Способ изготовления жидких стерильных питательных сред для работы с клетками млекопитающих

Авторы патента:


Способ изготовления жидких стерильных питательных сред для работы с клетками млекопитающих
Способ изготовления жидких стерильных питательных сред для работы с клетками млекопитающих
Способ изготовления жидких стерильных питательных сред для работы с клетками млекопитающих
Способ изготовления жидких стерильных питательных сред для работы с клетками млекопитающих

 


Владельцы патента RU 2607648:

Раев Михаил Борисович (RU)

Изобретение относится к биохимии. Предложен способ изготовления жидких стерильных питательных сред. Способ включает растворение сухих компонентов питательных сред в оптимальных объемах растворителя и стерилизации получаемых растворов. Растворение проводят в течение 5-10 минут в ультразвуковой ванне при частоте генератора 37 кГц и амплитуде колебаний в диапазоне от 5 до 20 микрон. Стерилизующую ультрафильтрацию осуществляют с использованием каскада из трех последовательно расположенных мембранных фильтров с размером пор 0,45-0,22-0,1 мкм и эффективностью фильтрации от 100 до 1000 мл/мин. Изобретение обеспечивает получение питательных сред для клеточной биологии в требуемых объёмах непосредственно перед началом планируемых работ, а также повышение надёжности и качества работ с клетками млекопитающих. 2 з.п. ф-лы, 1 табл., 1 ил.

 

Изобретение относится к биотехнологии и касается способа изготовления жидких стерильных питательных сред для работы с культурами клеток млекопитающих.

Проблемы, сопровождающие процессы производства готовых стерильных сред, состоят, с одной стороны, в способе стерилизации, обеспечивающем возможность их надежного долгосрочного хранения, с другой, в исчерпывающем растворении всех компонентов, среди которых присутствуют реагенты, концентрация которых в литре готовой среды не превышает 1-го мг. При длительном хранении смесей сухих компонентов даже в условиях контролируемой влажности практически неизбежны процессы спекания, что при использовании традиционных способов растворения и последующей стерилизующей фильтрации приводит к потере минорных по весу компонентов среды. Изготовление жидких сред из смесей, не подвергающихся длительному хранению, решает эту проблему, но существенным образом повышает риски, связанные с хранением и транспортировкой жидких растворов, сказываясь и на экономической стороне.

Известен способ получения питательной среды для культур клеток животных, включающий растворение органических компонентов среды в готовых солевых растворах Эрла или Хэнкса, с последующей стерилизацией [1].

Известен способ получения питательной среды для культивирования клеток животных, включающий смешивание стерильных растворов Хэнкса, 5%-го раствора гидролизата лактальбумина и сыворотки КРС, с последующей стадией фильтрации и повторной стерилизации [2].

Описанные аналоги предусматривают использование уже готовых стерильных сред в технологиях получения новых сред, что неоправданно утяжеляет как с технологической, так и с экономической точки зрения технологии их изготовления.

Известен способ получения жидкой стерильной питательной среды для культивирования клеток млекопитающих, предусматривающий стерилизацию предварительно подготовленных сухих смесей компонентов ускоренными электронами. Полученные подобным способом стерильные компоненты впоследствии растворяют в стерильной очищенной воде [3].

Описанный способ подлежит критике в первую очередь с позиции существенного усложнения работы с клетками, так как предусматривает необходимость соблюдения специальных условий в процессе растворения сухих компонентов. При этом следует учесть то, что эффективность питательной среды зависит от степени исчерпывающего растворения компонентов и, как правило, требует дополнительной фильтрации, что практически невозможно в данном способе.

Наиболее близким к заявляемому способу - прототипом - является способ получения жидкой стерильной питательной среды, включающий последовательное растворение нестерильных компонентов: неорганических солей, глюкозы, гидролизата казеина, витаминов, фенолового красного и бикарбоната натрия в нестерильной очищенной воде, добавление к полученной нестерильной питательной среде 10%-го раствора поливинилпирролидона, сыворотки КРС и антибиотиков. Стерилизация осуществляется фильтрацией через мембранные фильтры с диаметром пор 0,45 и 0,22 мкм, после чего стерильные растворы сред расфасовывают во флаконы в асептических условиях [4].

Основными недостатками этого способа являются ограниченный срок годности жидких стерильных питательных сред на основе ферментативных гидролизатов, который не превышает 6 месяцев при температуре 0-10°С. Кроме того, изготовление и хранение жидких стерильных питательных сред на основе ферментативных гидролизатов экономически невыгодно, это касается и проблем логистики.

Основными задачами предлагаемого способа изготовления жидких стерильных питательных сред являются: обеспечение возможности работы с нестерильными компонентами, оптимизация количества получаемых сред в диапазоне объемов, фактически необходимых в данный момент времени. Это освобождает от необходимости обеспечивать строгие условия для хранения жидких сред и существенно снижает риски и ограничения, диктуемые временными рамками. Предлагаемый способ более привлекателен с экономической точки зрения.

Поставленные задачи решаются растворением заранее подготовленных стандартных фасовок смеси сухих компонентов в очищенной воде и непосредственно следующей за этим стерилизацией раствора. Исчерпывающее растворение достигается при помощи использования ультразвуковой ванны (УЗ). Могут быть использованы УЗ-ванны фирм HAKKO, ERSA, Proskit, S-line, Актаком, Сапфир с рабочими объемами от 1 до 100 литров. Время эффективного растворения зависит от объемов изготавливаемой среды и не превышает 10 минут. Стерилизующая ультрафильтрация осуществляется за счет применения мембранных фильтров. Требованиям эффективной стерилизующей ультрафильтрации удовлетворяет продукция любого из существующих производителей: Pall, Millipore, Aqua Filter, Sartorius, Soclema, Владипор.

Непосредственно перед работой в УЗ-ванну помещают необходимый объем очищенной воды (от 1-го до 100 литров в зависимости от рабочего объема ванны и требуемого для работы объема среды) и соответствующее количество смеси сухих компонентов сред. После 5-10-минутного цикла растворения готовая среда подается при помощи насоса в стерильный сосуд через систему стерилизующей ультрафильтрации. В ходе растворения в ванну добавляют все необходимые дополнительные нестерильные сухие компоненты в соответствии с задачами проводимой работы. Режим работы УЗ-ванны подбирают таким образом, чтобы не происходило выплескивания жидкости за счет кавитации. Так, например, при стандартной частоте УЗ-генератора 37 кГц резонансное состояние (условия образования кавитационных пузырьков в водных растворах) достигается в диапазоне амплитуд уз/волн от 5 до 20 микрон. Таким образом, любой параметр этого диапазона, не приводящий к выплескиванию жидкости из ванны за счет чрезмерного вспенивания, будет удовлетворять задачам исчерпывающего растворения. Состояние, при котором образуются кавитационные пузырьки, определяется визуально и по характерному резонирующему звуку. Предпочтительным является использование минимальных значений амплитуды, при которых наблюдается кавитация, как фактор, уменьшающий нагревание озвучиваемой смеси. Производительность насоса при ультрафильтрации задается в соответствии с рекомендациями изготовителя используемых фильтров. Надежность стерилизации обеспечивается за счет использования каскада, состоящего из трех последовательно расположенных фильтров с размером пор 0,45, 0,22 и 0,1 мкм. Используются стерильные фильтры заводского изготовления. Схема процесса представлена на рис. 1.

В разработанной технологии использовали УЗ-ванну Elmasonic S 40/(Н) производства компании Elma (Германия) и вакуумный насос WP6122050 Millipore (США).

В таблице 1 приведен состав среды α-МЕМ.

Состав среды представлен в качестве стандартного примера. Аналогичным образом выглядят модификации состава сред α-МЕМ, DMEM, F-12, RPMI-1640 и т.д.

Сущность изобретения. Смесь сухих компонентов среды растворяют в соответствующем объеме очищенной воды. После стерилизующей фильтрации непосредственно в ходе работы вносят требуемое количество необходимых добавок в виде стерильных растворов (сыворотка, антибиотики и др.). Использование готовых коммерческих смесей не требует никаких дополнительных процедур. В случае использования самостоятельно приготовленных сухих смесей для удобства фасовки предварительно навешивают стократное количество каждого компонента. Перед расфасовкой их подвергают 2-часовому измельчению и гомогенизации в шаровой мельнице (барабанный смеситель) до получения гомогенной, относительно мелкодисперсной массы, которую и фасуют в 100 пластиковых герметичных микроконтейнеров, каждый из которых содержит сухой смеси в количестве, необходимом для приготовления 1 литра среды (12,213 г для среды α-МЕМ). Все используемые компоненты имеют квалификацию «осч» - российского производства и/или соответствующую таковой - импортного.

В дальнейшем, требуемый объем среды изготавливается путем использования содержимого соответствующего количества контейнеров от 1 до 100 литров, кратно одному литру и из расчета 1 контейнер на 1 литр среды.

Признаки способа, отвечающие критерию новизны, состоят в том, что для быстрого и эффективного растворения используют ультразвуковую ванну, позволяющую за счет кавитационных процессов быстро, 5-10 минут, получать гомогенный раствор солей, который после немедленной фильтрующей стерилизации и добавления требуемых стерильных компонентов готов к использованию в качестве среды для культивирования клеток млекопитающих. При этом количество получаемой среды соответствует требуемому для актуальной в данное время работы объему, что освобождает от необходимости хранить заблаговременно приготовленную или приобретенную среду в контролируемых условиях в течение неопределенного времени с возникновением рисков ее невостребованности и вынужденной утилизации по истечении сроков хранения или в связи с бактериальным проростом при ненадлежащем использовании и/или хранении. Подобный подход обеспечивает приготовление любых сред, используемых в клеточной биологии. В зависимости от объема сред время на их приготовление составляет от 15-ти минут для приготовления 1-го литра до 60-ти минут для приготовления 10-ти литров. Для приготовления большего объема сред (более 10 литров) используют фильтры большего диаметра (90 мм), позволяющие увеличить производительность стерилизующей фильтрации до 1 литра в минуту.

Предлагаемый способ подразумевает использование любых УЗ-ванн как с заданными производителем характеристиками, обеспечивающими кавитационные условия, так и устанавливаемыми вручную. В последнем случае единственным условием является возможность установки параметров частоты и амплитуды, обеспечивающих наступление состояния резонанса и, как следствие, возникновение кавитационных процессов, не сопровождающихся чрезмерным нагреванием и выплескиванием жидкости из ванны.

Отдельно следует отметить, что используемые компоненты среды являются низкомолекулярными соединениями, солюбилизация которых в водных растворителях не оказывает значимого влияния на вязкость среды, что могло бы динамично влиять в свою очередь на параметры распространения звуковых волн в озвучиваемых растворах.

Предлагаемое техническое решение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Изготовление 1-го литра жидкой стерильной питательной среды α-МЕМ для культивирования мезенхимальных стволовых клеток.

Содержимое контейнера с сухой смесью компонентов среды α-МЕМ помещают в УЗ-ванну Elmasonic S 40/(Н) производства компании Elma (Германия) с 1 литром очищенной воды при температуре 20°С. Время озвучивания составляет 5 минут. Частота озвучивания постоянна и составляет 37 кГц, что задается встроенным генератором ванны. Наступление резонансного состояния, приводящее к появлению кавитации, обусловлено конструктивным решением ванны, позволяющим установить амплитуду колебаний уз/волн в диапазоне от 5 до 20 микрон. При этом амплитуда колебаний задается в режиме модуляции, исходя из допустимых объемов, а именно: от 0,5 до 5 литров озвучиваемой жидкости, не приводящая к выплескиванию раствора из ванны. Готовый раствор фильтруют в стеклянную стерильную емкость через каскад из трех стерильных фильтров диаметром 47 мм и размерами пор: 0,45-0,22-0,1 мкм соответственно, установленных в стерильные фильтродержатели, с эффективностью фильтрации 100 мл/мин. Полученный раствор переносят в ламинарный бокс, добавляют стерильную фетальную сыворотку (ФС) крупного рогатого скота (КРС) до конечной концентрации 15%. Полученную среду используют для разведения, промывки и культивирования перевиваемых мезенхимальных клеток на чашках Петри, во флаконах, биореакторах и т.д.

Пример 2. Изготовление 5-ти литров жидкой стерильной питательной среды α-МЕМ для криохранения мезенхимальных стволовых клеток.

Содержимое 5-ти контейнеров с сухой смесью компонентов среды α-МЕМ помещают в УЗ-ванну Elmasonic S 40/(Н) производства компании Elma (Германия) с 5-тью литрами очищенной воды при температуре 20°С. Время озвучивания составляет 8 минут. Частота озвучивания задается параметрами встроенного генератора и составляет 37 кГц. Амплитуда колебаний устанавливается в диапазоне от 5 до 20 микрон, что обеспечивает возникновение кавитационных процессов за счет наступления резонансного состояния в озвучиваемой жидкости. Готовый раствор фильтруют в стеклянную стерильную емкость через каскад из трех стерильных фильтров диаметром 47 мм и размерами пор: 0,45 - 0,22 - 0,1 мкм соответственно с эффективностью фильтрации 100 мл/мин. Полученный раствор переносят в ламинарный бокс, добавляют стерильную ФС крупного рогатого скота до конечной концентрации 20% и ДМСО до конечной концентрации 10%. Полученную среду используют для промывки и замораживания мезенхимальных клеток в криопробирках до температуры жидкого азота.

Пример 3. Изготовление 10-ти литров жидкой стерильной питательной среды α-МЕМ для комплекса работ с мезенхимальными стволовыми клетками из жировой ткани.

Содержимое 10-ти контейнеров с сухой смесью компонентов среды α-МЕМ помещают в УЗ-ванну Elmasonic S 40/(Н) производства компании Elma (Германия) с 10-тью литрами очищенной воды при температуре 20°С. Время озвучивания составляет 10 минут. Частота озвучивания задается параметрами встроенного генератора и составляет 37 кГц. Амплитуда колебаний устанавливается в диапазоне от 5 до 20 микрон, что обеспечивает возникновение кавитационных процессов за счет наступления резонансного состояния в озвучиваемой жидкости. Готовый раствор фильтруют в стеклянную стерильную емкость через каскад из трех стерильных фильтров диаметров 90 мм и размерами пор: 0,45-0,22-0,1 мкм соответственно с эффективностью фильтрации 1000 мл/мин. Полученный раствор переносят в ламинарный бокс, добавляют стерильную ФС крупного рогатого скота до конечной концентрации 15%. Полученную среду используют для выделения, фракционирования, промывки и культивирования мезенхимальных клеток, получаемых из жировой ткани.

Контейнеры с сухими смесями хранят при температуре +4°С. Срок хранения 5 лет (время наблюдения) не влияет на качество получаемой жидкой среды.

Оценку пригодности описанного способа получения сред для культивирования клеток млекопитающих проводят в условиях прямой симуляции технологического процесса. Для этого полученную среду в стерильных условиях разливают в чашки Петри, вносят клетки из расчета 100 тыс. на 1 мл среды и инкубируют в СО2-инкубаторе при температуре 36°С и концентрации СО2 - 5%. Среду считают пригодной, если на вторые сутки инкубации наблюдают устойчивую адгезию клеток на поверхности чашки, а после 3 пассажа число клеток увеличивается не менее чем в два раза (подсчет в камере Горяева).

Таким образом, предложенный способ изготовления жидких стерильных питательных сред позволяет обеспечить оперативное получение среды с надлежащими функциональными свойствами, а также существенно снизить риски и затраты, связанные с зависимостью качества готовых сред от условий хранения и транспортировки.

Технический результат от использования изобретения заключается в возможности получения любых сред для клеточной биологии в требуемых объемах в условиях обычной лаборатории и непосредственно перед началом планируемых работ, значительном повышении надежности и качества работ с клетками млекопитающих за счет отсутствия необходимости хранить готовые жидкие среды.

Заявляемое техническое решение соответствует критерию «промышленное применение», так как все применяемые реагенты и оборудование доступны, а технологические приемы легко выполняемы.

Источники информации

1. Авторское свидетельство СССР №1025722, "Питательная среда для выращивания культур клеток животных", C12N 1/00, БИ 24, 1983.

2. Голубев Д.Б., Сомина А.А., Медведева М.Н. Руководство по применению клеточных культур в вирусологии. - М.: Медицина, 1976 г., с. 25.

3. Патент на изобретение №2161649, «Способ получения жидкой стерильной питательной среды на основе ферментативного гидролизата». C12N 5/00, 2001.

4. Авторское свидетельство СССР №1735360, "Питательная среда для перевиваемых клеток млекопитающих", БИ 19, 1992.

1. Способ изготовления жидких стерильных питательных сред в требуемых количествах, пригодных для культивирования и хранения клеток млекопитающих, заключающийся в операции растворения сухих компонентов питательных сред в оптимальных объемах растворителя и стерилизации получаемых растворов, отличающийся тем, что растворение проводят в ультразвуковой ванне при частоте генератора 37 кГц и амплитуде колебаний в диапазоне от 5 до 20 микрон, обеспечивающей наступление состояние резонанса, приводящее к образованию кавитационных явлений, в течение 5-10 минут с последующей стерилизующей ультрафильтрацией с использованием каскада из трех последовательно расположенных мембранных фильтров с размером пор 0,45-0,22-0,1 мкм соответственно и эффективностью фильтрации от 100 до 1000 мл/мин непосредственно перед применением в качестве культуральной среды.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что мембранные фильтры имеют диаметр 47 мм.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что мембранные фильтры имеют диаметр 90 мм.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области эмбриологии. Способ получения популяции клеток-предшественников эндокринных клеток поджелудочной железы из плюрипотентных стволовых клеток, которые представляют собой человеческие эмбриональные стволовые клетки линии Н9, H1, Н7 и человеческие эмбриональные стволовые клетки линии SA002, включает стадии: культивирования популяции указанных плюрипотентных стволовых клеток; дифференцирования популяции указанных плюрипотентных стволовых клеток в популяцию клеток, экспрессирующих маркеры, характерные для линии сформированной эндодермы; дифференцирования популяции клеток, экспрессирующих маркеры, характерные для линии сформированной эндодермы, в популяцию клеток первичной кишечной трубки; дифференцирования популяции клеток первичной кишечной трубки в популяцию клеток заднего сегмента передней кишки и дифференцирования популяции клеток заднего сегмента передней кишки в популяцию предшественников эндокринных клеток поджелудочной железы путем культивирования популяции клеток задней части передней кишки в среде с добавлением ингибитора CYP26A без добавления ретиноевой кислоты.

Изобретение относится к полимерным гелям и способам их получения, а именно к макропористым носителям на основе желатина, которое может быть использовано в биотехнологии, клеточной технологии и тканевой инженерии.

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены способ снижения накопления лактата от 5% до 40% при культивировании клеток млекопитающих и способ получения антитела.

Изобретение относится к биотехнологии, ветеринарии, клеточной биологии и связано с применением экстракта лиофильно высушенной медицинской пиявки в качестве компонента питательной среды для культивирования клеток млекопитающих.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу получения мультипотентных стволовых клеток/клеток-предшественников млекопитающего, а также к применению клеток, полученных данным способом.

Изобретение относится к биотехнологии, конкретно к клеточным технологиям, и может быть использовано в регенеративной медицине. Выделяют взвесь неадгезирующих мононуклеаров клеток из ткани поджелудочной железы при сахарном диабете, в полученной взвеси оценивают количество мультипотентных прогениторных клеток, олигопотентных прогениторных клеток и инсулин-продуцирующих β-клеток.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ имплантации биологического материала в организм с использованием композиции, содержащей коллаген.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к композиции среды для омолаживания мезенхимальных стволовых клеток пожилого субъекта, содержащей FBS (фетальную сыворотку теленка), 0,5-1 нг/мл селена, 10-50 нг/мл EGF (эпидермальный фактор роста), 1-100 нг/мл bFGF (основной фактор роста фибробластов) и NAC (N-ацетил-L-цистеин).

Изобретение относится к области молекулярной биологии. Предложен способ получения постоянной линии клеток-амниоцитов человека, включающий трансфекцию зародышевых клеток-амниоцитов человека молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую продукты генов аденовирусов Е1А и Е1В, причем указанную последовательность нуклеиновой кислоты получают из серотипа 5 аденовируса человека, и последующую трансфекцию постоянной линии клеток-амниоцитов человека, полученной на первом этапе, молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую большой SV40 Т-антиген.

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Способ выделения ганглиозида GM1 предусматривает получение тканей не бычьего и не свиного происхождения, содержащих клетки, продуцирующие GM1; выделение из указанных тканей клеток, продуцирующих ганглиозид GM1; экспансию указанных клеток, продуцирующих GM1, в культуре при подходящих условиях, способствующих экспансии указанных клеток; экспрессию ганглиозида GM1 в культуре при подходящих условиях; выделение указанного ганглиозида GM1 из указанной культуры, который может быть использован для лечения болезни Паркинсона и других неврологических заболеваний.

Изобретение относится к ультразвуковым устройствам для обработки суспензий, гелей и жидкостей и может быть использовано для получения путем организации процессов перемешивания, эмульгирования и диспергирования, высокогомогенных нанодисперсий, а также прямых и обратных эмульсий, состоящих из взаимно нерастворимых жидкостей.

Группа изобретений относится к области биотехнологии и может быть использована для получения адьювантов для вирусных вакцин. Способ получения стабильных ультрадисперсных водных лиозолей терпентинного масла с заданными дисперсионными параметрами заключается в том, что терпентинное масло диспергируется в два этапа: на первом этапе готовится маточная дисперсия с помощью ультразвукового диспергирования 1 мл терпентинного масла в 500 мл дистиллированной воды; на втором этапе маточная дисперсия фильтруется путем продавливания под давлением 0,2-0,3 МПа через пористую мембрану из полиэфирсульфона в основную дисперсионную среду, которая предварительно барботирована ионизированным газом.

Изобретение относится к смешиванию жидкостей и может быть использовано для обработки жидких сред, а именно: для диспергирования, эмульгирования, гомогенизации. Ультразвуковой проточный реактор содержит рабочую камеру в виде трубы, на наружной поверхности которой по периметру и вдоль продольной оси трубы закреплены и акустически связаны с ней ультразвуковые преобразователи.

Изобретение относится к области кавитационной обработки жидких сред, а также предметов, находящихся в обрабатываемой жидкой среде. Способ заключается в размещении жидких сред и расположенных в среде предметов внутри механической колебательной системы-канала, имеющего нелинейную зависимость частоты резонансных колебаний от амплитуды, в которой осуществляют максимальное совмещение резонансных кривых возбудителя ультразвуковых колебаний и нелинейной резонансной кривой самой системы-канала путем определения нелинейной резонансной кривой системы-канала как зависимости амплитуды механических колебаний от частоты, определения разницы между частотой возбудителя и резонансной частотой системы-канала при необходимой амплитуде колебаний и изменения исходя из этой разницы резонансной частоты системы-канала путем изменения геометрических размеров сторон, при этом, если разница в частотах превышает ~1,5-2,0 ширины резонансной характеристики возбудителя, применяют возбуждение колебаний на двух или более разных частотах.

Группа изобретений относится к области медицины, а именно к молекулярной диагностике. Устройство для подвергания жидкой пробы воздействию акустической энергии путем создания кавитации в жидкой пробе содержит источник высокоинтенсивных ультразвуковых волн и картридж, содержащий жидкую пробу и границу раздела жидкость-воздух.

Изобретение относится к области ультразвуковой кавитационной обработки жидких сред и расположенных в среде объектов. Способ заключается в размещении жидких сред и расположенных в среде объектов внутри механической колебательной системы-канала, имеющего собственную частоту колебаний, в которой осуществляют возбуждение параметрических резонансов или параметрическое возбуждение автоколебаний, задают в качестве критерия эффективности кавитационной обработки максимальную амплитуду колебаний системы-канала, определяют оптимальную частоту или частоты колебаний силовых возбудителей предварительным экспериментальным определением собственных и параметрических частот колебаний.

Изобретение может быть использовано в двигателях внутреннего сгорания. Предложен ультразвуковой смеситель растительного масла и минерального топлива, содержащий ультразвуковой излучатель (1), электронный блок управления (3).

Группа изобретений относится к химическим, физическим, химико-физическим процессам, а именно к процессам, в которых для их осуществления используются звуковые или ультразвуковые колебания.

Изобретение относится к составам для защиты различных поверхностей от микроорганизмов и биокоррозии, в частности к составам, включающим янтарь в качестве одного из компонентов.

Изобретение относится к технике измельчения материалов. Способ, реализуемый в соответствующем устройстве, содержит этапы, на которых: загружают упомянутый материал в смеси с водой в диспергационную камеру; герметизируют упомянутую диспергационную камеру; подают в герметизированную диспергационную камеру статическое давление 5-30 атм.; обрабатывают содержимое упомянутой диспергационной камеры ультразвуковыми колебаниями с плотностью озвучивания не менее 50 Вт/см2, обеспечивающими звуковое давление на упомянутый материал в смеси с водой, превышающее упомянутое статическое давление в 2-3 раза.

Изобретение относится к технике управления процессом растворения применительно к растворению карналлитовых руд с получением обогащенного карналлита. Способ включает стабилизацию температуры растворения солей и концентрации полезного компонента в растворе изменением расхода сырья на растворение, определение полезного компонента с входящими в процесс солями и корректировку расхода полезного компонента, поступающего в составе сырья.
Наверх