Способ диагностики коринебактериоза и ассоциативных с коринебактериями инфекций у животных



Способ диагностики коринебактериоза и ассоциативных с коринебактериями инфекций у животных
Способ диагностики коринебактериоза и ассоциативных с коринебактериями инфекций у животных

 


Владельцы патента RU 2592372:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт" (RU)

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для диагностики коринебактериоза и ассоциативных с коринебактериями инфекций. Способ включает внутрикожное введение коринебактериозного аллергена, который вводят внутрикожно в дозе 0,2 мл. Учет и оценку реакции проводят через 72 часа. Заявленный способ более специфичен и чувствителен, что позволяет предотвратить неоправданный убой животных, а также расходы на проведение дальнейших исследований для уточнения диагноза. 2 табл., 1 пр.

 

Изобретение относится к ветеринарной медицине и может быть использовано в диагностике инфекционных болезней животных. Диагностику коринебактериоза и ассоциативных с коринебактериями инфекций проводят патологоанатомическим и бактериологическим методами. Исследуют молоко, мокроту, навоз, мочу, при отрицательных результатах проводят диагностический убой и при обнаружении патологоанатомических изменений, свойственных коринебактериозным инфекциям, уточняют диагноз. В сомнительных случаях для подтверждения диагноза берут кусочки паренхиматозных органов для бактериологического исследования. В практической ветеринарии для диагностики некоторых хронически протекающих заболеваний (туберкулеза, бруцеллеза, туляремии и др.) применяют аллергическую пробу, основанную на феномене повышенной чувствительности замедленного типа. На введение аллергена гомологично сенсибилизированный макроорганизм реагирует увеличением кожной складки, что является показателем инфицированности организма (1. 2.). Для диагностики инфекций коринебактериозной этиологии, которые имеют группоспецифическую общность с микобактериями, подобный метод не предусмотрен по причине отсутствия аллергена.

Наиболее близким техническим решением является аллергический способ диагностики туберкулеза с использованием ППД-туберкулина для млекопитающих. На внутрикожное введение туберкулина сенсибилизированный коринебактериями макроорганизм отвечает нечетко выраженной неспецифической реакцией.

Недостатком данного метода является низкая чувствительность и непродолжительность реакции на туберкулин у зараженных коринебактериями животных. При этом причина неспецифических реакций остается невыясненной, что заметно сказывается на эффективности принимаемых мер при ликвидации данной патологии. Бактериологические и патологоанатомические исследования коринебактериозных инфекций не только трудоемки, но и требуют немалых материальных вложений.

Целью изобретения является повышение эффективности и упрощения прижизненной диагностики коринебактериозных инфекции.

Указанная цель достигается тем, что в способе диагностики коринебактериозных инфекций в качестве диагностикума используется коринебактериозный аллерген, который вводится внутрикожно в верхней средней трети шеи крупного рогатого скота в дозе 0,2 мл с учетом и оценкой реакции через 72 часа. Используемый в качестве диагностикума аллерген более специфичен и чувствителен. Реагирующими считают животных с увеличением кожной складки на месте введения аллергена с разницей в 3 и более мм по сравнению с толщиной неизмененной кожи.

Заявляемое техническое решение отличается от прототипа тем, что в качестве диагностикума используется аллерген, изготовленный из коринебактерий. Для экспериментальной проверки заявляемого аллергена предварительно изготовили аллерген из коринебактерий. Для этого культуру коринебактерий (Corynebacterium xerosis N1911) выращивали на синтетической среде Сотона с добавлением смеси индивидуальных н-алканов, содержанием в цепи от 10 до 17 атомов углерода, в течение 2-х месяцев. Следует отметить, что среда Сотона нами была модифицирована и сравнительно испытана ранее. Результаты этих испытаний показали большую эффективность модифицированного варианта для выращивания коринебактерий, биомасса которых превышала контрольные серии более 2-х раз. Это позволило получить в 2-раза больше активного белка к единице объема. Колбы с культурой, где толщина слоя бакмассы достигала около 1 см, автоклавировали при 1,5 атм в течение 30 мин. Отделяли бактериальную массу фильтрацией и центрифугированием, после чего проводили осаждение белка. Из объема супернатанта в количестве 1,5 л осаждением в изоэлектрической точке NaCl (18% - концентраций при 4,1 РН) получили 3,2 г белка. Осажденный белок отделили, двукратно отмыли, чистый белковый осадок растворили в дистиллированной воде до концентрации остаточного азота 0,7 мг/мл и стерилизовали, пропустив через фильтр Зейтца.

Данное отличие позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого аллергена критерию «новизна». В диагностике коринебактериозных инфекций решения, имеющие похожие признаки, не выявлены ни в зарубежной, ни в отечественной литературе, следовательно заявляемое решение соответствует критерию «существенные отличия».

Испытание разных доз аллергена (0,1-0,4 мл) проводили на сенсибилизированных коринебактериями (С.xerosis N1911), через 27 дней после подкожного заражения в дозе 10 мг влажной культуры в 1 мл физиологического раствора. В опыт были взяты 25 морских свинок по 5 голов на испытываемую дозу и 5 находились на контроле. Опытным морским свинкам на депилированный участок реберной поверхности вводили испытуемые дозы аллергена. Учет и оценку реакции проводили через 48 и 72 часа после введения аллергена. Реагирующими считали животных, у которых обнаруживали разницу в толщине кожной складки в месте введения аллергена в сравнении с таковой неизмененной кожи не менее 3 мм.

По результатам проведенных исследований на дозу 0,1 мл реагировали все опытные морские свинки со средней интенсивностью реакции через 48 часов на 4,18±0,40, через 72 часа на 4,78±0,46. На дозу 0,2 мл интенсивность реакций составляла 5,39±0,33 и 6,11±0,37 соответственно. С увеличением доз аллергена не установили разницы в сторону увеличения интенсивности реакции, поэтому оптимальной дозой аллергена для использования в целях диагностики коринебактериозных инфекций была принята доза в объеме 0,2 мл. Следует сказать, подведение концентрации белка в аллергенах к количественному содержанию его в туберкулине (0,7 мг/мл) имело решающее значение в определении оптимальной дозы в объемном выражении. Табл. 1

Испытание аллергена на специфичность проводили на зараженных коринебактериями и атипичными микобактериями морских свинках и на больных туберкулезом животных.

Исследования показали высокую специфичность аллергена. Сенсибилизированные животные реагировали с большей интенсивностью на гомологичный аллерген. Так интенсивность реакции у зараженных коринебактериями морских свинок составляла 6,92±0,28, тогда как у зараженных атипичными микобактериями и больных туберкулезом животных было 4,76±0,33 и 4,95±38 соответственно (см. Табл 2).

Следует сказать, что микобактерии имеют родственные антигенные детерминанты с коринебактериями, поэтому данная группа животных реагировала на коринебактериозный аллерген, но в значительно меньшем количестве и с меньшей реакцией.

Источники информации

1. Курская биофабрика 100 лет. - Курск 1996. - С. 374-403.

2. Лазовская А. Л., Блохина И.Н. Патогенные и условно-патогенные микобактерии - Горький, 1976.

3. Нуратинов Р.А., Ургуев К.Р., Овдиенко Н.П., Найманов А.Х. Способ диагностики родококковой инфекции у животных. Патент на изобретение №2146534. - Москва от 20 марта 2000 г.

4. Фрадкин В.А. Диагностические и лечебные аллергены. - Москва, « Медицина», 1990 г. -226 с.

5. Шевырев Н.С. Совершенствование промышленных технологий сухого очищеного туберкулина для млекопитающих. // Тр. ВГНКИ ветпрепаратов. М., 1972.-Т. XVIII.- с. 59.

6. Janicki B.W., Chaparas S.D., Daniel Т.М. et. al.// Amer. Rev. Dis. - 1971 - Vol. 104-№4-P. 602-604.

Результаты испытания разных доз аллергена на сенсибилизированных коринебактериями морских свинках

Результаты испытания аллергена на специфичность

Способ диагностики коринебактериоза и ассоциативных с коринебактериями инфекций у животных, неспецифически реагирующих на внутрикожное введения ППД-туберкулина для млекопитающих, отличающийся тем, что в качестве диагностикума используется коринебактериозный аллерген, который вводится внутрикожно в дозе 0,2 мл.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины и касается способа прогнозирования риска развития первичной открытоугольной глаукомы (ПОУГ) с неэффективной консервативной терапией у лиц русской национальности, являющихся уроженцами Центрального Черноземья РФ.

Изобретение относится к медицине и биологии и может быть использовано для оценки агрегатного состояния эритроцитов в аутологичной сыворотке крови. Сущность способа оценки агрегатного состояния эритроцитов в аутологичной сыворотке крови заключается в выделении эритроцитов из крови, их промывании, смешивании сыворотки с эритроцитами и микроскопической оценке их агрегатного состояния с помощью световой микроскопии.
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и может быть использовано для ранней диагностики сочетанного течения атеросклероза у больных хронической ишемией нижних конечностей.

Изобретение относится к области диагностики и может быть использовано для тестирования и корректировки работы алкометра. Портативный картридж со стандартным спиртовым газом для алкометра содержит стандартный спиртовой газ с предварительно заданной концентрацией и выполнен с возможностью отображения значения указанной концентрации на внешней поверхности картриджа (1) или его сохранения на запоминающем носителе, предусмотренном на картридже (1).
Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии и урологии, и касается лечения гиперактивного мочевого пузыря у детей. Способ включает введение препаратов, увеличивающих объем мочевого пузыря, а также введение десмопрессина (минирина) в течение 3-х месяцев.

Изобретение относится к пищевой промышленности и медицине, гигиене питания. Предложен способ разработки рецептуры продукта, восполняющего индивидуальный дефицит витаминов и минеральных веществ в организме, предназначенный для определения и обеспечения содержания необходимых индивидуальных доз потребления витаминов и минеральных веществ (нутриентов) в продукте, обеспечивающих восстановление и поддержание насыщенности ими организма человека в пределах нормы физиологической потребности при их недостатке в сыворотке крови и за счет этого сохранение метаболического баланса.
Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики остеопороза при ревматоидном артрите. Сущность способа заключается в том, что в сыворотке крови больных определяют концентрацию белков и пептидов и дополнительно исследуют уровень адипонектина.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для измерения параметров распределения эритроцитов по деформируемости Для этого проводят видеозапись и обработку дифракционной картины, возникающей при рассеянии лазерного пучка на разбавленной суспензии эритроцитов, деформированных в сдвиговом потоке силами вязкого трения, оцифровку этой дифракционной картины, определение формы линии изоинтенсивности, лежащей на периферии центрального дифракционного максимума, измерение интенсивности I рассеянного света на данной линии изоинтенсивности по отношению к интенсивности центрального дифракционного максимума I(0), определение координат полярных точек xp и yp, лежащих на пересечении данной линии изоинтенсивности с горизонтальной осью координат и с вертикальной осью координат.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для прогнозирования повышения артериальной жесткости у пациентов с высоким и очень высоким сердечно-сосудистым риском, получающих терапию статинами.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ дифференциальной диагностики у детей гломерулярного и тубулоинтерстициального заболеваний почек нетоксической природы и ассоциированных с токсическим действием Cd, Pb, Cr и фенола, характеризующийся тем, что при содержании указанных веществ в крови выше референтного значения осуществляют генетическое исследование, при наличии полиморфизма генов CYPOX, RCYT 450, SULTA1 проводят ультразвуковое исследование, при установлении обеднения кровотока в подкапсульной зоне почек, отклонений показателей спектрограммы импульсно-волнового допплера и повышения эхогенности паренхимы почек, осуществляют дополнительные исследования, и при отклонении относительно физиологической возрастной нормы 65% или более из следующих показателей: содержание ОАС, Cu/Zn-СОД, ГлПО; повышение уровня каталазы, гидроперекисей липидов, МДА; и снижении абсолютного фагоцитоза и фагоцитарного числа диагностируют заболевание, ассоциированное с токсическим действием, а при отсутствии таких отклонений - заболевание нетоксической природы.

Группа изобретений относится к области медицины и может быть использована для диагностики наличия инфекции Helicobacter pylori у пациента по выдыхаемому воздуху. Для этого у пациента проводят определение содержания аммиака с сопутствующими органическими аминами в воздухе ротовой полости в период активного гидролиза мочевины в интервале с 1 до 9-й мин после приема мочевины. При этом используют несколько датчиков газа, которые подбирают таким образом, чтобы чувствительность каждого вспомогательного датчика к газу, к которому перекрестно чувствителен основной датчик, была выше чувствительности основного датчика к данному газу. Основным датчиком является датчик, чувствительный к аммиаку, а вспомогательными - датчики, чувствительные к парам спирта и летучим органическим соединениям. Показания основного датчика корректируют с учетом показаний вспомогательных датчиков и по скорректированным показаниям судят о степени инфицированности пациента бактерией Helicobacter pylori. Группа изобретений относится также к устройству для реализации указанного способа. Группа изобретений позволяет уменьшить погрешность измерения концентрации аммиака в выдыхаемом пациентом воздухе, вносимой воздействием на датчик примесных газов. 2 н.п. ф-лы, 1 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и касается прогнозирования развития сердечно-сосудистых осложнений после острого инфаркта миокарда с подъемом сегмента ST у больных с тревожно-депрессивными расстройствами (ТДР). Для этого с помощью биолюминесцентного метода в тромбоцитах определяют активность НАДФН-зависимой глутаматдегидрогеназы - НАДФН-ГДГ, НАДН-зависимой глутамат-дегидрогеназы - НАДН-ГДГ и глутатионредуктазы - ГР. Затем вычисляют коэффициент глутамат-глутатионового соотношения - КГГС, представляющий собой отношение суммы активности НАДФН-ГДГ и НАДН-ГДГ к активности НАДИЦДГ, т.е. КГГС = (НАДФН - ГДГ + НАДН - ГДГ) / ГР. При значении КГГС выше 1,6 прогнозируют развитие сердечно-сосудистых осложнений у больных с ОИМпST с ТДР, а при значении равном или ниже 1,6 прогнозируют отсутствие сердечно-сосудистых осложнений. Способ обеспечивает возможность раннего и достоверного прогнозирования возможности развития сердечно-сосудистых осложнений у данной группы больных. 2 пр.
Наверх