Д. г.-а. вальковский, в. и. мисюрев.р. к. дыбовский, в. в. андрианов и м. а. гулькоордена ленина институт элементоорганических соединенийан ссср
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
246525
Goes Соеетских
Социалистических
Республик
ВЫ(: МЗНАя
11ЛТГ11Т110Т: Х 111 -ХС1, лЯ
БИБ ИОТЕ1А
Зависимое от авт. свидетельства №
Заявлено 16Л 1/.1968 (№ 1230501/28-13) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 20Х1.1969. Бюллетень № 21
Дата опубликования описания 17.XI.1969
Кл. 12ч, 6/01
6b, 16/03
МПК G 071
С 12d
УДК 663.11:576.8 (088.8) Комитет пс делам изобретений и аткрытнй при Сосете Министрое
СССР
Авторы изобретения С. В. Рогожин, А. М. Мамцис, Д. Г.-А. Вальковский, В. И. Мисюрев.
P. К. Дыбовский, В. В. Андрианов и М. А, Гулько
Ордена Ленина институт элементоорганических соединений
АН СССР
Заявитель
СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ ИЗ КЛЕТОЧНОГО МАТЕРИАЛА
Изобретение относится к микробиологии, в частности, к области получения микробиологического пищевого белка из углеводородов нефти.
Известен способ выделения белков из клеточного материала, например из бактерий, путем воздействия ультразвуковой кавитации на водную бактериальную суспензию.
Для облегчения процесса выделения белков путем предварительного разрушения клеточных оболочек с одновременной экстракцией кировых веществ предлагается клеточный материал перед воздействием кавитации обезвоживать, клеточную суспензию готовить на органическом растворителе. Для отделения растворителя дезинтегрированный материал сушат, например в вакууме, после чего белок экстрагируют раствором щелочи и изолируют его, например, осаждением кислотой в изоэлектрической точке.
Предлагаемый способ заключается в следующем.
Влажный клеточный материал сушат, например, экстракцией ацетоном, затем загружают в кавитационную мельницу вместе с органическим растворителем и экспанируют оппеделенное время.
Во время кавитационного воздействия на клеточный материал клеточные оболочки разрушаются, а содержащиеся в клетках жировые вещества и витамины групп А и Д переходят в растворитель. Дезинтегрированный материал промывают растворителем до удаления остатков жировых веществ, после чего от5 деляют растворитель сушкой, например, в вакууме. Затем белок экстрагируют раствором щелочи и изолируют, например, осаждением кислотой в изоэлектрической точке.
Пример 1. Свежие влажные дрожжи рода
10 Candida в количестве 100 г, полученные на чистых жидких парафинах (сухой остаток
25 г), промывают сухим ацетоном для полного удаления воды.
Навеску в 20 г обезвоженного клеточного
15 материала обрабатывают в течение 15 мак в кавитационной мельнице при 7 — 10 С в хлористом метилене (50 мл) до степени разрушения клеток, равной 98% (по данным электронной микроскопии).
20 Разрушенный клеточный материал отделяют от хлористого метилена на фильтре, дополнительно промывают хлористым метиленом ог липидов и растворитель удаляют сушкой в вакууме при 60 — 70 С.
25 Затем 15 г клеточного материала (освобожденного от растворителя) экстрагируют 0,1 н. раствором КаОН, клеточные оболочки и нерастворимые примеси отделяю1 центрифуги рованием, а из раствора белки осаждают
30 10%-ным раствором уксусной кислоты при рН
246525
Предмет изобр етения
Составитель М. Андреева
Техред Л. В. Куклина Корректор С. М. Сигал
Редактор А. Бер
Заказ 2889/3 Тираж 480 Подписное
ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, Центр, пр. Серова, д. 4
Типография, пр. Сапунова, 2
4 — 4,5. Выпавшие белки промывают водой, ацетоном для удаления воды и сушат при 60—
70 С. Выход белков (при влажности 100 ) составляет 70%.
Элементарный анализ полученного продукта дал следующие результаты, : N 13,6;
С 48,2; Н 6,85; P — следы.
Пример 2. Пекарские дрожжи Saccharam
cerev так же, как в первом примере, промывают водой и сушат ацетоном. Сухой клеточный материал обрабатывают в кавитационной мельнице в течение 20 лаан и при температуре
7 — 10 С. Степень разрушения клеточных мембран составляет 96%.
Навеску в 10 г разрушенного клеточного материала после удаления органического растворителя обрабатывают 0,1 н. раствором
ХаОН и после отделения на центрифуге клеточных оболочек белки из раствора осаждают
10%-ным раствором уксусной кислоты.
После промывки водой и ацетоном и сушки при 60 — 65 С получено 2,15 г белка в виде белого порошка.
Выход продукта составляет 65%.
При элементарном анализе получены следующие результаты: N 15,0%; P — следы.
Способ выделения белков из .клеточного материала, например из микроорганизмов, предусматривающий воздействие кавитации на
l0 клеточную суспензию, отличающийся тем, что, с целью облегчения процесса выделения белков путем предварительного разрушения клеточных оболочек с одновременной экстракцией жировых веществ, клеточный материал перед
15 воздействием кавитации обезвоживают, а для приготовления клеточной суспензии используют органический растворитель, причем от полученного в результате воздействия кавитации дезинтегрированного материала отделяют ра20 створитель сушкой, например, в вакууме, и экстрагируют белок раствором щелочи с последующей его изоляцией, например осаждением кислотой в изоэлектрической точке.
