанолом выше описанным способом. Путем центрифугирования (20 минут, 4000 об/мин) получают осадок и сушат.

Выход: 5 г (вещество А₂).

Посредством контроля тонкослойной хроматографией проверяют, получились ли в результате гидролиза достаточные количества желаемых олигогалактуронидов.

Условия тонкослойной хроматографии

Неподвижная фаза:	готовые пластинки ТСХ кизельгель 60 (Fa. Merck) 10 см × 20 см
Элюент:	этанол: водная уксусная кислота 25 мМ 1:1
Проявление:	при 35оС
Реагент для разбрызгивания:	200 мг нафталин-1-3-диола в 50 мл метанола плюс 50 мл H2SO4 (20% вес/вес)

Хроматография:

1,5 г продукта гидролиза растворяют в 15 мл дистиллированной воды и подвергают хроматографическому фракционированию.

Колонка:	Стеклянная колонка Fa. Bio-Rad (2,5/40 см). Объем слоев 150 мл
Элюент:	Буфер: формиат Na рН 4,7, ступенчатый градиент по 182 мл 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7 М
Неподвижная фаза:	Bio-Rad AGMP 1 анионообменная смола (с приведенным в равновесие элюентом)
Расход:	3 мл/мин
Объем фракции:	22 мл

Исследуют состав отдельных фракций с помощью ТСХ (условия смотри выше). Фракции одинакового состава объединяют и осаждают двукратным объемом ацетона. Олигогалактурониды, полученные в таком виде и таким способом, осаждают посредством центрифугирования (4000 об/мин) и поглощают 20 мл дистиллированной воды.

В раствор вмешивают катионообменник (Н⁺) Bio-Rad AG 50 W X-8, для того чтобы галактурониды перевести в свободную кислую форму. После удаления смолы и лиофилизации фильтрата получают хлопьевидный белый порошок.

Результаты ингибирования представлены в следующей таблице.

Таблица
Обозначение вещества	Характеристика	Конц. в %	Блокирование в %
A0	пектин USP1)	0,7	15,3
A1	омыленный пектин	0,2	10,0
A2	частично гидролизованный А1	0,05	30,2
F1	нейтральный ди- и трисахарид	0,005	0,0
F2	нейтральный трисахарид	0,005	0,0
F3	нейтральный тетрасахарид	0,005	0,0
F4	тригалактуронид	0,005	84,6
F5	тетрагалактуронид со следами тригалактуронида	0,005	58,6
F6	тетрагалактуронид	0,005	52,7
F7	пента-гексагалактуронид	0,005	23,9
1)цитрусовый пектин (F. Grindstedt)

Пример 3

Материалы и методы

Популяция животных

2300 животных на ферме кур-несушек проявляли в последние недели до начала исследований по лечению следующие клинические симптомы: куры находились в плохом общем состоянии, наблюдались трудности с кормлением, у большинства кур был кровавый понос и дурно пахнущая клоака. Яйценоскость непрерывно снижалась, ежедневные потери животных составляли в среднем по 5 животных в день.

Описание опыта

Для испытаний по лечению животные были разделены по случайной выборке на две приблизительно равные большие группы, из которых только одну (группу, подвергавшуюся лечению) лечили согласно изобретению. Посменно в распоряжение обеих групп предоставляли огороженное место на открытом грунте. Испытание в перспективе разделяли на три периода.

1. Предварительный период наблюдения. Предварительный период наблюдения служил для описания состояния популяции кур, исходной продуктивности и для сравнения между обеими группами.

2. Период лечения 1 неделя. В этот период в корм для группы, подвергавшейся лечению, подмешивали различные биологически активные вещества.

3. Заключительный период наблюдения. 10 дней для оценки продолжительности действия олигогалактуронидов.

Кормовое средство

Все куры получали стандартный корм с кукурузой. В группе, подвергавшейся лечению, дополнительно подмешивали 1% кислых олигогалактуронидов. Обычное количество корма на курицу составляло 140 г/день. Куры дополнительно получали воду без ограничений. Продолжительность лечения составляла 7 дней.

Клиническая оценка

а) Оценка убыли: Проводилась ежедневная запись числа умерших животных на группу (Фиг.1).

b) Исследование патологии: В конце предварительного периода наблюдений 10 животных были забиты и обследованы на предмет патологических изменений в системе органов, прежде всего кишечника и половых органов. В конце периода лечения и 10 дней после окончания периода лечения по 20 животных в каждой группе было забито и обследовано на предмет патологических изменений органов, указанных выше.

с) Микробиологическое исследование: У животных, описанных выше, были проведены полуколичественные исследования флоры стула. Исследования проводили на грамотрицательных Enterobacteriaceae с дифференцированием между E.coli и специально принятым во внимание патогенным куриным штаммом 078/К80, а также Proteus spp. Далее были дифференцированы Enterokokken, Staphilokokken, аэробные спорообразователи, Clostridium spp и Candida albicans. Полуколичественная оценка осуществлялась в

единичной степени = 10³

низкой степени = 10⁵

средней степени = 10⁷

высокой степени = 10⁹ колоний на грамм стула.

d) Оценка повышения продуктивности: Яйценоскость кур-несушек в группе, подвергавшейся лечению олигосахаридами, сравнивалась с яйценоскостью животных, не подвергавшихся лечению. Ежедневно фиксировалось число яиц на группу. Также были охарактеризованы качество яиц, толщина скорлупы, предел прочности, степень покрытия пятнами крови.

Результаты

Клиническая оценка

Обе группы в течение от 2 до 3 дней после начала кормления олигогалактуронидами существенно различались по дальнейшей клинической картине.

а) Число убыли

Число умерших животных в предварительный период наблюдения, период лечения и период после окончания лечения представлено в таблице 1. Показано, что в предварительный период наблюдения 5 дней и в первые 3 дня лечения в обеих группах наблюдались похожие высокие потери животных. С 4-го дня лечения в двух группах происходило отчетливое расхождение потерь животных: в то время как в группе, подвергавшейся лечению, между 4-м и 7-м днем лечения умерло 5 животных, в контрольной группе в равный период времени потери составили 16 животных. Также в период после окончания лечения 12 дней этот эффект сохранялся: в то время как в группе, подвергавшейся лечению, умерло 8 животных, в контрольной группе в равный период времени потери составили 39 животных. Изображение вероятности выживания животных в обеих группах представлено в виде функции выживания на Фиг.2.

b) Исследование патологии

В предварительный период наблюдений у 40% забитых животных наблюдались патологические изменения в форме фибринозного воспаления серозных оболочек, перитонита и сальпингита. В конце периода лечения патологические изменения были найдены в контрольной группе у 35% животных, в группе животных, подвергавшихся лечению, - только у 10%. Через 10 дней после окончания лечения констатировали патологические изменения органов в контрольной группе у 45%, в группе, подвергавшейся лечению, - у 12%. Этот благоприятный эффект сохранялся также в течение 14 дней сверх периода наблюдения после отмены галактуронидов в пище.

Полуколичественные исследования флоры стула дали существенное уменьшение патологической флоры Coli в группе животных, подвергавшихся лечению, и значительную регенерацию нормальной флоры по сравнению с группой животных, не подвергавшихся лечению. Также и яйценоскость в группе животных, подвергавшихся лечению, в период наблюдения улучшилась, по крайней мере, на 5,8%.

Олигогалактурониды пригодны для лечения тяжелых бактериальных инфекций в ветеринарной медицине в качестве замены антибиотиков. Они хорошо переносимы, не характеризуются развитием резистентности и обладают продолжительным эффектом, который сохраняется также после отмены пищевой добавки.

с) Бактериологические исследования

В предварительный период наблюдения у 10 кур были полуколичественно исследованы пробы стула. Оказалось, что 8 из 10 кур колонизированы в высокой степени E.Coli, 1 курица была колонизирована в высокой степени Proteus spp. 5 из 10 кур имели куриный патогенный серотип 078 K80.

В период лечения произошли существенные количественные изменения во флоре кишечника. Нормальная флора кишечника устойчива в обеих группах. Однако произошло явное количественное изменение флоры Coli во время лечения: 7 из 20 кур в группе, подвергавшейся лечению, характеризовались высокой степенью колонизации E.Coli, 9 из 20 средней степенью и 3 низкой степенью колонизации. У 2 была персистированная колонизация 078 K80. Напротив, в контрольной группе 16 из 20 кур характеризовались высокой степенью и 4 из 20 кур средней степенью колонизации E.Coli. У 4 из 20 кур имелась высокая степень колонизации Proteus spp. 5 из 20 кур характеризовались персистированной колонизацией E.Coli 078 K80.

Фиг.3 показывает изменение флоры кишечника в отдельные периоды лечения. В группе кур, получающих олигогалактурониды с пищей, сохранялся физиологический состав флоры.

Оценка яйценоскости

Различие в яйценоскости между курами, подвергаемыми лечению олигосахаридами, и курами в контрольной группе после учета умерших кур составляла в период лечения 3,79%, в заключительный период наблюдения - 4,2%. Это дает общую разницу 4,08% (=47 яиц/день) в пользу кур, подвергавшихся лечению галактуронидами.

1. Способ блокирования накопления патогенных микроорганизмов на клетках птиц, отличающийся тем, что вводят в качестве биологически активного вещества один или несколько олигогалактуронидов со степенью полимеризации ≥ 2 и степенью этерификации <20%, в случае необходимости вместе с обычными фармацевтическими носителями, разбавителями, добавками и наполнителями в форме, пригодной для приема.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что степень этерификации олигогалактуронида <10%.

3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что степень этерификации олигогалактуронида <5%.

4. Способ по пп.1-3, отличающийся тем, что степень полимеризации олигогалактуронида имеет значение 2-7.

5. Способ по пп.1-4, отличающийся тем, что степень полимеризации олигогалактуронида имеет значение 2-6.

6. Способ по пп.1-5, отличающийся тем, что степень полимеризации олигогалактуронида имеет значение 2-5.

7. Способ по пп.1-6, отличающийся тем, что степень полимеризации олигогалактуронида имеет значение 2-4.

8. Способ по пп.1-7, отличающийся тем, что степень полимеризации олигогалактуронида имеет значение 2-3.

9. Способ по пп.1-8, отличающийся тем, что степень полимеризации олигогалактуронида имеет значение 2.

10. Способ по одному из пп.1-9 для лечения инфекций желудочно-кишечного тракта, кровеносной системы, дыхательных путей, мочеполового тракта и/или полости глотки птиц, причем инфекции вызваны накоплением патогенных микроорганизмов на клетках птиц.