Иммуногенная композиция из убитой бактерии лептоспиры

Группа изобретений относится к области медицины, в частности к композиции, содержащей иммуногенный препарат клеток убитой бактерии Leptospira в растворе 10, 20 или 50 ммоль/л лимонной кислоты. Она также относится к вакцине для защиты животных от заражения бактерией Leptospira, где вакцина содержит данную композицию, и к применению 10, 20 или 50 ммоль/л лимонной кислоты для стабилизации иммуногенного препарата убитой бактерии Leptospira в жидком носителе путем растворения лимонной кислоты в носителе. Группа изобретений обеспечивает создание вакцины против лептоспироза, которая остается эффективной после трех месяцев хранения при 37°С. 3 н. и 5 з.п. ф-лы, 11 табл., 4 пр.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к композиции, содержащей иммуногенный препарат клеток убитой бактерии Leptospira, вакцине для защиты животных от заражения бактерией лептоспирой и применению кислоты для стабилизации иммуногенного препарата убитой бактерии Leptospira.

Уровень техники

Лептоспироз является широко распространенным в мире зоонозом, вызванным заражением любым из большого числа патогенетических серотипов Leptospira. Данный род организмов является чрезвычайно вариабельным и содержит свыше 250 серотипов. Распространение отдельных патогенетических серотипов отличается в различных районах, вероятно, под влиянием таких факторов, как климат, местная фауна и агротехнические приемы. Лептоспироз воздействует фактически на все виды млекопитающих. Человеческий лептоспироз также является важным и встречается эндемично в тропиках и в виде эпидемий в умеренном климате. Однако в отличие от других видов люди не играют важной роли в сохранении заболевания в природе, и передача от человека к человеку является редкой.

Вакцинация людей против лептоспироза является целью научного сообщества, но прогресс идет очень медленно. Ввиду того, что собачий лептоспироз является важным заболеванием и что собаки являются источником лептоспироза, доступно множество вакцин против заболевания собак. Коммерческие вакцины против собачьего лептоспироза обычно содержат инактивированные антигены серогрупп Canicola и Icterohaemorrhagiae (Ictero) и являются доступными более пятидесяти лет. Последними рекомендациями для Европы являются продолжение включения в вакцину антигена серогрупп Canicola и Ictero, а также включение антигена серогрупп Grippotyphosa (Grippo) и Australis. Тогда как в США в настоящее время доступно четыре собачьи вакцины с антигенами четырех серогрупп (Canicola, Ictero, Grippo и Pomona), в Европе в настоящее время доступно много традиционных бивалентных вакцин (Canicola, Ictero) и только одна тривалентная вакцина (Canicola, Ictero и Grippo).

Наиболее доступные на рынке вакцины против лептоспироза, если не все, содержат иммуногенный препарат клеток убитой бактерии Leptospira, такой как, например, формалинизированные убитые цельные клетки. Данные вакцины известны своей высокой стабильностью при температуре хранения ниже комнатной температуры, как правило, от 2°С до 8°С. Однако, особенно ввиду того, что лептоспироз является эндемичным для тропиков, важным преимуществом может стать стабильность вакцины при температуре выше комнатной температуры, при этом станет возможным хранение в условиях окружающей среды без необходимости в охлаждающем оборудовании. Ранее проверяли на денатурацию белки, которые присутствуют в данных вакцинах с убитыми цельными клетками (например, путем применения воздействия тепловым шоком, которое не повреждает антигены лептоспиры), если бы данные белки были ответственны за дестабилизацию антигенов лептоспиры, это могло привести к значительному увеличению стабильности. Результат, однако, был отрицательным.

Задача изобретения

Существует необходимость в значительном повышении стабильности композиций, содержащих иммуногенный препарат клеток убитой бактерии Leptospira, в частности в получении композиции, которая эффективна для индукции иммунного ответа даже после по меньшей мере трех месяцев хранения при температуре выше комнатной температуры. В частности, существует необходимость в вакцине против лептоспироза, которая остается эффективной, по меньшей мере способствует предотвращению заражения бактерией Leptospira, даже после трех месяцев хранения вакцины при 37°С, в частности после девяти месяцев хранения при данной температуре.

Сущность изобретения

Для решения задачи изобретения, была разработана композиция, где иммуногенный препарат клеток убитой бактерии Leptospira присутствует в растворе лимонной кислоты (где термин «кислота» включает сопряженное с кислотой основание). Было показано, что благодаря содержанию антигенов в данном растворе, стабильность антигенов заметно увеличилась. Вакцина, согласно настоящему изобретению, хранилась по меньшей мере три месяца при 37°С с сохранением уровня массы антигенов, достаточных для обеспечения по существу полной защиты от заражения бактерией Leptospira.

Определения

Вакцина изобретения в данном описании имеет состав, подходящий для применения на животных (включая людей), содержащий один или более антигенов, как правило, комбинированных с фармацевтически приемлемым носителем, таким как содержащая воду жидкость, необязательно содержащих иммуностимулирующие агенты (адъюванты), соли, буферы, стабилизаторы, модификаторы вязкости и др., которая после введения животному индуцирует иммунный ответ при лечении заболевания или расстройства, т.е. способствует предотвращению, облегчению протекания или выздоровлению от заболевания или расстройства.

Носитель представляет собой средство для переноса антигенов с целью обеспечения и представления их в требуемой форме. Обычными носителями являются вода или другие гидрофильные жидкости, но твердые частицы также часто используются (например, для антигенов, вводимых посредством небулайзера в форме сухого порошка).

Клеточный препарат убитой бактерии представляет собой препарат, главным образом содержащий убитые бактериальные клетки, также дополнительно обработанный (может включать, по меньшей мере частично, лизирующие клетки), например, для получения более стабильного или более иммуногенного препарата. Клеточный препарат действует противоположно препарату, который содержит экстракт бактериальных клеток, такой как экстрагированные поверхностные белки и/или полисахариды.

Варианты осуществления изобретения

В варианте осуществления изобретения раствор содержит 20 ммоль/л лимонной кислоты.

В другом варианте осуществления изобретения раствор является буферным с рН от 5 до 6.

В еще одном варианте осуществления изобретения бактерия Leptospira выбрана из Leptospira Interrogans серогруппы Canicola серотипа Portland-Vere, Leptospira interrogans серогруппы Australis серотипа Bratislava, Leptospira interrogans серогруппы Icterohaemorrhagiae серотипа Copenhageni и Leptospira kirschneri серогруппы Grippotyphosa серотипа Dadas, в частности бактерия Leptospira представлена Leptospira interrogans серогруппы Australis серотипа Bratislava.

Использование лимонной кислоты для стабилизации иммуногенного препарата убитой бактерии Leptospira в жидком носителе путем растворения лимонной кислоты в носителе осуществляется в частных вариантах осуществления в тех случаях, где в препарате сохраняется по меньшей мере 25% от массы антигенов (определяется в ELISA единицах по сравнению с аналогичным препаратом, хранящимся при температуре 2-8°С) в течение 3 месяцев хранения при температуре выше 18°С, в частности при 37°С.

Примеры

Ниже следует дополнительное описание изобретения, основанное на следующих примерах.

Пример 1: Определение на собаках эффективности антигенов убитой лептоспиры, как присутствующих в коммерчески доступной вакцине.

Пример 2: Определение стабильности антигенов лептоспиры при хранении при 37°С.

Пример 3: Определение стабильности антигенов лептоспиры, помещенных в лимонную кислоту при хранении при 37°С.

Пример 1

В первом примере эффективность антигенов убитой лептоспиры, как присутствующих в коммерчески доступной вакцине, определяли на стандартных собаках, антигены присутствовали согласно маркировке вакцины (100%) или разбавляли в четыре раза (25%). Заданные концентрации химически инактивированной бактерии Leptospira того же вида и серотипов, что присутствуют в коммерчески доступной вакцине Nobivac L4 (доступна от MSD Animal Health, Boxmeer, The Netherlands; см. также публикацию, касающуюся Nobivac L4 от 21 Мая 2012 Summary of Opinion Комитета по ветеринарным лекарственным препаратам Европейского агентства по лекарственным средствам), а именно Leptospira Interrogans серогруппы Canicola серотипа Portland-Vere (Leptospira сanicola; 5300 ELISA штук/мл), Leptospira Interrogans серогруппы Australis серотипа Bratislava (Leptospira Вratislava; 1000 ELISA единиц/мл), Leptospira Interrogans серогруппы Icterohaemorrhagiae серотипа Copenhageni (Leptospira icterohaemorrhagiae; 540 ELISA единиц/мл) и Leptospira kirschneri серогруппы Grippotyphosa серотипа Dadas (Leptospira grippotyphosa; 1000 ELISA единиц/мл) помещали в 10 мМ забуференного фосфатом солевого раствора при рН 7,2 (буфер содержит на литр воды 8,9 г NaCl, 0,2 г KCl, 1,44 г Na2HPO4 и 0,2 г KH2PO4). Конечным раствором наполняли пробирки на 3 мл, закрывали резиновыми крышками и герметизировали алюминиевыми винтовыми крышками. Данную вакцину хранили при 2-8°С (стабильна в течение 39 месяцев). После данной вакцины, разведенную вакцину получали разведением антигена в аналогичном забуференном фосфатом солевом растворе до достижения окончательной концентрации, которая содержит 25% от количества Elisa единиц/мл. Вакцины проверяли, как описано ниже.

Условия содержания лабораторных животных

Стандартные собаки породы бигль шестинедельного возраста без определяемых агглютинирующих сывороточных антител против каждой из серогрупп лептоспиры, указанной выше в данном описании, предоставлены частным поставщиком. В каждом опыте экспериментальная группа (n=8) состояла из щенков обоих полов и щенков, выбранных из разных приплодов для предотвращения гендерных и генетических эффектов, влияющих на экспериментальные эффекты. У выбранных собак не было клинических патологий или заболеваний перед включением в данные исследования. Условия были аналогичными в каждом опыте.

Вакцинация

Во всех опытах собак вакцинировали подкожно дважды, в возрасте 6 и 10 недель, 1 мл соответствующей вакцины.

Опыт

Опытными штаммами были Leptospira Interrogans серогруппы Canicola серотипа Canicola штамм Moulton, Leptospira Interrogans серогруппы Icterohaemorrhagiae серотипа Copenhageni штамм CF1 (оба штамма получены от National Leptospirosis Reference Centre, KIT Biomedical Research, Амстердам, Нидерланды), Leptospira kirschneri серогруппы Grippotyphosa серотипа Bananal/Liangguang штамм 11808 и Leptospira Interrogans серогруппы Australis серотипа Bratislava штамм As-05-101 (оба получены от Министерства сельского хозяйства США, Национального центра заболеваний животных). Для каждого из четырех штаммов была проведена следующая процедура. Соответствующий опытный материал готовили из культуры, хранящейся в жидком азоте, и дважды промывали в среде Ellinghausen-McCullough, преобразованной Johnson и Harris (Faine 1994; Клинический лептоспироз у людей, клинический лептоспироз у животных; о лептоспире и лептоспирозе, CRC Press, 1994; стр. 1-13, 199-225). Культуры, хранящиеся в жидком азоте, повторно выделяли из экспериментально зараженных животных: штаммы CF1 и 11808 повторно выделяли из почки хомяка, штамм Moulton повторно выделяли из почки собаки и штамм As-05-101 повторно выделяли из мочи собаки. Во всех опытах данный этап занимал три недели после второй вакцинации при комбинации двух способов постановки опыта: внутрибрюшинная (в/б) инъекция (2 мл) и конъюнктивальная инстилляция (0,25 мл в вентральную оболочку конъюнктивы каждого глаза). Концентрации бактериальных клеток (клетки/мл) в опытных материалах определяли путем общего прямого подсчета под темнопольным микроскопом и составляли от 0,5 до 10×109 клетки/мл.

Обследование

Собак регулярно обследовали на протяжении каждого эксперимента, включая измерение температуры тела после опыта с использованием подкожных датчиков. Образцы крови и сыворотки брали путем пункции яремной вены через регулярные интервалы в течение эксперимента для проверки количества тромбоцитов, бактериальной культуры, ПЦР и антител к лептоспире. Образцы сыворотки анализировали с помощью реакции микроагглютинации (МАР) против серогрупп Canicola, Ictero, Grippo и Australis (Faine 1994). Титры микроагглютинации соответствовали обратным величинам наибольших разведений сыворотки, которые индуцировали 50% агглютинацию. Образцы крови с использованием EDTA в качестве антикоагулянта использовали для оценки количества тромбоцитов после опыта при помощи счетчика клеток Cell-Dyn 3500 (Abbott Laboratories, Abbott Park, Иллинойс, США).

EDTA или кровь с гепарином использовали для повторного выделения опытных организмов из крови до 21 дня после опыта. Для той же цели собирали образцы мочи через регулярные интервалы путем цистоцентеза, также брали образец ткани почки при проведении вскрытия на 4 неделе после опыта и проводили процедуры, описанные выше (Klaasen HLBM, Molkenboer MJCH, Vrijenhoek MP и др. Длительность иммунитета у собак, привитых против лептоспироза бивалентной инактивированной вакциной. Vet Microbiol 2003; 95:121-132). Образцы крови, мочи и гомогенат ткани почки высевали на EMJH среду, и инкубировали и исследовали культуры, как описано Klaasen.

Образцы сыворотки 0, 3 и 7 дней после опыта исследовали на присутствие ДНК опытных организмов с помощью ПЦР в реальном времени, направленной на ген secY. Данная ПЦР представляет собой валидированный анализ и удобна для обнаружения ДНК всех патогенных видов Leptospira (Ahmed A, Engelberts MFM, Boer KR и др. Развитие и валидация ПЦР в реальном времени для обнаружения патогенных видов Leptospira в клинических материалах. PLoS ONE 2009; 4(9):e7093). ПЦР была представлена WHO/FAO/OIE и National Leptospirosis Reference Centre, KIT Biomedical Research, Амстердам, Нидерланды. Результаты ПЦР были разделены на положительные, допустимые и отрицательные.

Собак с тяжелыми клиническими проявлениями после опыта подвергали гуманной эвтаназии. Патологоанатомическое исследование, включающее гистопатологическое исследование с особой тщательностью, привело к обнаружению интерстициального нефрита [Klaasen 2003], развивавшегося в данных случаях.

К собакам с положительной пробой на заражение относили собаку по меньшей мере с двумя положительными образцами крови (по культуре) или сыворотки (по ПЦР) или мочи/почки (по культуре) в разные дни, или собаку с нефритом, индуцированным опытом, или клиническим или гематологическим признаком (тромбоцитопения) лептоспироза. К собакам с положительной пробой на почечную инфекцию (животное-переносчик, постоянный носитель) относили собаку по меньшей мере с одним положительным образцом мочи/почки на 14 день после опыта и позже или с нефритом, индуцированным опытом (обнаруженном на гистопатологическом исследовании).

Результаты

Ниже представлены результаты для четырех вакцин (разведенной и неразведенной). Показано, что вакцины даже при 25% разведении обеспечивают защиту собак от заражения и защищают почти всех лабораторных животных от почечной инфекции.

Таблица 1
Опытный штамм Canicola
Вакцина Собаки с положительной пробой на инфекцию Собаки с положительной пробой на почечную инфекцию
100% сanicola 2/8 0/8
25% сanicola 1/8 1/8
контроль 8/8 8/8

Таблица 2
Опытный штамм Icterohaemorrhagiae
Вакцина Собаки с положительной пробой на инфекцию Собаки с положительной пробой на почечную инфекцию
100% сanicola 0/7 0/7
25% сanicola 3/7 0/7
контроль 7/7 7/7

Таблица 3
Опытный штамм Grippotyphosa
Вакцина Собаки с положительной пробой на инфекцию Собаки с положительной пробой на почечную инфекцию
100% сanicola 0/8 0/8
25% сanicola 0/8 0/8
контроль 7/8 6/8

Таблица 4
Опытный штамм Bratislava
Вакцина Собаки с положительной пробой на инфекцию Собаки с положительной пробой на почечную инфекцию
100% сanicola 0/8 0/8
25% сanicola 0/8 0/8
контроль 6/8 1/8

Пример 2

Убитая бактерия лептоспиры стабильна при 2-8°С на протяжении по меньшей мере 39 месяцев (маркировка доступной на рынке вакцины Nobivac L4). В данном эксперименте для четырех антигенов, присутствующих, как указано в примере 1 (100% вакцины), определяли поддержание уровня по меньшей мере 25% ELISA количества при хранении при 37°С в течение трех месяцев. Результаты отражены ниже. Результирующую массу антигенов (отражает значение трех различных проб) рассчитывали как процент от результирующей массы антигенов аналогичных вакцин, хранящихся при 2-8°С.

Таблица 5
Процентное содержание АГ массы после хранения при 37°С по сравнению с хранением при 2-8°С
Ictero Bratislava Grippo Canicola
98 0 66 80

Показано, что антигены убитых цельных клеток серогрупп Icterohaemorrhagiae, Canicola и Grippotyphosa относительно стабильны при 37°С, но антигены серогруппы Australis серотипа Bratislava не очень стабильны и не достигают по меньшей мере уровня 25%, являющегося установленным критерием эффективности вакцины. Однако при комнатной температуре, обычно 20-25°С, остаточный уровень массы антигенов может быть выше, очевидно, что стабильность, в частности для антигенов Bratislava, но также для антигенов Grippotyphosa и Canicola, может быть увеличена.

Далее проводили испытания по увеличению стабильности в первую очередь с антигенами Bratislava с ожиданием, что какая-либо значительная коррекция также увеличит стабильность других антигенов.

Пример 3

Заданные концентрации (1000 ед/мл) аналогичных Bratislava антигенов, как описано в примере 1, помещали в лимонную кислоту путем растворения цитрата натрия в растворах с различным рН. Первый буфер использовали при приведении рН к 5 (4,1 г дегидратированного цитрата натрия и 1,3 г моногидрата лимонной кислоты на литр), и второй при приведении рН к 6 (5,4 г дегидратированного цитрата натрия и 0,33 г моногидрата лимонной кислоты на литр). Также, сам цитрат натрия разводили до получения рН 7. В качестве контроля антигены помещали в забуференный фосфатом солевой раствор, как приведено в примере 1 (рН 7,2), и 20 мМ ацетатного буфера (рН 5; 1,99 г тригидрата ацетата натрия и 0,32 г уксусной кислоты). Были достигнуты конечные концентрации, указанные в таблице 6 ниже. Данными растворами наполняли пробирки на 3 мл, закрыли резиновыми крышками и герметизировали алюминиевыми винтовыми крышками.

Таблица 6
Растворы, использованные для опытов по стабильности антигенов Bratislava
Раствор Содержание помимо 1000 ед/мл убитых цельных клеток Leptospira Bratislava
1 забуференный фосфатом солевой раствор
2 20 мМ цитрата, буферизованного до рН 5
3 20 мМ цитрата, буферизованного до рН 6
4 20 мМ цитрата, рН 7
5 20 мМ ацетатного буфера, рН 5

Половину пробирок инкубировали при 2-8°С, в то время как другую половину инкубировали при 37°С. Через 3 и 9 месяцев пробирки анализировали на антигены Leptospira Bratislava, используя ELISA тест на массу антигенов. Массу антигенов определяли по сравнению с массой антигенов стандартного образца. Результаты представлены ниже в таблице 7. Результирующую массу антигенов (отражает значение трех различных проб) рассчитывали как процент от результирующей массы антигенов аналогичных вакцин, хранящихся при 2-8°С.

Таблица 7
Процентное содержание массы АГ после хранения при 37°С по сравнению с хранением при 2-8°С
Раствор Хранение в течение 3 месяцев Хранение в течение 9 месяцев
1 0 0
2 93 Не обнаружено
3 93 86
4 47 Не обнаружено
5 13 Не обнаружено

Показано, что стабильность убитых бактериальных антигенов серогруппы Australis серотипа Bratislava значительно возрастает при добавлении лимонной кислоты в раствор. Установленный критерий в виде по меньшей мере 25% массы антигенов после трех месяцев хранения при 37°С (и даже значительно дольше) по сравнению с вакциной, хранящейся при стандартных условиях, встречался при различных уровнях рН, однако оказалось, что рН от 5 до 6 приводит к наилучшим результатам. Использование рН 5 без лимонной кислоты не привело к какому-либо приемлемому результату (раствор 5). Нижний предел для лимонной кислоты легче определить с помощью обычного опыта: при условии, что стабильность после трех месяцев хранения при 37°С составляет 25% или выше, установленный критерий стабильности встречается. Верхний предел можно найти аналогичным способом, однако тогда надежность раствора может стать критерием. Необходимый уровень надежности можно установить на любом требующемся уровне и не противоречит настоящему изобретению.

Из-за обозначенного высокого сходства антигенов можно обоснованно ожидать, что при использовании аналогичного критерия (добавление антигенов Leptospira к раствору лимонной кислоты) стабильность других убитых бактериальных антигенов лептоспиры можно повысить. Это было проверено на опыте и результаты представлены ниже в соответствии с таблицей 4.

Пример 4

Заданные концентрации аналогичных четырех антигенов Leptospira, как описано в примере 1, помещали в лимонную кислоту трех различных концентраций (10, 20 и 50 ммоль/л) при рН 6. Как и контроль, антигены помещали в забуференный фосфатом солевой раствор. Растворами наполняли пробирки на 3 мл, закрывали резиновыми крышками и герметизировали алюминиевыми винтовыми крышками.

Половину пробирок инкубировали при 2-8°С, в то время как другую половину инкубировали при 27°С. После 8 недель и 9 месяцев пробирки анализировали на антигены Leptospira, используя ELISA тест на массу антигенов. Массу антигенов определяли по сравнению с массой антигенов стандартного образца. Результаты для разных видов антигенов представлены ниже в таблицах 8, 9, 10 и 11. Результирующую массу антигенов (отражает значение трех различных проб) рассчитывали как процент от результирующей массы антигенов аналогичных вакцин, хранящихся при 2-8°С.

Таблица 8
Процентное содержание массы АГ Bratislava после хранения при 27°С по сравнению с хранением при 2-8°С
Концентрация цитрата [мМ] Хранение в течение 8 недель Хранение в течение 9 месяцев
10 100 44
20 100 84
50 97 80
0 (контроль) 75 0

Таблица 9
Процентное содержание массы АГ Grippotyphosa после хранения при 27°С по сравнению с хранением при 2-8°С
Концентрация цитрата [мМ] Хранение в течение 8 недель Хранение в течение 9 месяцев
10 100 100
20 100 100
50 94 94
0 (контроль) 100 59

Таблица 10
Процентное содержание массы АГ Icterohaemorrhagiae после хранения при 27°С по сравнению с хранением при 2-8°С
Концентрация цитрата [мМ] Хранение в течение 8 недель Хранение в течение 9 месяцев
10 97 100
20 100 100
50 100 100
0 (контроль) 91 98

Таблица 11
Процентное содержание массы АГ Canicola после хранения при 27°С по сравнению с хранением при 2-8°С
Концентрация цитрата [мМ] Хранение в течение 8 недель Хранение в течение 9 месяцев
10 92 100
20 93 98
50 89 82
0 (контроль) 74 51

Показано, что стабильность разных видов убитых бактериальных антигенов Leptospira значительно повышается при добавлении лимонной кислоты в раствор по аналогии с предположениями, основанными на результатах с антигенами Bratislava. Установленный критерий в виде по меньшей мере 25% массы антигенов после трех месяцев хранения при 27°С (и даже значительно дольше) по сравнению с вакциной, хранящейся при стандартных условиях, встречался в различных растворах лимонной кислоты.

1. Стабилизированная антигенная композиция, содержащая иммуногенный препарат клеток убитой бактерии Leptospira в растворе лимонной кислоты, причем раствор представляет собой буферный раствор с рН от 5 до 6, причем раствор содержит 10, 20 или 50 ммоль/л лимонной кислоты.

2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что бактерия Leptospira выбрана из Leptospira interrogans серогруппы Canicola серотипа Portland-Vere, Leptospira interrogans серогруппы Australis серотипа Bratislava, Leptospira interrogans серогруппы Icterohaemorrhagiae серотипа Copenhageni и Leptospira kirschneri серогруппы Grippotyphosa серотипа Dadas.

3. Композиция по п.2, отличающаяся тем, что бактерия Leptospira представляет собой Leptospira interrogans серогруппы Australis серотипа Bratislava.

4. Вакцина для защиты животных от заражения бактерией Leptospira, отличающаяся тем, что вакцина содержит композицию по любому из предшествующих пунктов.

5. Применение раствора лимонной кислоты в количестве 10, 20 или 50 ммоль/л лимонной кислоты для стабилизации иммуногенного препарата убитой бактерии Leptospira в жидком носителе путем растворения лимонной кислоты в носителе.

6. Применение по п.5, отличающееся тем, что препарат сохраняет по меньшей мере 25% массы антигенов при хранении в течение 3 месяцев при температуре выше 18°С.

7. Применение по п.5 или 6, отличающееся тем, что препарат сохраняет по меньшей мере 25% массы антигенов при хранении в течение 3 месяцев при температуре от 18°С до 37°С.

8. Применение по любому из пп.5-7, отличающееся тем, что препарат сохраняет по меньшей мере 25% массы антигенов при хранении в течение 3 месяцев при температуре 37°С.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к очистке загрязненных бактериями поверхностей костных и дентальных имплантатов или других загрязненных биопленкой компонентов. Представлено применение обрабатывающей жидкости, образованной водным раствором кислоты, в который добавлена соль металла таким образом, что обеспечивается проводимость по меньшей мере 30 мСм/см для устранения биопленки с загрязненных бактериями поверхностей.

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической микробиологии, и предназначено для преодоления устойчивости грамотрицательных микроорганизмов вида Acinetobacter baumannii, продуцирующих металло-β-лактамазу (МβЛ), к карбапенемам.

Изобретение относится к способам лечения и профилактики бактериальной инфекции у субъекта, способам получения лекарственного средства для применения в лечении и профилактике бактериальной инфекции у субъекта, а также к антибактериальным композициям, содержащим терапевтически эффективное количество робенидина или его терапевтически приемлемой соли и соединение или агент, который устраняет или уменьшает целостность клеточной стенки.

Изобретение относится к химии органических гетероциклических соединений, а именно - к новой четвертичной аммониевой соли, содержащей фрагмент производного витамина В6, формулы I.

Изобретение относится к конкретным соединениям, перечисленным в п.1 формулы изобретения, которые могут найти применение при лечении или профилактике бактериальной колонизации или инфекции у субъекта.

Группа изобретений относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой водную бактерицидную композицию, имеющую pH от 1 до 5, содержащую от 0,05 до 5% по массе муравьиной кислоты, от 0,05 до 5% по массе молочной кислоты, от 0 до 5% по массе одного или более неионных поверхностно-активных веществ, где неионное поверхностно-активное вещество представляет собой этоксилат спирта, и от 0,1 до 5% по массе одного или более анионных поверхностно-активных веществ, где анионное поверхностно-активное вещество представляет собой α-олефин сульфонат и лаурилсульфат натрия, который содержится в количестве от 0 до 0,3% по массе; композицию бактерицидного концентрата, при разбавлении одной массовой части которого от 1 до 100 массовыми частями воды получают композицию водного раствора.

Изобретение относится к медицине, а именно к гемостатическому антибактериальному средству, его применению, способу получения, к медицинскому изделию на основе антибактериального средства и его применению, причем гемостатическое антибактериальное средство представляет собой супрамолекулярный комплекс в виде порошка, содержащий окисленную порошковую целлюлозу и ванкомицин, связанные посредством нековалентных межмолекулярных водородных связей, в котором содержание ванкомицина составляет от 20 до 40 мас.

Группа изобретений включает: способ лечения бактериальной инфекции у ребенка, включающий пероральное введение эффективного количества композиции, содержащей пищевой продукт, матери указанного ребенка, в котором пищевой продукт был ферментирован посредством пробиотической бактерии Lactobacillus paracasei СВА L74, регистрационный номер в международном депозитарии LMG Р-24778, соответствующий способ профилактики или снижения тяжести бактериальной инфекции у ребенка; применение указанной пробиотической бактерии для получения пищевого продукта для лечения бактериальной инфекции у ребенка и применение указанной пробиотической бактерии для получения пищевого продукта для профилактики или снижения тяжести бактериальной инфекции у ребенка.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу получения вещества, обладающего антибактериальной и противогрибковой активностью.

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для лечения инфекционных заболеваний посредством применения комбинированных антимикробных препаратов (АМП).

Изобретение относится к способу повышения стабильности антибактериальной инъекционной фармацевтической композиции на основе азитромицина. Способ по изобретению характеризуется введением в эффективном количестве лидокаина или новокаина в состав лекарственного средства, содержащего азитромицин, консерванты из ряда: бензиловый спирт, или хлорэтон, или парабены, регуляторы кислотности (рН) из ряда: лимонная кислота, или бензойная кислота, или винная кислота, органические сорастворители из ряда: пропиленгликоль, или транскутол, или 2-пирролидон, или диметилсульфоксид, или диметилацетамид, или N-метил-2-пирролидон и воду для инъекций, в указанных в формуле изобретения количествах.

Настоящее изобретение относится к новым биологически активным соединениям, производным бисамидов дикарбоновых кислот общей формулы I или их фармацевтически приемлемым солям, где R1 представляет собой 5-членную ненасыщенную гетероциклическую группу, содержащую 2 гетероатома, выбранных из N и/или S, необязательно конденсированную с 6-членной ненасыщенной циклической группой; R2 представляет собой группу -С(О)-R3-C(O)-, где R3 представляет собой группу -(CH2)n-, необязательно замещенную одним или двумя С1-С6 алкилами, или фенил, n представляет собой целое число от 0 до 4.

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к препаратам для профилактики желудочно-кишечных заболеваний у поросят. Препарат содержит аминазин, аскорбиновую кислоту, азотнокислое серебро, сукцинат натрия, измельченный цеолит.
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и инфекционным болезням, и может быть использовано для лечения инфекции, вызванной возбудителем или возбудителями с множественной лекарственной устойчивостью путем проведения персонифицированной фаготерапии.

Группа изобретений относится к иммунологии. Предложены иммуногенные композиции для индуцирования бактериального иммунного ответа у человека против штамма подсемейства А серологической группы В Neisseria meningitidis и против штамма подсемейства В серологической группы В Neisseria meningitidis.

Группа изобретений относится к медицине и касается пептида, который обладает антимикробной активностью, выбранного из пептидов, имеющих SEQ ID NO: 1-4. Группа изобретений также касается применения указанного пептида в качестве антибиотика и/или в составе дезинфицирующего средства или очистительного средства; фармацевтической композиции, обладающей антимикробной активностью, содержащей по меньшей мере один указанный пептид.
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой композицию для лечения заболеваний вирусной и кокковой этиологии, содержащую хинин гидрохлорид, отличающуюся тем, что она дополнительно содержит стрептоцид при следующем соотношении компонентов, мас.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего антимикробной активностью. Способ получения средства, обладающего антимикробной активностью, включающий обработку рыбьего жира 1,0-2,5% раствором натрия хлорида, в котором предварительно растворили соединение поливалентного металла, выбранного из: Cu(NO3)2⋅3H2O, CuCl2⋅2H2O, FeCl3, Fe (NO3)3⋅6H2O, Cr(SO4)3, K2Cr2O7, NiCl2, таким образом, что концентрация металлов в водном растворе натриевой соли составляет 0,02-2,50 ч./млн при соотношении жира к солевому раствору 1:10-15, далее проводят их перемешивание и настаивание в течение 10-15 суток при температуре 18-25°С и постоянном перемешивании с последующим отделением водного слоя.

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии грыж. Проводят иссечение послеоперационного рубца с подкожной клетчаткой в пределах здоровых тканей.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой способ получения концентрированного раствора коллоидного серебра, заключающийся в электрохимическом растворении серебра при начальном напряжении 10-12 В, плотности тока на электродах 45-62 А/м2 в течение от 4-8 до 80 часов с циклическим изменением полярности напряжения с периодом в 15 минут и перемешивании, отличающийся тем, что электрохимическое растворение серебра проводят в дистиллированной воде, в которую в качестве стабилизатора и для создания начальной электропроводности вводят вещество из группы простых моно- или дисахаридов в количестве, обеспечивающем концентрацию 1-3 г/л, а серебро для электрохимического растворения используют в виде пластин чистого серебра с содержанием 99,9-99,99%.

Группа изобретений относится к ветеринарии и касается вакцины, включающей в комбинации живой аттенуированный вирус PRRS и инактивированный антиген Lawsonia intracellularis, для защиты свиней от заражения вирусом PRRS и бактериями Lawsonia intracellularis.

Группа изобретений относится к области медицины, в частности к композиции, содержащей иммуногенный препарат клеток убитой бактерии Leptospira в растворе 10, 20 или 50 ммольл лимонной кислоты. Она также относится к вакцине для защиты животных от заражения бактерией Leptospira, где вакцина содержит данную композицию, и к применению 10, 20 или 50 ммольл лимонной кислоты для стабилизации иммуногенного препарата убитой бактерии Leptospira в жидком носителе путем растворения лимонной кислоты в носителе. Группа изобретений обеспечивает создание вакцины против лептоспироза, которая остается эффективной после трех месяцев хранения при 37°С. 3 н. и 5 з.п. ф-лы, 11 табл., 4 пр.

Наверх