Способ повышения иммуногенности антигенов b. pseudomallei при экспериментальном мелиоидозе

Способ предусматривает иммунизацию животных с использованием поверхностных мелиоидозных антигенов в липосомальной форме, а для дополнительной стимуляции механизмов клеточного иммунитета вместе с цитокинами вводят иммуномодулятор бестим. Оценку стимулирующего воздействия препаратов на иммунную систему осуществляют в динамике иммунного ответа по уровню ГЗТ и степени хемилюминесцентного ответа на зимозан перитонеальных макрофагов иммунизированных мышей. О протективности антигенов судят по показателям летальности (проценту выживших животных и средней продолжительности жизни) после контрольного заражения вирулентной культурой В. pseudomallei. Иммуногенные и протективные свойства антигенов существенно возрастают за счет использования антигенов в липосомальной форме и включения в схему иммунизации активатора клеточного иммунитета бестима. Использование способа позволит усилить иммуногенность мелиоидозных антигенов при разработке средств специфической профилактики мелиоидозной инфекции. 6 табл., 2 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, в частности к микробиологии и иммунологии, и касается способа повышения иммуногенности антигенов возбудителя мелиоидоза - Burkholderia pseudomallei.

Мелиоидозная инфекция, эндемичная для стран Юго-Восточной Азии, представляет потенциальную опасность и для нашей страны вследствие бурного роста разнообразных туристических, экономических, культурных связей между разными регионами мира в современных условиях глобальной интеграции. Не следует также забывать о том, что мелиоидоз является, по данным международных экспертов, возможным оружием при биотеррористических атаках [1].

Как известно, специфическая профилактика мелиоидоза пока не разработана, что в значительной мере связано с низкой протективностью мелиоидозных антигенов. В связи с этим актуальной задачей является поиск средств и методов повышения иммуногенных и протективных свойств антигенов В.pseudomallei. Одним из современных подходов к решению этой задачи является использование препаратов рекомбинантных цитокинов. По данным ряда зарубежных исследователей цитокины играют существенную роль в патогенезе мелиоидоза и, прежде всего, Th1-цитокины, отвечающие за формирование преимущественно клеточного типа иммунного ответа [2, 3, 4, 5]. Клинически доказана высокая терапевтическая эффективность препаратов гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (G-CSF) при их совместном применении с антибиотиками в лечении острого мелиоидоза у людей [6]. В экспериментальных условиях получены убедительные данные по стимуляции с помощью ИЛ-1 резистентности мышей к псевдотуберкулезной инфекции [7]. Нами ранее показана возможность стимуляции поствакцинального иммунитета к мелиоидозным антигенам с помощью цитокинов ИФН-γ и ИЛ-2, вводимых совместно с антигенами при первичной (ИФН-γ) и вторичной (ИЛ-2) иммунизации [8]. Данная работа является наиболее близким аналогом предлагаемому способу стимуляции иммуногенности антигенов В. pseudomallei.

Целью изобретения является усиление иммуногенности мелиоидозных антигенов при экспериментальном мелиоидозе за счет инкапсулирования антигенов в липосомы и использования пептидного иммунорегулятора бестим.

Поставленная цель достигается тем, что при первичной и вторичной иммунизации липосомальными мелиоидозными антигенами вместе с цитокинами (ИФН-γ и ИЛ-2) дополнительно вводится препарат бестим, что обеспечивает более высокий уровень реагирования систем клеточного иммунитета и обеспечивает повышение иммуногенных и протективных свойств антигенов.

Для иммунизации мышей применяют поверхностный антигенный комплекс, в частности смесь антигена 6 и антигена d (АГ6+d), который предварительно инкапсулируют в липосомы таким образом, чтобы включение антигенного материала составляло не менее 80%. Антигенный липосомальный комплекс вводят мышам подкожно в дозе 40 мкг по белку двукратно с интервалом 10 сут. Препараты рекомбинантных цитокинов вводят животным подкожно одновременно с иммунизацией мелиоидозными антигенами и в последующие 2 сут, при первичной иммунизации используют ИФН-γ (ингарон) в дозе 20 ME, при вторичной - ИЛ-2 (ронколейкин) в дозе 1 мкг. Иммуномодулятор бестим вводят подкожно вместе с цитокинами в дозе 0,07 мкг. О влиянии данной схемы стимуляции на иммуногенные свойства антигенов судят по реакциям клеточного иммунитета (уровень ГЗТ) и макрофагальной системы (фагоцитарная активность перитонеальных макрофагов-ПМ) в динамике иммунного ответа на 8 и 18 сут после первичной иммунизации. Для оценки протективности антигенов животных заражают спустя 21 сут после первичной иммунизации вирулентной культурой В. pseudomallei 100. За животными наблюдают 30 сут, затем рассчитывают показатели летальности: процент погибших и среднюю продолжительность жизни (СПЖ), по которым судят о протективности мелиоидозных антигенов.

Пример 1

Схема профилактики экспериментального мелиоидоза, разработанная нами ранее, включает использование в процессе иммунизации вместе со специфическими антигенами препаратов рекомбинантных цитокинов [8].

Дальнейшее усовершенствование этой схемы шло по пути увеличения как иммуногенности самих антигенов путем использования их в более иммуногенной липосомальной форме, так и по пути усиления ответной реакции иммунной системы животных на введение антигенов за счет использования новых современных иммуномодуляторов (ИМ).

По данным ряда авторов включение антигенов в липосомы способствует усилению их иммуногенных и протективных свойств, что было показано и в отношении антигенов возбудителей особо опасных инфекций [9], в том числе и антигенов возбудителя мелиоидоза [10]. В качестве ИМ нами были испытаны препараты бестим и имунофан. Бестим - дипептид, состоящий из глутамина и триптофана, соединенных между собой γ-связью (γ-Д-глутамил-L-триптофан), обладает способностью вызывать дифференцировку Th1-лимфоцитов и стимулировать продукцию ИЛ-2 и ИФН-γ [11]. Препарат имунофан-синтетический гексапептид по механизму действия близок к бестиму [12].

В наших экспериментах в сравнительном плане большую иммунологическую эффективность показал иммуномодулятор бестим. При включении его в схему иммунизации (однократное введение при первичной и вторичной иммунизации) отмечена положительная динамика изменения показателей клеточного иммунитета и фагоцитарной активности макрофагов мышей на 8 и 18 сут наблюдения после первичной иммунизации. Результаты экспериментов приведены в таблицах 1, 2. Как видно из данных таблицы 1, мелиоидозный комплекс АГ6+d как в исходной, так и в липосомальной форме и в различных сочетаниях (с бестимом, с цитокинами) уже на 8 сут после иммунизации формирует у мышей отчетливую ГЗТ (р<0,05). При этом уровни ГЗТ во всех группах достоверно не различаются между собой за исключением мышей, получавших цитокины совместно с бестимом: степень ГЗТ у мышей данной группы была достоверно выше, чем у привитых только липосомальными антигенами (р<0,05). Высокий уровень ГЗТ у мышей, стимулированных цитокинами и бестимом, сохранялся и на 18 сут наблюдения (р<0,05). Аналогичная динамика зарегистрирована и при изучении фагоцитарных показателей иммунизированных животных (табл.2). Включение АГ6+d в липосомы, а также дополнительное воздействие бестимом и цитокинами существенно увеличивало фагоцитарную активность ПМ по отношению к изолированной иммунизации только липосомальными антигенами уже на 8 сут наблюдения (р<0,05), причем эти различия сохранялись и на 18 сут наблюдения. Следует обратить особое внимание на то, что включение бестима в схему иммунизации приводило уже на ранних этапах иммуногенеза (на 8 сут) к существенному росту уровня ГЗТ и фагоцитарной активности ПМ, в то время как использование ранее разработанной нами схемы стимуляции с цитокинами [8] способствовало достоверному повышению показателей клеточного иммунитета только к концу периода иммуногенеза (на 18 сут наблюдения) (табл.1, 2). Раннее формирование защитных клеточных реакций, обусловленное ранним цитокиновым провоспалительным ответом, по данным ряда авторов, имеет определяющее значение в резистентности к мелиоидозной инфекции и защите макроорганизма от развития неблагоприятной острой формы болезни [13, 14, 15].

Изучение протективности мелиоидозных антигенов, введенных с использованием разных схем стимуляции, показало, что АГ6+d в дозе 40 мкг обладал низкой протективностью, превышающей таковую в контрольной группе интактных мышей на 11,3% (табл.3). Выживаемость мышей возрастала на 18,7% при использовании антигенов в липосомальной форме. Более существенное увеличение выживаемости отмечено при стимуляции иммунизированных животных цитокинами совместно с бестимом, при этом выживаемость превышала контрольные показатели у интактных мышей на 50,6% (р<0,05). Показатель СПЖ в группе мышей, получавших цитокины и бестим, также был достоверно выше, чем в контроле (р<0,05), причем сохранялся на повышенном уровне и при заражении более высокой дозой возбудителя мелиоидоза (20 ЛД50).

Таким образом, использование мелиоидозных антигенов в липосомальной форме в сочетании с дополнительным введением в схему иммунизации бестима способствовало существенному росту иммунологических показателей иммунизированных животных уже на ранних этапах иммуногенеза и повышению протективности антигенов.

Учитывая, что в защите от мелиоидоза первостепенное значение имеют клеточные механизмы иммунитета, становится понятным стимулирующее действие бестима при включении его в схему иммунизации мелиоидозными антигенами. Являясь синтетическим аналогом одного из активных центров гормона тимуса тимопоэтина, бестим индуцирует дифференцировку предшественников Т-лимфоцитов. Кроме того, за счет способности бестима повышать продукцию ИФН-γ и ИЛ-2 в организме животных происходит дополнительная эндогенная стимуляция этими важнейшими цитокинами как ранних клеточных реакций за счет ИФН-γ, так и процессов накопления специфических Т-эффекторов за счет ИЛ-2. Использование мелиоидозных антигенов в более иммуногенной липосомальной форме в сочетании с иммуностимуляцией цитокинами и бестимом способствует существенному повышению иммуногенности и протективности мелиоидозных антигенов.

Пример 2

В экспериментах на белых мышах нами было установлено, что включение бестима в схему иммунизации мелиоидозными антигенами приводило к стимуляции иммуногенных и протективных свойств антигенов, причем бестим в данной схеме применялся однократно при первичной и однократно при вторичной иммунизации. Нами была проведена серия экспериментов по изучению влияния кратности введения бестима на иммуногенность мелиоидозных антигенов. В этих опытах в качестве препарата сравнения был использован иммуномодулятор имунофан. Животных иммунизировали дважды с интервалом 10 сут инкапсулированными мелиоидозными антигенами совместно с цитокинами, а иммуномодулирующие пептиды бестим и имунофан вводили однократно (при первичной и при вторичной иммунизации), двукратно или трехкратно. При однократной стимуляции разовая доза бестима (она же курсовая) составляла 0,2 мкг/мышь, при двукратной - 0,1 мкг, при трехкратной - 0,07 мкг. Разовая доза имунофана при 1-2-3-кратном применении составляла 0,02 мкг/мышь. Показатели иммунитета определялись у животных на 18 сут после первичной иммунизации. Полученные результаты отражены в таблицах 4, 5. Согласно данным таблицы 4 более высокие показатели, характеризующие клеточный иммунитет, зарегистрированы при использовании бестима по сравнению с имунофаном. При этом трехкратное введение бестима мышам обеспечивало явные преимущества по сравнению с одно- или двукратной стимуляцией (р<0,05). Определение уровня хемилюминесцентного ответа ПМ мышей на зимозан подтвердило большую эффективность трехкратного введения бестима в обеспечении эффективной стимуляции процесса фагоцитоза, при этом фагоцитарная активность ПМ мышей достоверно превосходила таковую при одно- и двукратном введении препарата (табл.5).

При изучении протективности антигенов, стимулированных по данным схемам, было показано, что при 1-3-кратной стимуляции иммуногенеза бестимом и при 1-2 кратной стимуляции имунофаном выживаемость животных от 10 ЛД50 В. pseudomallei превышала таковую у контрольных животных и составляла 43-61,5% при использовании бестима и 41,7-50% - при введении имунофана. Самый низкий показатель летальности (38,5%) отмечен в группе животных с трехкратной стимуляцией бестимом.

Таким образом, бестим проявил более выраженные иммуностимулирующие свойства по отношению к мелиоидозным антигенам, чем имунофан. В данных опытах определена оптимальная схема применения бестима - трехкратное введение при первичной и при вторичной иммунизации вместе с цитокинами, позволяющая существенно повысить иммуногенные и протективные свойства мелиоидозных антигенов.

Приведенные примеры показывают, что предлагаемый способ стимуляции иммуногенности антигенов В. pseudomallei позволяет уже на ранних этапах иммуногенеза значительно повысить иммунологические показатели, характеризующие состояние Т-клеточного иммунитета, что способствует увеличению выживаемости животных при заражении высоковирулентной культурой возбудителя мелиоидоза. Предлагаемый способ может использоваться в учреждениях, занимающихся разработкой средств специфической профилактики особо опасных инфекций.

ЛИТЕРАТУРА

1. Организация ликвидации медико-санитарных последствий биологических, химических и радиационных террористических актов. Практическое руководство. // Москва, ФГУ «ВЦМК «Защита». - 2005. - 328 с.

2. Elevated plasma concentrations of interferon (IFN)-gamma and IFN-gamma-inducing cytokines interleukin (IL)-18, IL-12 and IL-15 in severe melioidosis / Lauw F.N., Simpson A.J., Prins J.M. et al. // J. Infect. Dis. - 1999. - V.180, N.6. - P.1878-1885.

3. Prognostic value of cytokine concentrations (tumor necrosis factor-alpha, interleukin-6 and interleukin-10 and clinical parameters in severe melioidosis / Simpson A.J., Smith M.D., Weverling G.J. et al. // J. Infect. Dis. - 2000. - V.181, N.2. -P.621-625.

4. Ulett G.C., Ketheesan N., Hirst R.G. Proinflammatory cytokine mRNA responses in experimental Burkholderia pseudomallei infection in mice // Acta Trop. - 2000. - V.74, N.2-3. - P.229-234.

5. Koo G.C., Gan Y.H. The innate interferon gamma response of BALB/c and C57B 1/6 mice in vitro Burkholderia pseudomallei infection // BMC Immunology. - 2006. - N.7. - P.19.

6. Cheng A.C., Stephens D.P., Anstey N.M., Currie B.Y. / Adjunctive granulocyte colonystimulating factor for treatment of septic shock due to melioidosis // Clin.Infect.Dis. - 2004. - №38(1). P.32-37.

7. Зезюлин П.Н., Минаева Е.Н., Синкевич И.Е., Симбирцев A.C. Изучение противоинфекционного защитного действия рекомбинантного интерлейкина-1 бета на модели летальной бактериальной инфекции. // Мед. иммунол. - 2005. - Т.7, №2-3, С.299.

8. Жукова С.И., Демьянова О.Б., Авророва И.В., Алексеев В.В., Храпова Н.П., Ломова Л.В. Способ повышения протективности мелиоидозных антигенов цитокинами. // Патент на изобретение №2376031. Зарегистр.в Госреестре изобретений РФ 20.12.2009 г

9. Куликов В.Н., Кашкин К.П., Драновская Е.А. Включение протективного антигена Br. abortus в липосомы и иммуногенные свойства антигенсодержащих липосом. // Ж. Микробиол. - 1985. - №12. - С.69-72.

10. Повышение протективности мелиоидозных антигенов за счет их включения в липосомы / Жукова С.И., Рыбкин B.C., Пивень Н.Н., Авророва И.В., Ротов К.А., Прошина О.Б. // Медицинская микробиология-XXI век, Саратов, 2004. Материалы Всероссийской науч.-практич. конф. (28-20 сентября 2004 г.). Саратов, С.96

11. Изучение иммуномодулирующей активности нового пептидного соединения бестима. / Н.В.Пигарева, A.C.Симбирцев, А.А.Колобов // Иммунология, 2000, №1, С.33-35.

12. Лебедев В.В. Имунофан - синтетический пептидный препарат нового поколения: иммунологические и патогенетические аспекты клинического применения. // Иммунология. - 1999. - №1. - С.25-30.

13. Demonstration of a cell-mediated immune response in melioidosis / Ketheesan N., Bames J.L., Ulett G.C. et al. // J. Infect. Dis. - 2002. - V.186, N.2. - P.286-289.

14. Adaptive immunity in melioidosis: a possible role for Т cells in determining outcome of infection with Burkholderia pseudomallei / Bames J.L., Wamer J., Melrose W. et al. // Clin. Immunol. - 2004. - V.113, N.1. - P.22-28.

15. Role of Т cells in innate and adaptive immunity against murine Burkholderia pseudomallei infection / Haque A., Easton A., Smith D. et al. // J. Infect. Dis. - 2006. - V.193, N.3. - P.370-379.

Таблица 1
Уровень реакции ГЗТ мышей, иммунизированных мелиоидозными антигенами в сочетании с бестимом и цитокинами
№ п/п Препараты для иммунизации Индекс реакции ГЗТ, %
8 сут 18 сут
1 АГ 16,02±1,64 20,31±1,74
2 АГл 19,6±1,93 25,73±1,92
3 АГл+ бестим 20,4±1,58 31,29±2,61
4 АГл+ИФН-γ+ИЛ-2 22,9±2,04 37,53±1,76*
5 АГл+ИФН-γ+ИЛ-2+ бестим 25,02±1,48* 35,67±2,08*
6 Контроль (интактные) 5,4±0,9 6,2±1,01
* - различия достоверны по отношению к группе мышей, иммунизированных АГл (р<0,05).
** - здесь и далее АГл - липосомальная форма АГ.
Таблица 2
Фагоцитарная активность ПМ мышей после введения липосомальных мелиоидозных антигенов совместно с бестимом и цитокинами
№ п/п Препараты для иммунизации Уровень хемилюминесценции ПМ (mV)
8 сут 18 сут
1 АГ 8,36±1,82 13,2±1,83
2 АГл 13,16±1,96 15,7±1,72
3 АГл+бестим 16,87±2,01 18,4±2,1
4 АГл+ИФН-γ+ИЛ-2 18,92±1,65 36,82±2,08*
5 АГл+ИФН-γ+ИЛ-2+бестим 28,4±3,51* 34,5±1,68*
6 Контроль (интактные) 5,73±1,26 7,2±1,94
* - различия достоверны по отношению к группе мышей, иммунизированных АГл (р<0,05)
Таблица 3
Протективность мелиоидозных антигенов при использовании их с цитокинами и бестимом
Летальность при заражении B.pseudomallei 100
№ п/п Препараты для иммунизации 2 ЛД50 20 ЛД50
пало/взято % павш. СПЖ пало/взято % павш. СПЖ
1 АГ 11/16 68,7 7,1 16/16 100 7,8
2 АГл 9/18 50,0 7,9 16/17 94,1 7,7
3 АГл+бестим 6/16 37,5 6,7 15/16 93,7 6,0
4 АГл+ИФН-γ+ИЛ-2 5/16 31,2* 10,4 16/16 100 8,9
5 АГл+ИФН-γ+ИЛ-2+бестим 5/17 29,4* 12,6* 15/16 93,7 10,5*
6 Контроль (интактные) 8/10 80 8,5 10/10 100 6,3
* - различия достоверны по отношению к группе интактных мышей (р<0,05).
Таблица 4
Влияние кратности применения иммуномодулирующих пептидов на клеточный иммунитет мышей, иммунизированных липосомальными мелиоидозными антигенами
№ п/п Препараты для иммунизации Уровень ГЗТ на 18 сут (ИР, %)
Кратность введения ИМ
1 2 3
1 АГл+ИФН-γ+ИЛ-2+бестим 22,76±1,85 19,58±1,65 33,37±2,01*
2 АГл+ИФН-γ+ИЛ-2+имунофан 18,6±1,56 21,52±1,93 26,14±2,03**
3 Контроль (интактные) 4,18±0,85 - -
* - различия достоверны по отношению к 1-2 кратному введению.
* - различия достоверны по отношению к 1-кратному введению.
Таблица 5
Фагоцитарная активность ПМ в зависимости от кратности введения ИМ в иммунном ответе мышей на липосомальные мелиоидозные антигены
№ п/п Препараты для иммунизации Уровень хемилюминесценции ПМ, mV
Кратность введения ИМ
1 2 3
1 АГл+ИФН-γ+ИЛ-2+ бестим 11,41±1,72 10,84±1,34 19,42±1,65*
2 АГл+ИФН-γ+ИЛ-2+ имунофан 10,95±1,35 12,53±1,83 14,4±1,54
3 Контроль (интактные) 2,66±0,68 - -
*- различия достоверны по отношению к 1-2 кратному введению (р<0,05).

Способ повышения иммуногенности антигенов В. pseudomallei при экспериментальном мелиоидозе, включающий введение антигенов и цитокинов, отличающийся тем, что для повышения иммуногенных свойств поверхностный антигенный комплекс из антигена 6 и антигена d (АГ6+d) вводят мышам в липосомальной форме, содержащей не менее 80% антигенного материала, в дозе 40 мкг по белку, двукратно с интервалом 10 сут, а вместе с цитокинами вводят иммуномодулятор бестим в дозе 0,07 мкг трехкратно, ежедневно, одновременно с иммунизацией и в последующие 2 сут, причем при первичной иммунизации применяют рекомбинантный ИФН-γ (ингарон) в дозе 20 ME, а при вторичной - рекомбинантный ИЛ-2 (ронколейкин) в дозе 1 мкг, и оценивают иммуногенные свойства антигенов на 8 и 18 сут после первичной иммунизации по показателям уровня ГЗТ и фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов мышей, а протективные свойства - по показателям летальности животных, зараженных 2-10 ЛД50 штамма 100 возбудителя мелиоидоза на 21 сут после первичной иммунизации.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области микробиологии и биотехнологии, а именно к способу получения липополисахарида (ЛПС) возбудителя чумы. .

Изобретение относится к областям микробиологии и иммунологии. .
Изобретение относится к медицине и касается универсальной вакцины для лечения и профилактики болезни Лайма для применения в ветеринарии, на основе цельноклеточной бактериальной вакцины или бактериальных лизатов или очищенных препаратов, включающая три наиболее патогенных геновида Borrelia burgdorferi sensu stricto, Borrelia afzelii и Borrelia garinii, каждый из которых содержит одновременно оба иммуногенных протективных белка наружной мембраны OspA и OspC.

Изобретение относится к вакцинным кандидатам Shigella из всех 4 основных серотипов, чьими первичными ослабляющими признаками являются делеция гена virG(icsA) и дополнительные делеции в двух или более генах setAB(shET1), senA(shET2), senB(shET2-2), stxAB и msbB2.

Изобретение относится к области биохимии. .
Изобретение относится к медицины, а именно к венерологии, и может быть использовано для неспецифической серологической диагностики серонегативных форм течения заболевания сифилисом.

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, иммунологии, биотехнологии, а именно к технологии получения антигена для диагностики бруцеллеза

Изобретение относится к области биотехнологии и касается технологии получения иммуногенных сибиреязвенных антигенов - протективного антигена и белка ЕА1

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа получения препарата на основе вакцинного штамма чумного микроба. Представленное изобретение предусматривает изготовление посевной нативной культуры чумного микроба, концентрирование микробной суспензии, приготовление вакцинной взвеси и получение сухой формы препарата, при этом приготовление посевной культуры включает культивирование микробов в жидкой питательной среде в бутылях в течение 48 ч при температуре 26…28˚С и непрерывной аэрации не менее 10 л·мин-1 пассированной стабилизированной стартовой культурой, полученной в результате трех последовательных пассажей через организм морских свинок и смешанной в соотношении 2:1 со стабилизирующей глицерино-лактозо-полиглюкиновой жидкостью, при приготовлении вакцинной взвеси используют оптимизированную по компонентному составу защитную среду высушивания, а лиофилизацию проводят соблюдая определенный режим. Представленное решение позволяет получить продукт с повышенной активностью при сокращении продолжительности процесса его изготовления. 3 ил., 6 табл.
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения термолабильного энтеротоксина (ЛТ-энтеротоксина) и анатоксина Hafnia alvei при производстве вакцин. Штамм депонирован в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России под номером 294. Штамм обладает высокой способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для профилактики инфекционного конъюнктиво-кератита крупного рогатого скота. Способ профилактики инфекционного конъюнктиво-кератита крупного рогатого скота включает вакцинацию вакциной ассоциированной против инфекционного конъюнктиво-кератита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа I, при этом за 29-31 день до вакцинации животным вводят подкожно в область верхней трети шеи в дозе 0,045-0,055 мл/кг живой массы иммуностимулирующий препарат «Кероконвитин», полученный на основе цитотоксической сыворотки из крови лошадей-доноров путем гипериммунизации их антигеном, приготовленным из тканей глаз - конъюнктивы и роговицы крупного рогатого скота, переболевшего инфекционным конъюнктиво-кератитом. Ткани глаз крупного рогатого скота получают при забое животных. Изобретение позволяет на 40% по сравнению с использованием одной вакцины повысить эффективность профилактики инфекционного конъюнктиво-кератита крупного рогатого скота, обеспечивает более высокий иммунный статус организма животных. 3 табл., 1 пр., 2 ил.
Группа изобретений относится к медицине, а именно к ветеринарии, и может быть использована для применения композиции для защиты от инфекции, вызываемой Lawsonia intracellularis. Для этого применяют неживую композиции, содержащую углевод, который также обнаруживается в живых клетках Lawsonia intracellularis в ассоциации с наружной клеточной мембраной указанных клеток. Вакцина находится в форме, подходящей для внутримышечного введения, и включает в себя адъювант типа «масло в воде», содержащей капли масла со средним размером около 400 нм. Использованием данной неживой композиции приводит к эффективной иммунизации при внутримышечном введении с применением небольших капель адъюванта типа «масло в воде», что обеспечивает защиту животных от Lawsonia intracellularis. 2 н. и 5 з.п. ф-лы, 9 табл., 4 пр.
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при заживлении раневых повреждений кожного покрова. Ранозаживляющее средство представляет собой концентрат культуральной жидкости штамма Trichoderma harzianum Rifai, депонированного во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов под № ВКПМ: F-180, в качестве продуцента L-лизин-альфа-оксидазы и может быть применен как ранозаживляющее средство при повреждении кожного покрова. Изобретение позволяет расширить арсенал средств, обеспечивающих заживление раневых повреждений кожи. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к выделенному полипептиду, который является биологической мишенью для ингибирования клетки-метанопродуцента, а также к выделенному полинуклеотиду, который кодирует этот полипептид. Раскрыты вектор экспрессии и клонирующий вектор, содержащие этот полинуклеотид, и клетки-хозяева, содержащие указанный вектор экспрессии. Описаны молекула-конъюгат или слитая молекула для ингибирования клетки-метанопродуцента, а также антитело или его функциональный фрагмент, которое связывается с вышеуказанным полипептидом. Изобретение также охватывает фармацевтическую композицию и способы ингибирования и идентификации клетки-метанопродуцента с использованием описанных молекулы-конъюгата или слитой молекулы и антитела или его фрагмента. Изобретение позволяет эффективно ингибировать клетки-метанопродуценты. 13 н. и 6 з.п. ф-лы, 9 ил., 6 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к химерным или гибридным белкам для индуцирования иммунного ответа против Р. gingivalis. Раскрыта композиция для индуцирования иммунного ответа против Р. gingivalis, содержащая эффективное количество одного из вышеуказанных химерных или гибридных белков, способ профилактики состояния или заболевания, связанного с Р. Gingivalis, и способ снижения частоты или тяжести состояния или заболевания, связанного с Р. gingivalis с их использованием. Также раскрыто применение вышеуказанных химерных или гибридных белков для определения антител к Р. gingivalis в биологическом образце. Изобретение позволяет эффективно индуцировать иммунный ответ против Р. gingivalis. 7 н. и 9 з.п. ф-лы, 7 ил., 4 табл., 22 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к микробиологии и иммунологии, и касается способа повышения иммуногенности антигенов возбудителя мелиоидоза - Burkholderia pseudomallei

Наверх