Способ получения препарата энтобактерина-.
О П И С А Н И Е 3784ОЗ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союв Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №вЂ”
М. Кл. С 12d 7/00
А 01п 15/00
Заявлено 26.111.1971 (№ 1637322/30-15) с присоединением заявки №вЂ”
Приоритет—
Комитет по делам ивобретений и открытий при Совете Министров
СССР
Опубликовано 18.IV.1973. Бюллетень № 19
Дата опубликования описания 18Х1. т,973
УДК 663:632.937.15 (088.8) Авторы изобретения
Н. С. Федоринчик, И. А. Строева и С. И. Коростель
Всесоюзный научно-исследовательский институт защиты растений
Заявитель с г . стс с с. с
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ЭНТОБАКТЕРИЙА-..
Кукурузный экстракт
Глюкоза техническая рн раствора
1
6,8 — 7,2
Кукурузный экстракт
Глюкоза техническая
Жир кашалотовый. рН
1
0,05 — 0,1
6,8 — 7,2
Изобретение относится к защите растений, а именно к способам получения препаратов, используемых для борьбы с насекомыми-вредителями.
Известен способ получения препарата энтобактерина путем выращивания культуры
Вас. thuringiensis (cereus) var. galleriae в ферментерах на среде, содержащей кукурузный экстра|кт, глюкозу, каустическую соду и воду.
Микробную массу высушивают и добавляют наполнитель.
Однако при этом способе не учитывается способность некоторых штаммов выделять в культуральную среду в процессе форментации термостабильный экзотоксин в растворенном виде. Этим и объясняется, что культуральная жидкость с содержащимся в ней термостабильным экзотоксином не утилизируется, а идет в отход.
Цель изобретения — получить термостабильный экзотоксин.
Это достигается тем, что высушивание массы проводят вместе с культуральной жидкостью при 115 †1 С.
Для выращивания используют штаммы, заведомо продуцирующие термостабильный экзотоксин.
Выращивание посевного материала производят в биологических матрицах на плотной питательной среде, содержащей, %:
5 Для засева матрацев используют суспензию заспорованной культуры, полученную смывом ее с косяка исходной пробирки.
Культуру на матрице выращивают в термостате при 30 С в течение 8 — 10 час до ста10 дии молодых вегетативных клеток.
Культуру, полученную в биологическом матраце, смывают с твердой, питательной среды раствором кукурузно-глюкозовой среды. Поl5 лученной суспензией в количестве 500 и г с титром 1Х10 клеток/лл (0,005%) при отсутствии в ней посторонней микрофлоры и фага засевают ферментеры с объемом питательной среды 1О м, содержащие среду следующего
20 состава, % :
Культуру в ферментерах выращивают при
29 — 31 С в течение 30 — 35 час при аэрации
О,1 — 0,2 л воздуха на 1 л среды в минуту прн непрерывной работе мешалки.
378408
Процесс культивирования прекращают прп наличии в культуральной жидкости до 5% свободных спор и кристаллов от общего количества включений; при отсутствии посторонней микрофлоры, при титре культуры не менее 1 млрд. спор/мл.!
Нативная культуральная жидкость
Насекомые
C;p = 0,125 лгл/лил ": (0,098 — 0 132)
C» = 0.0112 гил/г средь "" (0,0085 — 0,0148) С» = 0,007 лгл/слг (О 00925 — О 0053)
С» = 0,216 лнл/гнл (0,164 — 0.285)
С;„= 0,13 лглг/лгл (0,099 — 0,172)
Cpp = 0,0545 гил/лог (0,0415 — 0.072)
С» = 0,!21 лил/гил (0,0912 — О, i 59) С;о = 0,0282 лгл/гил (0,0214 — 0,0372)
C;p — — 1,113 лгл/лгл (0,845 — 1,47)
С» = 2,25 мл/лгл (1,71 — 2,97)
См=2,16 гил/лгл (1,64 — 2,85) Предмет,изобретения
Примечания: — миллиметров нативной культуральной жидкос ra на миллиметр раствора — миллиметров нативной культура IbaoH жидкости на грамм питательной среды
""" — миллиметров нативной культура ILillofl жидкости на 1 слгг обрабатываемой поверхности.
Из ферментеров культуральную жидкость передают в сборники, здесь культуру тщательно перемешивают и передают на сушку.
Составитель М. Дранишников
Техред T. Миронова Корректор Е. Талалаева
Редактор Л. Народная
Заказ 338/1075 Изд. № 478 Тираж 467 Подписное ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, лК-35, Раушская наб., д. 4/5
Тип. Харьк. фил. пред. «Патент»
Комнатная;, уха (имаго)
Комнатная муха (личинки в возрасте 64 ——
68 «ac).
Яблонная плодожорка (гусеницы 1 возраста)
Совка ипсилон (гусеницы II — III возраста)
Совка зерновая (гусешшы !1 — III возраста)
Совка озимая (гусеницы III — IV возраста)
Совка капустная (гусеницы I I I — IV возраста)
Комар кровососущий (11 возраст)
Вредная черепашка (111 возраст)
Итальянский прус (имаго)
Рыжий таракан (имаго) Сушку культуральной жидкости вместе с кристаллическими включениями и спорами производят в потоке горячего воздуха на распылительпо-сушильной установке типа Т-100 при температуре воздуха 115 — 118 С.
Полученный сухой продукт проверяют н.-г биологическую активность на тест-насекомых: большая вощинная моль, 7-й возраст и 64 — 68часовые личинки комнатной мухи.
Затем доводят высушенный продукт до стандартной биологической активности путем добавления наполнителя и тщательно перемешивают полученный состав в смесителе, Полученный препарат обладает широким изоирательным действием.
Препарат эффективен против таких представителей чешуекрылых, как совки и яблоцная плодожорка, двукрылых (мухи, комары), прямокрылых (вредная черепашка) и может быть использован в течение всего вегетационного периода на многих сельскохозяйственных культурах, а также в других областях народного хозяйства.
1. Способ получения препарата энтобактерина путем выращивания штаммов Bacillus
thurirIgier!sis (cereus) var. galleriae на питательной среде, содержащей кукурузный экстракт, глюкозу, каустическую соду и воду, включающий высушивание микробной массы и добавление наполнителя, отличающийся тем, 35 что, с целью получения термостабильного экзотоксина, высушивание микробной массы проводят вместе с культуральной жидкостью при
115 †118.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что
40 для выращивания используют штаммы, продуцирующие термостабильный экзотоксин.
