Способ получения биологического контейнера



 


Владельцы патента RU 2582985:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение Высшего профессионального образования Волгоградский государственный аграрный университет (ФГБОУ ВПО Волгоградский ГАУ) (RU)

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ получения биоконтейнера для длительного хранения биологических клеток и фракций в жидком азоте при температуре -196°C, отличающийся тем, что емкостью биоконтейнера является внутренняя прозрачная ткань плавательного пузыря рыб, состоящая из однослойного плоского эпителия, взятого от живых рыб. Осуществление изобретения обеспечивает создание благоприятных условий хранения биологических клеток в криогенных условиях. 5 з.п. ф-лы, 1 табл., 2 ил.

 

Биоконтейнер для объектов биологического происхождения, замороженных в форме гранул в жидком азоте (-196°С), относится к ветеринарной медицине, в частности к области акушерства, гинекологии, трансплантации эмбрионов и искусственного осеменения животных.

Известен способ использования биоконтейнера для хранения и адресной доставки антиоксидантов в «Митохондрии», состоящий из синтеза пластохинина и катиона родамина для восстановления дыхательного процесса в мембранах клеточных митохондрий «молекулы-электроды» в больном организме.

Недостатком этого способа является то, что биоконтейнер состоит из химических веществ несовместимых с клетками, с живыми тканями и биологическими лечебными фракциями (сперматозоидами, бластоцистами и фетоплацентарными фракциями), что при длительном хранении губительно влияет на лечебную эффективность, на живые тканевые клетки больного организма животных. Оболочка контейнера такого химического состава не способна выдержать лечебную структуру наполнителей, соединившись с химическими компонентами жидкого азота при его низкой температуре -196°С.

Известен «Контейнер для биологических объектов", состоящий из корпуса, крышки на двух петлях, двух замков. Внутренность выстлана теплоизоляционным материалом, внутри находиться охладитель из резины, наполняемый охлаждающим веществом. В качестве охладителя используется замороженная вода или другие водные растворы солей с температурой от 0 до 5°С. Устройство используют для сохранения биоматериалов на короткое время с места происшествия объекта биологического происхождения.

Недостатком этого устройства является их способность к непригодности в техническом и химикобиологическом отношении, неспособность работать от автономных источников электроэнергии. Теплоизоляционный материал, резина охлаждающий агент, и другие детали контейнера, с которыми биологические объекты будут соприкасаться, состоят из поролона, металла, также возможны нарушения постоянства температуры в контейнере. Устройство не позволяет длительно (30, 90, 100 дней) сохранять биологические объекты в анабиотическом состоянии.

Наиболее близким к настоящему изобретению, что является прототипом предлагаемого нами изобретения, это биоконтейнеры для длительного хранения замороженной спермы и эмбрионов сельскохозяйственных животных. Эти биоконтейнеры для хранения биологических объектов, использующих в повседневной практике в жидком азоте в одноразовых или стеклянных, полиэтиленовых ампулах, пробирках, капиллярах, пайетах, канистрах, мешочках (ситцевая, льняная, лавсановая ткань).

Недостатком этих биоконтейнеров является то, что эти емкости химического происхождения: полиэтилен, полистирол, полипропилен, которые не биологического происхождения. Они не совместимы с бластоцистами, сперматозоидами, эмбрионами, биофракциями, и являются токсичными не только по запаху (феромоны), но и, соединяясь с жидким азотом, образуют вредные вещества, губительно действующие на биологические клетки и лечебные фракции (сперматозоиды, эмбрионы), находящиеся в жидком азоте в анабиотическом состоянии. Поэтому хранящийся биоматериал приходится выбраковывать до 40-50%. Задачей данного изобретения является разработка способа получения биологического контейнера, состоящего из биологической ткани (однослойного, плоского эпителия, околоплодные клетки, эмбриональные ткани), обладающие лечебными фракциями.

Цель изобретения - создание благоприятных анабиотических условий в криогенных жидкостях (жидкий азот -196°С), позволяющих сохранять оплодотворяющую способность и лечебные свойства в половых клетках, жизнеспособность эмбрионов.

Поставленная цель достигается тем, что в качестве биоконтейнера используется плавательный рыбий пузырь.

Плавательный пузырь рыб выполняет гидростатическую функцию, изменяя вес рыбы, создавая нейтральную плавучесть. Плавательный пузырь в эмбриональном развитии возникает из пищеварительной трубки в области пищевода, как трубчатый вырост, сообщаясь с глоткой посредством воздушного хода. У рыб он имеет две камеры. Стенка плавательного пузыря состоит из двух оболочек, легко отделяющихся друг от друга.

Внутренняя прозрачная оболочка плавательного пузыря состоит из однослойных эпителиальных клеток, обладающих прочностью при растяжении и смене температур от +24°С до -196°С при загрузке в жидкий азот биологических объектов в форме замороженных гранул, в объеме от 0,2 до 0,5 мл. Наружная оболочка плавательного пузыря состоит из соединительной ткани и коллагеновых волокон (рис. 1). Плавательный пузырь состоит из: 1 - двух пузырей; 2 - протока; 3 - прозрачного однослойного эпителия; 4 - коллагеновой оболочки.

В качестве изобретения мы предлагаем использование в качестве биоконтейнера (рис. 2) внутреннюю оболочку плавательного пузыря, состоящую из однослойного прозрачного прочного эпителия, с целью хранения половых клеток, эмбрионов, биологических лечебных клеток и фракций вне организма, а также с целью увеличения сроков выживаемости и сохранности имплантационной, оплодотворяющей и лечебной способности в замороженном состоянии, что основано на снижении обменных процессов.

Предлагаемый нами биоконтейнер (рис. 2) состоит из: 1 - корпуса биоконтейнера; 2 - прозрачная оболочка из однослойного эпителия; 3 - воздушный проток; 4 - загрузка гранулоцитов или жидкой биологической фракции; 5 - шелковая хирургическая нить.

Анабиоз при низкой температуре в биоконтейнере, стенка которого состоит их природой созданных эпителиальных клеток, способствующих сохранности анабиотического состояния. Но этого не могут создать биоконтейнеры химического происхождения из пластмассы, полипропилена, макролона, поликарбоната, дакрила, лавсана, полистирола, из шелковой и ситцевой ткани, капилляры (пайеты).

Последовательность выполнения предлагаемого способа получения биоконтейнера состоит в следующем:

1. Извлекают из брюшной полости рыб плавательные пузыри;

2. Промывают плавательный пузырь раствором марганцево-кислого калия 1:5000 и орошают физиологическим раствором (0,85%) многократным погружением в емкость;

3. Обеззараживают плавательный пузырь в микробиологическом боксе кварцеванием в течение одной минуты;

4. Снимают с помощью стерильного пинцета с плавательного пузыря коллагеновую поверхностную оболочку;

5. Освобождают внутреннюю прозрачную, состоящую из однослойного эпителия оболочку, имеющую форму мешочка, промывают ее физиологическим раствором (0,85%);

6. Поверхность эпителиального мешка помещают, путем погружения, в раствор ланолина в течение одной минуты для придания ткани эластичности. После этого промывают, орошая физиологическим раствором;

7. Обеззараживают полученный биоконтейнер в микробиологическом боксе кварцеванием в течение одной минуты в подвешенном виде;

8. Через расширенный воздухоносный проток, соединяющий оба пузыря, после его разъединения на две емкости резекцией, загружают замороженными в форме гранул биологическими клетками, тканями, лечебными фракциями;

9. Перевязывают воздухоносный проток шелковой стерильной хирургической нитью;

10. Помещают биоконтейнер в сосуд Дьюара с жидким азотом при температуре -196°С для длительного хранения;

11. Перед использованием замороженные биологические гранулы с эмбриональными клетками извлекают из биоконтейнера, сохранившего эластичность;

12 Гранулы оттаивают в водяной бане при температуре 38-40°С, согласно Ветеринарному Законодательству России.

Практическое применение

Извлеченные из биоконтейнера, оттаянные биологические фракции в форме гранул, мы вводили в матку коровам с серозно-катаральным послеродовым эндометритом. Результаты лечения отображены в таблице 1.

Из таблицы 1 видно, что после лечения коров с болезнями половых органов, после патологических родов, когда коровам в полость матки вводили биологические лечебные фракции, ранее замороженные в биологическом контейнере, успешно выздоровели из 12 больных коров 9, что составляет 75%, а в контрольной группе, когда коров лечили общепринятыми способами, сохраняя фракции в мешочках из лавсановой ткани, выздоровело меньше на 3,6%. В опытной группе коровы после лечения пришли в половую охоту в среднем через 28-32 дня, а коровы контрольной группы пришли в охоту после отела на 40-45 день.

Библиографический список

1. Лямзаев К.Г., Антоненко А.В. и др. Произведение пластохинина, адресованное в митохондрии, как средство, прерывающее программу старения. Катионные производные пластохинина: синтез и исследование in vitro. Международный форум по нанотехнологиям, 6-8 октября. Сборник тезисов докладов участников Второго Международного форума по нанотехнологиям. Москва, 2009 г., стр. 519-520.

2. Патент на полезную модель РФ №42634 «Контейнер для биологических объектов». 10.12.2004. Авторы: Филипов А.И., Коршунов В.М., Филипова С.И.

3. Небогатиков Г.В. «Практикум по акушерству, гинекологии и биотехнике размножения животных». Издательство Москва, Мир, 2005 г., стр. 225-228.

1. Способ получения биоконтейнера для длительного хранения биологических клеток и фракций в жидком азоте при температуре -196°C, отличающийся тем, что емкостью биоконтейнера является внутренняя прозрачная ткань плавательного пузыря рыб, состоящая из однослойного плоского эпителия, взятого от живых рыб.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что корпус биоконтейнера перед использованием освобождают стерильным пинцетом, снимая коллагеновую поверхностную оболочку с плавательного пузыря рыб.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что прозрачный корпус биоконтейнера, состоящий из однослойного плоского эпителия, обеззараживают в микробиологическом боксе кварцеванием в течение одной мин.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что через расширенный воздухоносный проток, соединяющий оба пузыря после его разделения на две емкости резекцией, загружают замороженные в форме гранул биологические клетки, ткани, лечебные фракции, бластоцисты, сперматозоиды.

5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что помещают перевязанный стерильной нитью биоконтейнер, заполненный гранулированными фракциями, в сосуд Дьюара (Т-196°C).

6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что перед практическим использованием биологических фракций биоконтейнеры извлекают из сосуда Дьюара, а гранулы извлекают и оттаивают в водяной бане при температуре 38-40°C.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к области медицины и может быть использована для гидравлического соединения двух уплотненных мембраной емкостей. Соединительное устройство содержит два элемента, которые выполнены с возможностью скользящего смещения относительно друг друга вдоль оси между первым и вторым положением.

Изобретение относится к использующемуся преимущественно в медицине стопорному устройству для надежной фиксации пробки, применяемой для укупорки емкости с фланцем, содержащей активное вещество в жидкой, порошкообразной или лиофилизированной форме.

Изобретение относится к устройству для резки взаимосвязанных пластиковых изделий для применения в медицинской области, размещенных в непрерывной ленте из пластика.

Изобретение относится к способу лазерной резки пластиковых изделий для применения в медицинской области, размещенных в непрерывной ленте. Предварительно определяют позиционные параметры взаимосвязанных пластиковых изделий, встроенных в непрерывную ленту из пластика, с помощью оптического устройства для сбора данных и рассчитывают схему резки.

Изобретение относится к области медицины. Впускное устройство (10) для мешка для хранения текучей среды содержит корпус (12), имеющий нижнюю стенку (14) и противоположные боковые стенки (16, 18), и соединительное отверстие (20) в указанном корпусе (12) напротив нижней стенки (14) для соединения корпуса (12) с мешком.

Группа изобретений относится к фармацевтике. Описывается липосомальная композиция, полученная путем смешивания водорастворимого органического раствора с раствором первой водной фазы и получением эмульсии.

Изобретение относится к блистерной упаковке для фармацевтического инъекционного формованного картриджа или капсулы. Блистерная упаковка содержит блистерный подложечный лист, одну или несколько полостей, имеющих свободное пространство, куполообразную структуру, уступ, внутреннюю поверхность и внешнюю поверхность, причем каждая из полостей предназначена для размещения картриджа, содержащего фармацевтическую композицию, и крышку, при этом полости имеют наружную и внутреннюю поверхность и уступ включает выемку или впадину, которая образует фиксирующее картридж приспособление на внутренней поверхности.

Изобретение относится к области средств термостатирования и медицинского переносного оборудования и представляет собой способ термостатирования и транспортировки медико-биологических материалов, основанный на укладывании хладоэлементов и медико-биологических материалов, отличающийся тем, что укладывают хладоэлементы отдельно от медико-биологических материалов по периметру термоконтейнера в решетчатые ячейки и укладывают медико-биологические материалы в центральную часть термоконтейнера.

Группа изобретений относится к медицине. Устройство для фиксации линзы, обеспечивающее ее транспортировку, хранение и предохраняющее ее от повреждений, содержит корпус с камерой для хранения и охватывающий конструктивный элемент в камере для хранения.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой способ транспортировки пиявок, включающий размещение пиявок во влагосодержащем субстрате, упакованном в плотные тканевые мешки, с последующей их укладкой в транспортную тару, отличающийся тем, что в качестве влагосодержащего субстрата используют активированный гидрогрунт в форме шариков, при соотношении вес пиявок : вес активированного гидрогрунта 1:1,5-1:2.

Группа изобретений относится к области медицины. Запорное устройство (20) для использования с контейнером-сборником (22) пробы содержит основание (24) с первым концом для введения в открытый конец контейнера-сборника пробы и вторым концом для введения в него части шприца. Запорное устройство содержит также соединитель (38) Люера, присоединенный к основанию по меньшей мере один канал (52) для вентиляции внутреннего пространства контейнера-сборника пробы в процессе передачи пробы текучей среды из шприца в контейнер-сборник пробы, примыкающий к соединителю Люера, и закрывающую часть (28). Закрывающая часть (28) присоединена к основанию (24) и приспособлена для перевода из открытого положения, в котором устанавливается сообщение для текучей среды между первым концом и вторым концом через соединитель Люера, в закрытое положение, в котором соединитель Люера полностью прикрыт закрывающей частью. При этом первый конец основания (24) содержит по меньшей мере одно отклоняемое ребро (40) для формирования непроницаемого для текучей среды уплотнения с внутренней боковой стенкой (32), формирующей внутреннее пространство контейнера-сборника (22) пробы. Группа изобретений относится также к контейнеру-сборнику пробы и узлу передачи текучей среды, содержащим указанное запорное устройство. Группа изобретений обеспечивает повышение безопасности в процессе передачи взятой пробы в контейнер-сборник. 4 н. и 18 з.п. ф-лы, 31 ил.

Изобретение относится к применению соединения, обладающего активностью антагониста кислотного насоса, для получения лекарственного средства для улучшения моторики желудочно-кишечного тракта при заболевании, связанном с патологической моторикой желудочно-кишечного тракта, для вызывания III-ей фазы мигрирующих межпищеварительных сокращений (IMC). Указанное соединение может быть выбрано из группы, включающей: (S)-(-)-4-[(5,7-дифтор-3,4-дигидро-2Н-хромен-4-ил)окси]-N,N,2-триметил-1Н-бензимидазол-6-карбоксамид;(-)-1-(2-метоксиэтил)-N,N,2-триметил-8-фенил-1,6,7,8-тетрагидрохромено[7,8-d]имидазол-5-карбоксамид; 1-[5-(2-фторфенил)-1-(пиридин-3-илсульфонил)-1Н-пиррол-3-ил]-N-метилметанамин; 8-[{2,6-диметилбензил}амино]-N-[2-гидроксиэтил]-2,3-диметилимидазо[1,2-а]пиридин-6-карбоксамид; 5,6-диметил-2-(4-фтор-фениламино)-4-(1-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ил)пиримидин или их фармацевтически приемлемые соли. Также изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей одно из перечисленных соединений. Изобретение обеспечивает нормализацию и улучшение моторики желудочно-кишечного тракта. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 4 ил., 4 пр.

Изобретение относится к устройству для герметизации сосуда, в частности картриджа (7) или пробирки, для размещения лиофилизированного фармацевтического препарата (S), причем сосуд (1) имеет на открытом торце (3) открытую кромку (4) и прилегающий продольный участок (5) с равномерно выполненным внутренним поперечным сечением. Устройство имеет передний поршень (2), расположенный внутри сосуда (1) на продольном участке (5), и отличается тем, что передний поршень (2) выполнен с возможностью размещения в сосуде (1) в герметизирующем положении, в котором передний поршень (2) полностью вставлен в сосуд (1), или в обменном положении, при котором передний поршень (2) частично вставлен в сосуд (1) и частично выступает за открытую кромку (4) сосуда (1); при этом передний поршень (2) содержит средство герметизации, выполненное с возможностью герметичного закрытия внутренней части сосуда (1) от наружной его части, когда передний поршень (2) находится в герметизирующем положении, и одну или несколько сообщающихся канавок (2i), выполненных с возможность обеспечения сообщения внутренней части сосуда и наружной его части друг с другом, когда передний поршень (2) находится в обменном положении. Кроме того, раскрыт способ изготовления герметичного сосуда (1). 3 н. и 19 з.п. ф-лы, 25 ил., 1 пр.

Изобретение относится к области фармацевтики и может быть использовано для упаковывания гранулярной композиции, содержащей антибиотик пенем. Упаковка лекарственного продукта содержит упаковочную пленку, включающую один или более слоев материала основы из термопластической смолы, алюминиевую фольгу и адсорбционный слой, уложенные стопкой последовательно. Адсорбционный слой обеспечен на стороне, где содержится гранулярная композиция, и содержит внешний слой, сформированный из смолы ЛПВД, промежуточный слой и внутренний слой, сформированный из смолы ЛПВД, уложенные стопкой в этом порядке от стороны алюминиевой фольги. При этом промежуточный слой, сформированный из смолы ПВД, содержит от 0,2 до 0,4 мг/см2 цеолита, который имеет диаметр микропор не меньше чем 1 нм, а внутренний слой, сформированный из смолы ЛПВД, имеет толщину слоя от 20 до 30 мкм. Изобретение обеспечивает возможность регулирования влажности в упаковке и позволяет предотвратить пересушивание гранулярной композиции, содержащей антибиотик пенем. 2 табл., 6 пр.

Изобретение относится к области медицины. Комплект для консервации биопрепарата содержит пакет (1) для хранения биопрепарата, выполненный с трехмерной геометрией, которая сохраняется, по существу, постоянной в процессе его эксплуатации, и оболочку (2) для упаковки указанного пакета, причем в указанной оболочке (2) выполнена полость (3) для вмещения указанного пакета (1). Полость (3) выполнена с трехмерной геометрией, которая сохраняется, по существу, постоянной в процессе ее эксплуатации, причем в оболочке обеспечена прорезь (4), идущая вдоль одной из кромок указанной полости (3), для обеспечения возможности введения пакета (1) в указанную полость (3). Наружу от указанной прорези (4) вытянуты передняя полоса (5) и задняя полоса (6), причем указанные полосы выполнены с возможностью объединения друг с другом для герметичного уплотнения указанной полости (3) оболочки (2). Изобретение позволяет оптимизировать процесс консервации биопрепарата и повысить компактность комплекта для консервации биопрепарата. 14 з.п. ф-лы, 8 ил.

Изобретение относится к области обработки металлов давлением, в частности к изготовлению колпачка с отбортовкой для емкости для приема фармацевтической субстанции, в частности для ампулы. Из полосы, содержащей пленочный слой, покрытый пластмассой, формуют в колпачок с отбортовкой вырубкой и глубокой вытяжкой. При этом между пластмассовым и пленочным слоями располагают лаковый слой. Причем для задания цветового вида пластмассовый слой выполняют просвечивающим. В другом варианте пластмассовый слой выполняют прозрачным и соединяют его с металлическим пленочным слоем с помощью видимого через пластмассовый слой клеящего вещества, производящего окрашивающее действие. Кроме того, изобретение относится к колпачку с отбортовкой для емкости для приема фармацевтической субстанции, а также для емкости с фармацевтической субстанцией. Обеспечивается цветовое оформление и полное перекрытие торцевой кромки металлического пленочного слоя пластмассовым слоем. 6 н. и 6 з.п. ф-лы, 6 ил.
Наверх