Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента


 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2533248:

Кочурова Екатерина Владимировна (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу качественной дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки языка по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости. Cущность способа состоит в том, что определяют количественное содержание матриксной металлопротеиназы 2 (ММП 2) в ротовой жидкости пациента, за группу клинического контроля принимают уровень 1,7-2,9 нг/мл, при количестве ММП 2 14,4-24,3 нг/мл диагностируют папиллому слизистой оболочки языка пациента, при содержании в ротовой жидкости ММП 2 пациента 4,1-6,8 нг/мл диагностируют рак слизистой оболочки языка. В качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка в ротовой жидкости определяют тканевый ингибитор металлопротеиназы 2 (ТИМП 2), при этом за группу клинического контроля принимают уровень 6,44-11,23 нг/мл, при содержании ТИМП 2 29,25-48,75 нг/мл диагностируют папиллому слизистой оболочки языка, при содержании ТИМП 2 57,23-95,03 нг/мл диагностируют рак слизистой оболочки языка. Использование заявленного способа позволяет повысить точность дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки языка. 1 з.п. ф-лы, 6 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, и может быть использовано в дифференциальной диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований органов полости рта в условиях стоматологических, онкологических и хирургических лечебных заведений.

Известен способ прогнозирования и диагностики плоскоклеточного рака головы и шеи по содержанию матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов в плазме крови пациента, включающий исследования плазмы венозной крови, при этом сыворотку крови забирали стандартным способом у больных плоскоклеточным раком головы и шеи после постановки диагноза до начала лечебных процедур. Сыворотку хранили при температуре -50°C не более 10 месяцев и размораживали не более 1 раза для иммуноферментного определения содержания матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов с использованием наборов для твердофазного иммуноферментного анализа на ИФА-анализаторе (см. Клишо Е.В. Матриксные металлопротеиназы и их тканевые ингибиторы при плоскоклеточном раке головы и шеи, автореферат диссертации д.м.н., Томск, 2011 г., с.43).

Однако известный способ при своем использовании имеет следующие недостатки:

- обладает недостаточной точностью дифференциальной диагностики новообразований слизистой оболочки языка в день обращения пациента,

- обладает недостаточной чувствительностью дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки языка,

- недостаточность вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки языка в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних,

- сложность подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала,

- возможность инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала,

-сложность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей).

Задачей изобретения является создание способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента.

Техническим результатом является достижение значительного повышения точности дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки языка, достижение высокой вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки языка в организме пациента, как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала, отсутствие инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала, а также возможность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей).

Технический результат достигается тем, что предложен способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, включающий исследования ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента производится до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований, при этом ротовую жидкость забирают у пациента для качественных экспресс исследований новообразований слизистой оболочки языка, в качестве биомаркера при качественной дифференциальной экспресс-диагностике новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) группы клинического контроля принимают уровень 1,7-2,9 нг/мл, при этом если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) в количестве 14,4-24,3 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки языка пациента, при этом если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) в количестве 4,1-6,8 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки языка пациента, в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают тканевой ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) группы клинического контроля принимают уровень 6,44-11,23 нг/мл, при этом если определяют содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) в количестве 29,25-48,75 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки языка пациента, при этом если определяют содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) в количестве 57,23-95,03 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки языка пациента, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента. При этом при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°C. При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым, лечением пациента дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Способ осуществляют следующим образом. Ротовую жидкость забирают у пациента для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка. Выполняют забор ротовой жидкости пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляют ротовую жидкость физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторно центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещают в кювету и выполняют метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител. При этом при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°C.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/MMP 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) группы клинического контроля принимают уровень 1,7-2,9 нг/мл.

Если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) в количестве 14,4-24,3 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки языка пациента.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/MMP 2) в количестве 4,1-6,8 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки языка пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают тканевой ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) группы клинического контроля принимают уровень 6,44-11,23 нг/мл.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) в количестве 29,25-48,75 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки языка пациента.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) в количестве 57,23-95,03 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки языка пациента.

Затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.

При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым, лечением пациента дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Среди существенных признаков, характеризующих предложенный способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, отличительными являются:

- отсутствие выполнения забора венозной крови у пациента для качественных экспресс-исследований новообразований слизистой оболочки языка,

- выбор в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) и определение его количественного содержания в ротовой жидкости пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) в количестве 1,7-2,9 нг/мл отсутствия новообразования слизистой оболочки языка у пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) в количестве 14,4-24,3 нг/мл папилломы слизистой оболочки языка пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/MMP 2)в количестве 4,1-6,8 нг/мл рака слизистой оболочки языка пациента,

- выбор в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) и определение его количественного содержания в ротовой жидкости пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) в количестве 6,44-11,23 нг/мл отсутствия новообразования слизистой оболочки языка у пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) в количестве 29,25-48,75 нг/мл папилломы слизистой оболочки языка пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) в количестве 57,23-95,03 нг/мл рака слизистой оболочки языка пациента,

- прогнозирование по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента тактики его лечения,

- выполнение при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед проведением анализа ее центрифугирования при 3000 об/мин в течение 15 минут, забора поверхностной части в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещения в пробирку «salicaps» и сразу замораживания в морозильной камере при температуре минус 80°C,

- дополнительное осуществление в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым, лечением пациента контрольного определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Экспериментальные исследования предложенного способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента в клинических условиях показали его высокую эффективность. Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента при своем использовании обеспечивает достижение значительного повышения точности дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки языка, достижение высокой вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки языка в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала, отсутствие инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала, а также возможность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей). Кроме того, предложенный способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента обеспечил при практическом использовании значительное повышение качества жизни пациентов.

Реализация предложенного способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента иллюстрируется следующими клиническими примерами.

Пример 1. Пациент Б., 64 года, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки языка слева».

Ротовую жидкость забирали у пациента для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка. Выполняли забор ротовой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/MMP 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) в количестве 17,7 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) в количестве 37,2 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали папиллому слизистой оболочки языка слева. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое лечение: иссечение папилломы слизистой оболочки языка.

Пример 2. Пациентка А., 87 года, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки языка справа».

Ротовую жидкость забирали у пациентки для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. При этом в связи с преклонным возрастом пациентки возникла необходимость кратковременного хранения ее ротовой жидкости, поэтому перед выполнением анализа ее центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирали поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещали в пробирку «salicaps» и сразу замораживали в морозильной камере при температуре минус 80°C. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациентки размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) в количестве 24,3 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациентки ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) в количестве 46,3 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали папиллому слизистой оболочки языка справа. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациентке было назначено хирургическое лечение: иссечение папилломы слизистой оболочки языка.

Пример 3. Пациент Н., 53 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки языка слева».

Ротовую жидкость забирали у пациента для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка. Выполняли забор ротовой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) в количестве 18,3 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) в количестве 32,45 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали папиллому слизистой оболочки языка слева. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое лечение: иссечение папилломы слизистой оболочки языка.

Пример 4. Пациентка Я., 45 лет, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки языка слева».

Ротовую жидкость забирали у пациентки для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациентки размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) в количестве 4,1 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациентки ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) в количестве 57,23 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали рак слизистой оболочки языка слева. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными, пациентке было назначено комбинированное лечение: на 1-м этапе - иссечение новообразования слизистой оболочки языка и лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования на 2-м этапе.

Пример 5. Пациентка П., 47 лет, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки языка справа».

Ротовую жидкость забирали у пациентки для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли ротовую жидкость физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациентки размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) в количестве 5,7 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) в количестве 83,5 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали рак слизистой оболочки языка справа. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными, пациентке было назначено комбинированное лечение: на 1-м этапе - иссечение новообразования слизистой оболочки языка и лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования на 2-м этапе.

Пример 6. Пациент Г., 65 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки языка справа».

Ротовую жидкость забирали у пациента для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка. Выполняли забор ротовой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2/ММР 2) в количестве 6,8 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2) в количестве 93,08 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали рак слизистой оболочки языка слева. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными, пациенту было назначено комбинированное лечение: на 1-м этапе - иссечение новообразования слизистой оболочки языка и лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования на 2-м этапе.

Установленные клинические диагнозы впоследствии подтвердились результатами выполненной морфологической верификации предварительно взятого у всех пациентов биопсийного материала из очага поражения.

При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым, лечением пациентов, дополнительно осуществляли контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациентов, по результатам которых судили об эффективности выбранного лечения у пациентов.

1. Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, включающий исследования ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента производится до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований, отличающийся тем, что ротовую жидкость забирают у пациента для исследований новообразований, в качестве биомаркера при качественной дифференциальной экспресс-диагностике новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 (ММП 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металло-протеиназы 2 (ММП 2) группы клинического контроля принимают уровень 1,7-2,9 нг/мл, при этом если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 2 (ММП 2) в количестве 14,4-24,3 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки языка пациента, при этом если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 (ММП 2) в количестве 4,1-6,8 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки языка пациента, в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки языка по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают тканевой ингибитор металлопротеиназы 2 (ТИМП 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 (ТИМП 2) группы клинического контроля принимают уровень 6,44-11,23 нг/мл, при этом если определяют содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 (ТИМП 2) в количестве 29,25-48,75 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки языка пациента, при этом если определяют содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 (ТИМП 2) в количестве 57,23-95,03 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки языка пациента.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°C.



 

Похожие патенты:

Изобретение касается диагностического реагента для диагностики рака поджелудочной железы и/или панкреатита, включающего α1→6 специфический лектин, который отличается сильным сродством и высокой специфичностью к фукозе.

Группа изобретений основана на применении рецептора хемокина CCR4 в качестве маркера для идентификации и/или стадирования рака. Информацию диагностического характера получают путем измерения уровней CCR4, экспрессируемого эпителиальными опухолевыми клетками в образце солидной или негематологической опухоли пациента.

Изобретение относится к способу индуцирования противоопухолевого иммунитета приведением в контакт антиген-представляющей клетки с иммунологически активным фрагментом, выбранным из группы, состоящей из: (i) иммунологически активного фрагмента полипептида, кодируемого нуклеиновой кислотой ТОМ34, представляющего собой декапептид, обладающий способностью индуцировать цитотоксические Т-клетки, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:7; (ii) иммунологически активного фрагмента полипептида, кодируемого нуклеиновой кислотой ТОМ34, представляющего собой пептид, обладающий способностью индуцировать цитотоксические Т-клетки, где пептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:7, в которой 1 или 2 аминокислоты замещены или добавлены; (iii) иммунологически активного фрагмента (ii), где вторая аминокислота с N-конца аминокислотной последовательности SEQ ID NO:7 представляет собой фенилаланин, тирозин, метионин или триптофан; и (iv) иммунологически активного фрагмента (ii), где С-концевая аминокислота аминокислотной последовательности SEQ ID NO:7 представляет собой фенилаланин, лейцин, изолейцин, триптофан или метионин, или с полинуклеотидом, кодирующим указанный фрагмент, или с вектором, содержащим этот полинуклеотид.

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложен L-фукоза α1→6-специфичный лектин, экстрагируемый из базидиального гриба или сумчатого гриба, характеризующийся пиковым значением молекулярной массы около 4500 m/z, определяемым при масс-спектрометрическом анализе MALDI-TOF.

Изобретение относится к диагностическим методам в медицине и может быть использовано в онкологии при адъювантной терапии опухолей, а также при длительном наблюдении за пациентами после оперативного удаления опухолей.

Изобретение относится к области медицины, в частности, к клинической онкологии, медицинской генетике, молекулярной диагностике и может быть использовано для прогнозирования наследственной предрасположенности к раку молочной железы.

Группа изобретений относится к области медицинской диагностики, иммунологии и онкологии, в частности к новым онкомаркерам и способам диагностики онкологических заболеваний.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для дифференциальной диагностики рака предстательной железы. В клетках периферической крови пациента методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени измеряют экспрессию генов Тр53, GSTP1 и IL10 относительно референтного гена β-актина (АСТВ).

Изобретение относится к области диагностики злокачественной опухоли. Изобретение относится к способу улавливания, детекции, охарактеризовывания и количественного определения экзосом человека в небольших объемах жидкостей организма человека с использованием сэндвич-ELISA-теста.

Группа изобретений относится к выбору подходящего противоракового лекарственного средства для лечения рака легких, прогнозированию реакции опухоли легких на лечение противораковым лекарственным средством, а также к применению матрицы для выбора подходящего противоракового лекарственного средства для лечения рака легких.

Изобретение касается способа выявления гистидина в эритроцитах периферической крови. Способ осуществляют путем приготовления инкубационного раствора №1, состоящего из раствора 500 мг сульфаниловой кислоты в 50 мл 1 М HCl, и раствора №2, состоящего из 125 мг NaNO2 в 2,5 мл дистиллированной воды.
Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы гибели эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции на ранних этапах гестации.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования риска развития врожденных инфекций путем определения количества специфических антител классов Ig М и Ig G в биологическом материале, отличающееся тем, что в качестве биологического материала используют мазок со слизистой оболочки цервикального канала при первичном обследовании в сроке до 12-й недели гестации, одновременно в мазках определяют количество антител Ig М и Ig G к вирусу краснухи, цитомегаловирусу, парвовирусу B19V, токсоплазмам, вирусу простого герпеса 1 и 2 типов и величины авидности специфических Ig G к этим возбудителям, дополнительно в том же мазке определяют уровень секреторного неспецифического Ig A методом РИФ к антигенам цитомегаловируса, хламидий, микоплазм, и генетического материала этих микроорганизмов методом ПЦР и в зависимости от полученных результатов прогнозируют группы высокого, умеренного или низкого риска развития врожденных инфекций.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для оценки эффективности лекарственных средств (ЛС) для улучшения когнитивных функций человека. В сыворотке крови пациента определяют содержание белка HLDF, титров идиотипических и антиидиотипических антител к HLDF до и после введения ЛС и на основании полученных данных вычисляют значение показателя MMSE до и после введения ЛС по формуле, после чего проводят сравнение полученных значений показателя MMSE и оценку эффективности ЛС по результатам такого сравнения.

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии и молекулярной биологии, и может быть использовано для оценки риска развития рака шейки матки при цервикальной интраэпителиальной неоплазии и носительстве вируса папилломы человека (ВПЧ) у женщин репродуктивного возраста.
Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и касается определения степени тяжести психосоматических нарушений у пациентов с дисциркуляторной энцефалопатией (ДЭ).
Представленное изобретение относится к области медицинской микробиологии и касается способа обнаружения микроорганизма вида Vibrio parahaemolyticus. Способ включает посев исследуемого штамма на газон культуры, нанесение капли диагностического препарата фага в центр чашки, выдерживание при температуре 37°С в течение 20-24 часов и подтверждение его принадлежности к микроорганизмам вида V.
Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования неразвивающейся беременности (НБ). Сущность способа: в супернатанте аспирационной жидкости из полости матки или менструальной крови определяют одномоментно содержание карбонильных групп белков и малонового диальдегида.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ определения риска развития сердечно-сосудистых осложнений у женщин с гипертонической болезнью путем забора крови у больных, определения в крови уровня интерлейкина-1α, рецепторного антагониста интерлейкина-1 иммуноферментным методом, отличающийся тем, что определяют показатель, равный отношению рецепторного антагониста интерлейкина-1 к интерлейкину-1α, фактор ингибирования лейкозных клеток в крови и количество CD34 клеток с последующим диагностированием развития сердечно-сосудистых осложнений в течение 5 лет, при этом устанавливают высокий, средний или низкий риски развития осложнений.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования общей выживаемости у больных с метастазами колоректального рака в печени после ее резекции, включающий определение клинико-патологических (морфологических), гистологических и молекулярных факторов прогноза, отличающийся тем, что с помощью иммуногистохимического метода проводят исследование молекулярных характеристик микроокружения опухоли, а именно наличие и количество сосудов с гладкомышечным актином в их стенке для стромы метастаза печени в трех полях зрения микроскопа, при этом поля зрения выбирают по максимальной выраженной иммуногистохимической реакции с каждого среза биоптата печени с метастатической опухолью и при наличии в каждом из трех полей зрения сосудов с наличием гладкомышечного актина в их стенке, пациента определяют в группу благоприятного прогноза (дожитие после резекции печени три года и более), при отсутствии сосудов с наличием в стенке гладкой мускулатуры во всех трех полях зрения, пациента включают в группу неблагоприятного прогноза (с продолжительностью жизни меньше двух лет).

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к способу характеристики микроорганизмов. Сущность способа состоит в (a) получении тестируемого образца, о котором известно, что он содержит или может содержать микроорганизмы; (b) наслаивании тестируемого образца на плотностный буфер в контейнере, где указанный плотностный буфер обладает однородной плотностью от приблизительно 1,025 до приблизительно 1,120 г/мл; (c) добавлении идентификатора в указанный тестируемый образец и/или в указанный плотностный буфер; (d) центрифугировании указанного контейнера для разделения микроорганизмов от других компонентов указанного тестируемого образца и образовании осадка микроорганизмов; (e) спектроскопическом исследовании осадка и/или указанного одного или более чем одного идентификатора с получением измерений, которые характеризуют микроорганизмы, где указанные спектроскопические исследования проводят при нахождении указанного осадка в указанном контейнере; и (f) характеристике микроорганизмов в осадке на основании полученных измерений и/или присутствия или отсутствия указанного идентификатора или метаболизированной формы указанного идентификатора в осадке, где указанные микроорганизмы характеризуют по одной или более моделям классификации, выбранным из группы, состоящей из групп по Граму, клинических групп по Граму, терапевтических групп и функциональных групп. Использование заявленного изобретения позволяет повысить точность характеристики микроорганизмов. 14 з.п. ф-лы, 5 ил., 1 табл., 4 пр.
Наверх